川续断皂苷Ⅵ对人脂肪干细胞增殖及成骨分化的影响

发布时间：2023-05-05 21:31

　　1目的:1本实验通过体外细胞培养技术,建立一种提取培养人脂肪来源干细胞(human adipose derived stem cells,hADSCs)的高效方法,在使细胞大量扩增的同时保持其潜在的分化能力,为下一步实验提供稳定的hADSCs培养体系。2通过研究中药单体川续断皂苷Ⅵ(Asperosaponin Ⅵ,ASD)对h ADSCs增殖及向成骨细胞分化的影响,评价ASD在诱导hADSCs向成骨分化过程中的作用,探索ASD作为一种生长因子应用于骨组织工程的可能性,同时为骨组织工程种子细胞的诱导剂的优化选择提供试验依据。2方法:1应用酶消化加离心方法分离、培养hADSCs,并通过倒置相差显微镜观察细胞形态学特点;酶标仪检测各时段吸光度值并分析细胞生长曲线特点;向成骨细胞、脂肪细胞诱导分化并行茜素红染色、油红O染色,鉴定所获得的细胞为hADSCs,作为后续实验的种子细胞。2把ASD溶解到含10%FBS L-DMEM培养基中,配制成10-4 mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L四个浓度组的细胞培养液,同时用成骨诱导液(即阳性对照组由0.1mol/L的β-...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
英文缩略词表
前言
    1 脂肪干细胞生物学特点及在再生医学中的应用
    2 川续断及川续断皂苷Ⅵ的研究进展
    3 中医对骨生长的认识
第一部分 人脂肪干细胞的分离培养与鉴定
    1 研究目的
    2 实验材料
        2.1 研究对象
        2.2 主要试剂
        2.3 主要仪器和设备
    3 实验方法
        3.1 主要试剂的配制
        3.2 人脂肪干细胞的分离与培养
        3.3 hADSCs的传代
        3.4 细胞冻存
        3.5 细胞复苏
        3.6 检测细胞活性
        3.7 hADSCs鉴定
    4 结果
        4.1 显微镜下hADSCs的形态观察
        4.2 hADSCs的增殖曲线
        4.3 hADSCs分化能力的鉴定
    5 讨论
    6 小结
第二部分 ASD对hADSCs增殖与成骨分化的影响
    1 研究目的
    2 实验材料
        2.1 细胞来源
        2.2 主要仪器和试剂
    3 实验方法
        3.1 主要试剂的配制
        3.2 观察ASD对hADSCs增殖的影响
        3.3 观察ASD对hADSCs向成骨细胞分化的影响
    4 实验结果
        4.1 ASD及成骨诱导液对hADSCs细胞增殖的影响
        4.2 ASD对hADSCs向成骨细胞分化的影响
    5 讨论
    6 小结
结论
问题与展望
参考文献
综述
    参考文献
个人简介
读学位期间发表的学术论文目录
致谢



本文编号：3808394