橙皮素对PDGF-BB诱导的大鼠原代胸主动脉VSMCs表型转化的影响

发布时间：2023-03-25 05:39

　　目的:探讨橙皮素(HES)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响。方法:4周龄健康雄性SD大鼠1只,5%水合氯醛麻醉后,采用组织块贴壁法提取大鼠胸主动脉原代VSMCs并培养,取对数生长期细胞,采用细胞免疫荧光化学法鉴定VSMCs平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA),采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测2、5、10、25及50μg/L PDGF-BB和10、50、100、150、200、250及300μmol/L的HES对VSMCs增殖活性的影响,筛选PDGF-BB最佳造模条件和HES最佳干预浓度;VSMCs分为对照组(0μg/L PDGF-BB)、造模组(25μg/L PDGF-BB)及加药组(25μg/L PDGF-BB+100μmol/L橙皮素),采用划痕实验检测各组VSMCs的细胞迁移能力,采用Western blot检测各组VSMCs的α-SMA、平滑肌22α(SM22α)、弹性蛋白原(ELN)及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。结果:原代平滑肌细胞呈长梭形,传代2 d后VSMCs有...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 主要试剂和仪器
    1.2 方法
        1.2.1 大鼠原代胸主动脉VSMCs的提取
        1.2.2 大鼠原代胸主动脉VSMCs的培养与α-SMA的鉴定
        1.2.3 CCK-8法筛选药物浓度及细胞分组
        1.2.4 划痕实验检测VSMCs的细胞迁移
        1.2.5 Western blot检测VSMCs中α-SMA、SM22α、ELN和PCNA蛋白的表达
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 原代平滑肌细胞的培养及鉴定
    2.2 PDGF-BB对VSMCs的增殖作用
    2.3 HES对PDGF-BB诱导的VSMCs增殖的作用
    2.4 HES对PDGF-BB诱导的VSMCs迁移能力的影响
    2.5 α-SMA和SM22α蛋白表达
    2.6 ELN和PCNA蛋白表达
3 讨论



本文编号：3770656