加味丹参饮基于自噬干预大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的研究

发布时间：2023-02-26 02:07

　　目的观察加味丹参饮预处理对离体大鼠心脏缺血再灌注调节心肌细胞自噬相关基因蛋白表达的影响。方法将60只SD大鼠随性别随机分为6组:空白组,缺血预适应组,模型组,全方组(加味丹参饮组),全方+自噬抑制剂组,全方+雷帕霉素组,实验2周前予以灌胃处理,换算预处理200g大鼠每日灌胃药量为1.2g,药物浓度1g/ml,每日剂量1.2ml,分两次灌胃。空白组、模型组、缺血预适应组予以等量生理盐水,全方组、自噬抑制剂组、雷帕霉素组均灌胃中药,自噬抑制剂组同时予以腹腔注射3-MA(2mmol/L),给药剂量3.0mg/200g,其余各组等量腹腔注射生理盐水;雷帕霉素组同时予以灌胃雷帕霉素,浓度0.2mg/ml,给药剂量0.4mg/200g,其余各组灌胃等量生理盐水。采用Langendorff灌流系统建立离体心脏心肌缺血再灌注模型,对照组:大鼠心脏用K-H液平衡灌注180 min;缺血再灌注模型组:大鼠心脏先预灌注20 min,然后再无氧、无灌流液的情况下停止灌流40 min(缺血),心脏始终保持在37℃恒温槽中,之后再复灌2小时(再灌);缺血预适应组:大鼠心脏预灌注平衡20 min,缺血5 min,再...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
英文缩写
前言
第一部分 材料和方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 实验试剂
        1.4 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 离体心脏缺血再灌注模型建立
        2.2 大鼠离体心脏缺血再灌注模型制备成功的入选标准
        2.3 实验动物分组及处理
        2.4 实验动物给药
    3 指标检测及方法
        3.1 血清心肌酶测定
        3.2 心功能评价
        3.3 光镜观察心肌组织病理标本的制作
        3.4 透射电子显微镜检测的标本制作
        3.5 实时荧光定量RT-PCR法检测自噬相关基因Beclin-1、Atg5m RNA的表达
        3.6 免疫印迹法检测自噬体膜标志性蛋白质LC3，Beclin-1 表达
        3.7 统计学处理
第二部分 结果
    1 实验结果
        1.1 实验大鼠的情况
        1.2 大鼠心肌缺血再灌注损伤心功能评价
        1.3 实验各组K-H液中心肌酶的变化
        1.4 大鼠心肌病理形态学观察
        1.5 透射电镜下观察心肌细胞超显微结构
        1.6 加味丹参饮对离体大鼠缺血再灌注中心肌细胞自噬Beclin-1、Atg5 m RNA的表达
        1.7 加味丹参饮对离体大鼠缺血/再灌注心肌自噬Beclin-1、LC3B蛋白表达量的影响
第三部分 讨论
    1、心肌缺血再灌注损伤的认识
        1.1 西医对心肌缺血再灌注损伤的认识
        1.2 中医对心肌缺血再灌注损伤的认识
    2、自噬的认识
        2.1 西医对细胞自噬的认识
        2.2 中医对细胞自噬的认识
        2.3 自噬对心肌细胞的作用
    3、加味丹参饮
        3.1 加味丹参饮由来方解
        3.2 加味丹参饮现代药理研究
        3.3 加味丹参饮前期研究
    4、小结
        4.1 改善心功能降低CK、LDH的释放
        4.2 心肌缺血再灌注中Beclin-1、Atg5 m RNA的表达及Beclin-1、LC3B蛋白的表达
    5、结论
致谢
参考文献
综述
    参考文献



本文编号：3749591