高效液相色谱法灵香草中槲皮素含量
发布时间:2024-06-04 23:34
为了测定灵香草中槲皮素含量,以2 mol/L的盐酸甲醇溶液为提取溶剂,采用Wondasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为分离柱,筛选流动相甲苯、乙酸乙酯和甲酸的不同配比,探索HPLC法测定灵香草甲醇提取物中槲皮素含量的最佳条件.结果显示,当甲苯、乙酸乙酯和甲酸的配比为10:8:1,流速为1.5 mL/min时槲皮素分离效果较好;紫外检测波长为375 nm时,槲皮素保留时间为19 min;以槲皮素保留时间和峰面积进行定性与定量分析,峰面积与含量绝对相关系数是0.9 998,相对标准偏差(RSD)变化范围为1.83%~2.49%,加样回收率平均为96.44%,表明采用HPLC法检测灵香草甲醇提取物中槲皮素含量灵敏度高、可重复性好.本研究可为灵香草药材成分的开发利用提供较好的参考.
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【部分图文】:
本文编号:3989326
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图1槲皮素对照品(A)与灵香草盐酸甲醇提取液(B)的色谱图
色谱柱采用WondasilC18反向色谱柱,通过紫外扫描,检测发现槲皮素在波长为375nm时有最大吸收,特将HPLC检测的波长设定为375nm.通过考察甲苯-乙酸乙酯-甲酸按不同比例混合(10∶6∶4,10∶5∶2和10∶8∶1)对峰形及分离度影响,将槲皮素标准液HPLC图....
图2槲皮素标准曲线
使用注射器量取上述不同浓度的母液1.5mL,采用0.22μm有机相系滤膜过滤,分别置于不同刻度试管中.按3.1得到的色谱条件,进行高效液相色谱检测,测定不同浓度槲皮素的峰面积,采用SPSS19.0软件分析槲皮素含量与峰面积之间的线性关系,得到线性回归直线方程为y=78257x+....
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