新型查耳酮衍生物MW-9抗实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用及机理研究
发布时间:2024-01-25 14:46
目的:基于前期本课题组抗炎活性筛选结果,进一步研究新型查耳酮衍生物MW-9抗炎作用及防治多发性硬化的作用机理,为开发具有自主知识产权新型查耳酮衍生物MW-9候选药物提供科学依据。方法:1.体外研究部分,构建小鼠巨噬细胞株Raw264.7炎症细胞模型和原代巨噬细胞模型,MTT法检测MW-9对炎症细胞细胞毒性作用;采用Griss方法检测MW-9对炎症细胞模型NO产生的影响;Western blot法测定MW-9对NF-kB信号通路磷酸化状态水平。2.体内实验,采用MOG35-55诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,Knoz评分法评价治疗作用,HE染色法观察小鼠脊髓病理损伤程度;ELISA法检测细胞培养上清中IL-17A、IFN-g和TGF-b产生浓度;基因芯片和q-PCR法检测EAE小鼠脊髓组织中细胞因子和趋化因子mRNA的表达情况。流式细胞术检测淋巴细胞表面标志(CD25、CD44、CD11b、Gr1)及T细胞亚群细胞(Th17、Th1细胞和Treg细胞)比例。3.体外Th17分化实验,采用免疫磁珠阴性选择分选CD4+T细胞细胞。在Th17极化条件下,诱导初...
【文章页数】:78 页
【学位级别】:硕士
本文编号:3885012
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图1-1查耳酮衍生物MW-9对Raw264.7巨噬细胞细胞毒性作用
图1-2查耳酮衍生物MW-9抑制Raw264.7巨噬细胞中NO的产生
图1-4查耳酮衍生物MW-9抑制Raw264.7巨噬细胞中NF-kB信号通路磷酸化水平将Raw264.7巨噬细胞随机空白组、对照组(1.5g/mlLPS),药物干预(6、3、1.5g/ml)
图2-1MW-9减轻EAE小鼠的临床症状免疫抑制后,对EAE小鼠体重、临床评分以及发病率进行统计
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