九龙藤总黄酮抑制自噬减轻心肌缺血/缺氧损伤

发布时间：2023-03-05 09:08

　　目的研究九龙藤总黄酮(Bauhinia championii flavones,BCF)对心肌缺血/缺氧损伤的抑制作用及机制。方法培养H9c2大鼠心肌细胞,建立OGD模型模拟心肌缺血/缺氧,给予或不给予BCF预处理。以Giemsa染色法观察细胞形态;CCK-8检测细胞活力;ELISA检测细胞培养上清液中心肌肌钙蛋I(cTnI)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;腺病毒(Ad-mRFP-GFP-LC3)转染观察自噬体及自噬溶酶体数量;RT-qPCR检测LC3、P62 mRNA表达;Western blot检测自噬相关蛋白表达。结果与模型组相比,BCF预处理明显改善心肌细胞形态和细胞活力,降低cTnI及CK-MB含量,下调LC3、P62基因及Cathepsin D蛋白表达,上调P62蛋白表达,减少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,抑制自噬(P<0.05 or P<0.01)。结论 BCF通过抑制自噬减轻心肌缺血/缺氧损伤。

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 H9c2大鼠心肌细胞
    1.2 试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 细胞培养与OGD模型的建立
    2.2 药物预处理与分组
    2.3 Giemsa染色法观察H9c2心肌细胞形态
    2.4 CCK-8检测细胞活力
    2.5 Elisa检测cTnI和CK-MB含量
    2.6 腺病毒(Ad-mRFP-GFP-LC3)转染观察自噬体及自噬溶酶体数量
    2.7 RT-qPCR检测基因的表达
    2.8 Western blot 检测蛋白表达
    2.9 统计学分析
3 结果
    3.1 BCF对缺氧H9c2心肌细胞形态的影响
    3.2 BCF对缺氧心肌细胞活力的影响
    3.3 BCF对缺氧心肌细胞培养液中cTnI和CK-MB含量的影响
    3.4 BCF对自噬体与自噬溶酶体形成的影响
    3.5 BCF对缺氧心肌细胞LC3、P62 mRNA表达的影响
    3.6 BCF对自噬通量的影响
4 讨论



本文编号：3755909