桦木酸抑制HeLa细胞系增殖机制的研究

发布时间：2023-10-03 19:05

　　桦木酸是一种天然的五环三萜类化合物,可抑制多种肿瘤细胞系的增殖,且抑制机制具有细胞特异性,在不同细胞中的抑制靶点不尽相同。以往研究发现桦木酸可抑制宫颈癌细胞系生长,但抑制机理并不清楚,因此本论文以人宫颈癌细胞系HeLa为研究对象,解析桦木酸抑制细胞增殖和促进凋亡作用及其介导的信号转导通路,为深入阐明桦木酸抑制人宫颈癌细胞的增殖机制提供实验依据。1.不同浓度桦木酸处理HeLa细胞不同时间的结果证实桦木酸可有效抑制HeLa细胞增殖并引起细胞凋亡,且呈现时间和剂量依赖性。计算不同处理时间点下的半数抑制浓度(IC50),并结合细胞凋亡检测结果,为保证蛋白总量能够满足双向电泳要求,确定以30 μmol/L桦木酸处理HeLa细胞系48 h为双向电泳实验的处理条件。2.蛋白质组学分析显示,HeLa细胞中有36个蛋白质受桦木酸诱导差异表达,其中有6个上调蛋白质,30个下调蛋白质。功能学分析表明这些蛋白分别参与了细胞代谢、生化反应、蛋白定位等不同的生物学过程,而依据蛋白质的功能不同,又可将其分成催化功能型蛋白、氧化还原型蛋白、翻译调控型蛋白等。遗憾的是,依据蛋白质组学分析结果未能推测出与细胞增殖和凋亡直...

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 桦木酸及其抗肿瘤活性
        1.1.1 桦木酸结构与理化性质
        1.1.2 桦木酸抗肿瘤活性
        1.1.3 桦木酸诱导细胞凋亡机制
    1.2 细胞增殖机制与肿瘤发展
        1.2.1 细胞增殖
        1.2.2 宫颈癌
    1.3 蛋白质组学概述
        1.3.1 蛋白质组学在不同疾病研究中的应用
        1.3.2 蛋白质组学在药物研发中的应用
    1.4 立题依据
2 桦木酸抑制HeLa细胞系增殖的蛋白质组学分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验试剂
        2.1.3 常用试剂配方
        2.1.4 试验仪器
        2.1.5 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 桦木酸对HeLa细胞增殖和凋亡的影响
        2.2.2 桦木酸诱导的HeLa细胞蛋白质差异表达
        2.2.3 差异蛋白质定位及功能分类
        2.2.4 qRT-PCR验证
    2.3 讨论
    2.4 本章小结
3 桦木酸抑制HeLa细胞系增殖的信号途径分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验试剂
        3.1.3 常用试剂配方
        3.1.4 试验仪器
        3.1.5 试验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 桦木酸抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡的时间节点
        3.2.2 桦木酸对PI3K/Akt信号途径的影响
        3.2.3 桦木酸促进p21^Waf1/Cip1和p27^Kip蛋白表达并导致细胞周期停滞
        3.2.4 桦木酸促进线粒体依赖的凋亡途径
        3.2.5 桦木酸可诱发HeLa细胞内的ROS产生
        3.2.6 抗氧化物维持PI3K/Akt的磷酸化活性并阻断细胞凋亡
    3.3 讨论
    3.4 本章小结
4 结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
附件



本文编号：3850468