基于糖氧剥夺/复供损伤SD大鼠星形胶质细胞和神经元的脉络宁抗炎机制研究
发布时间：2023-02-18 20:35
目的:研究脉络宁注射液于SD大鼠神经元和星形胶质细胞在糖氧剥夺/复供损伤后发挥的保护作用和抗炎机制。方法:将神经元和星形胶质进行分离提取及鉴定,运用Transwell建立二者的共培养体系。通过显微镜下观察细胞形态,用共聚焦显微镜对神经元和星形胶质进行鉴定。用物理法(95%N2+5%CO2)建立SD大鼠神经元与星形胶质糖氧剥夺/复供损伤模型.用CCK-8法筛选脉络宁最佳保护浓度并测定脉络宁不同浓度的干预对糖氧剥夺/复供损伤后的神经元和星形胶质细胞保护作用。用试剂盒法测不同浓度的脉络宁预处理后对神经元和星形胶质漏出量的影响。采用western blot检测GLT-1及加入其抑制剂DHK后GLT-1的蛋白表达量。试剂盒法测糖氧剥夺/复供损伤后神经元和星形胶质共培养分泌的上清液中TNF-α、IL-1β的表达量。蛋白免疫印迹法检测各个浓度的脉络宁预处理的星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤后p-NF-κB p65及IκBα蛋白表达的变化。结果:提取分离并培养出了高纯度的SD大鼠的神经元和星形胶质,神经元和星形胶质共培养的体系成功得以建立;脉络宁干预过的糖氧剥...
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英汉缩略词名词对照
前言
第一部分 SD大鼠星形胶质与神经元的共培养体系的建立
1 引言
2 实验材料
2.1 实验动物
2.2 试剂与药品
2.3 主要仪器
2.4 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 SD大鼠神经元与星形胶质细胞的分离方法
3.2 神经元与星形胶质细胞的鉴定
3.3 神经元与星形胶质细胞共培养体系的建立
4 结果
4.1 神经元与星形胶质细胞的细胞形态的观察
4.2 SD大鼠神经元和星形胶质细胞的鉴定
5 讨论
6 小结
第二部分 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
1 引言
2 实验材料
2.1 试剂
2.2 仪器
2.3 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 CCK-8 法检测脉络宁对星形胶质的毒性影响
3.2 脉络宁对神经元和星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
3.3 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
3.4 统计学处理
4 实验结果
4.1 脉络宁对星形胶质细胞的毒性试验
4.2 脉络宁对星形胶质细胞和神经元糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
4.3 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
5 讨论
6 小结
第三部分 脉络宁对SD大鼠神经元细胞与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护机制研究
引言
第一节 脉络宁对星形胶质细胞谷氨酸转运体表达的研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
5 小结
第二节 脉络宁对神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤时IL-1β、TNF-α炎症因子的影响
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
第三节 谷氨酸转运体抑制剂DHK对神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤时TNF-α、IL-1β 炎症因子的影响
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
5 小结
第四部分 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤时p-NF-κB p65和IκBα 蛋白表达的影响
1 引言
2 实验材料
2.1 试剂与仪器
2.2 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤模型IκBα 和p-NF-κB p65蛋白表达的影响
3.2 BCA蛋白定量
3.3 western blot检测目的蛋白的表达量
3.4 数理统计
4 实验结果
4.1 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤IκBα 蛋白表达的影响
4.2 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤p-NF-κB p65蛋白表达的影响
5 小结
全文总结
参考文献
致谢
本文编号：3745486
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英汉缩略词名词对照
前言
第一部分 SD大鼠星形胶质与神经元的共培养体系的建立
1 引言
2 实验材料
2.1 实验动物
2.2 试剂与药品
2.3 主要仪器
2.4 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 SD大鼠神经元与星形胶质细胞的分离方法
3.2 神经元与星形胶质细胞的鉴定
3.3 神经元与星形胶质细胞共培养体系的建立
4 结果
4.1 神经元与星形胶质细胞的细胞形态的观察
4.2 SD大鼠神经元和星形胶质细胞的鉴定
5 讨论
6 小结
第二部分 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
1 引言
2 实验材料
2.1 试剂
2.2 仪器
2.3 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 CCK-8 法检测脉络宁对星形胶质的毒性影响
3.2 脉络宁对神经元和星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
3.3 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
3.4 统计学处理
4 实验结果
4.1 脉络宁对星形胶质细胞的毒性试验
4.2 脉络宁对星形胶质细胞和神经元糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
4.3 脉络宁对SD大鼠神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护作用
5 讨论
6 小结
第三部分 脉络宁对SD大鼠神经元细胞与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤的保护机制研究
引言
第一节 脉络宁对星形胶质细胞谷氨酸转运体表达的研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
5 小结
第二节 脉络宁对神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤时IL-1β、TNF-α炎症因子的影响
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
第三节 谷氨酸转运体抑制剂DHK对神经元与星形胶质细胞共培养糖氧剥夺/复供损伤时TNF-α、IL-1β 炎症因子的影响
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
5 小结
第四部分 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤时p-NF-κB p65和IκBα 蛋白表达的影响
1 引言
2 实验材料
2.1 试剂与仪器
2.2 试剂与药品的配制方法
3 实验方法
3.1 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤模型IκBα 和p-NF-κB p65蛋白表达的影响
3.2 BCA蛋白定量
3.3 western blot检测目的蛋白的表达量
3.4 数理统计
4 实验结果
4.1 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤IκBα 蛋白表达的影响
4.2 脉络宁对星形胶质细胞糖氧剥夺/复供损伤p-NF-κB p65蛋白表达的影响
5 小结
全文总结
参考文献
致谢
本文编号：3745486
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3745486.html
最近更新
教材专著
