补肾中药对2D/3D培养NPCs细胞的保护作用研究

发布时间：2023-04-05 18:00

　　目的:神经退行性疾病是危害中老年健康的主要疾病之一,其中最为常见为阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)和帕金森症(Parkinson Disease,PD)。目前,临床上治疗神经退行性疾病的药物大多为化学药,但化学药毒副作用大容易引起并发症。神经细胞移植和补肾类中药在治疗神经疾病中由于疗效持久、毒副作用小,已经成为近年来治疗神经系统疾病研究的热点。在细胞移植治疗中,神经祖细胞(Neural progenitor cells,NPCs)是常用来进行移植的种子细胞,是一种具有自我更新能力和多种分化潜能的神经细胞,但是从胚胎或神经组织获得的NPCs在临床应用中也存在细胞来源少、组织免疫排斥、伦理学等问题,因此通过体外诱导获得高纯度、高活性的NPCs是解决这一问题的关键。补肾中药近年来在神经系统性疾病的治疗中也显著成效,因此筛选具有神经保护的中药也是为神经系统性疾病患者疾病治疗研究提供理论依据。方法:本论文首先在体外将小鼠诱导多能干细胞(Mice induced pluripotent stem cells,miPSCs)诱导分化为NPCs细胞,在分化过程中加入了维甲酸...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 综述
    1.1 研究的背景和意义
    1.2 神经祖细胞的研究概况
    1.3 神经保护中药研究概况
        1.3.1 远志
        1.3.2 鹿茸
        1.3.3 参远苷
        1.3.4 地黄
        1.3.5 淫羊藿
        1.3.6 栀子
    1.4 3D培养细胞的用途
        1.4.1 3D支架在细胞3D培养中的作用
        1.4.2 细胞外基质在3D培养中的应用
        1.4.3 水凝胶在3D培养中的应用
    1.5 展望
2 体外诱导miPSCs向NPCs定向分化方法的建立
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验细胞系
        2.2.2 主要仪器设备
        2.2.3 药品与试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 miPSCs的培养
        2.3.2 miPSCs向NPCs定向诱导分化
        2.3.3 免疫荧光染色鉴定NPCs标志物
        2.3.4 NPCs向OPCs定向分化及免疫荧光鉴定OPCs标志物
    2.4 实验结果
        2.4.1 miPSCs细胞的形态特点
        2.4.2 NPCs细胞的形态特点
        2.4.3 免疫荧光染色鉴定NPCs标志物结果
        2.4.4 免疫荧光鉴定OPCs标志物结果
    2.5 本章小结
3 中药提取物对NPCs细胞损伤保护作用的研究
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验细胞系
        3.2.2 主要仪器设备
        3.2.3 药品和试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 中药提取物制备
        3.3.2 NPCs细胞的培养
        3.3.3 中药提取物对NPCs细胞增殖的影响
        3.3.4 中药提取物对NPCs细胞皮质酮(CORT)损伤的保护作用
        3.3.5 中药提取物对NPCs细胞谷氨酸(Glu)损伤的保护作用
        3.3.6 免疫荧光染色鉴定中药提取物对NPCs向OPCs分化的影响
    3.4 统计学处理
    3.5 结果
        3.5.1 中药提取物对NPCs细胞增殖的影响
        3.5.2 中药提取物对NPCs皮质酮(CORT)损伤的保护作用
        3.5.3 中药提取物对NPCs细胞谷氨酸(Glu)损伤的保护作用
        3.5.4 免疫荧光染色鉴定中药提取物对NPCs向OPCs分化的影响
    3.6 本章小结
4 鹿茸多肽在3D条件下对NPCs细胞的保护作用
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验细胞系
        4.2.2 主要仪器设备
        4.2.3 药品和试剂
    4.3 实验方法
        4.3.1 小鼠脑细胞外基质的制备及表征
        4.3.2 小鼠脑细胞外基质溶液的制备
        4.3.3 水凝胶支架材料3D培养模型的建立
        4.3.4 3D条件下鹿茸多肽对NPCs细胞保护和分化的影响
    4.4 结果
        4.4.1 小鼠脑细胞外基质表征结果
        4.4.2 水凝胶支架材料3D培养的观察结果
        4.4.3 细胞死活染色结果
        4.4.4 细胞增殖活性结果
        4.4.5 免疫荧光染色鉴定在3D条件下鹿茸多肽对NPCs分化的影响
    4.5 本章小结
讨论
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3783866