肉苁蓉苯乙醇苷对H 2 O 2 诱发内质网应激引起心肌细胞凋亡的拮抗作用及机制研究

发布时间：2024-05-17 18:21

　　本实验中所用肉苁蓉苯乙醇苷(Phenylethanoid Glycoside-rich extract from Cistanche deserticola,PhG-RE)是提取自列当科药用植物肉苁蓉中的一类化学成分。前期研究发现PhG-RE能够对缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡发挥良好的保护作用,然而究其对心肌细胞的保护作用是否与调节内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡机制有关尚未得到证实。故本实验通过使用H₂O₂诱导H9c2心肌细胞发生ERS,建立细胞损伤模型,观察PhG-RE预处理对ERS引起心肌细胞损伤的保护作用及相关分子机制。研究内容如下:1.实验方法:分别使用浓度为50、100、150、200、250和300μg·mL^-1的PhG-RE处理H9c2细胞24 h,通过CCK-8法检测不同浓度PhG-RE对细胞存活的影响,用以确定安全的药物浓度范围;根据药物安全浓度范围设置药物浓度梯度,选择浓度为50、100、150、200及250μg·mL^-1的P...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
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英文缩写表
第1篇 绪论 综述内质网应激在心血管疾病中的研究及概述
    1.1 引言
    1.2 内质网相关概述
    1.3 未折叠的蛋白质反应
    1.4 内质网应激相关因子概述
        1.4.1 促凋亡CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白
        1.4.2 c-Jun氨基端激酶
        1.4.3 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-
    1.5 心血管疾病与内质网应激损伤
        1.5.1 缺血性心脏病
        1.5.2 心力衰竭
        1.5.3 糖尿病性心脏病
第2篇 肉苁蓉苯乙醇苷对H₂O₂诱发内质网应激引起心肌细胞凋亡的拮抗作用及机制研究
    第1章
        1.1 引言
        1.2 材料与方法
            1.2.1 主要药品试剂与实验设备
            1.2.2 主要实验设备
        1.3 实验药物及试剂的配制
        1.4 实验方法
            1.4.1 细胞培养及处理
            1.4.2 CCK-8 法检测细胞存活率
            1.4.3 实验分组及处理
            1.4.4 乳酸脱氢酶(LDH)活性测定
            1.4.5 Annexin V/PI双染法流式细胞术检测心肌细胞的凋亡
            1.4.6 RT-qPCR检测H9c2 心肌细胞中内质网应激损伤凋亡机制相关基因的表达
            1.4.7 Western Blot检测H9c2 心肌细胞中内质网应激损伤凋亡机制相关蛋白的表达
            1.4.8 统计方法
        1.5 实验结果
            1.5.1 CCK-8 法检测各组间H9c2 细胞存活率
            1.5.2 PhG-RE对 H2O2 诱导细胞损伤LDH释放量的影响
            1.5.3 Annexin V/PI双染法流式细胞术检测心肌细胞的凋亡
            1.5.4 RT-qPCR检测H9c2 心肌细胞中ERS损伤凋亡机制相关基因(GRP78?CHOP?JNK及 Caspase-12)m RNA的表达
            1.5.5 免疫印迹试验检测H9c2 心肌细胞中ERS损伤凋亡机制相关蛋白(GRP78?CHOP?p-JNK及 Caspase-12)的表达
    第2章 讨论
    第3章 结论
本论文创新性
参考文献
作者简介及在学期间取得科研成果
致谢



本文编号：3975943