苦丁茶二咖啡酰奎尼酸与肠道微生物的相互作用

发布时间：2024-06-07 21:11

　　苦丁茶主要由冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物苦丁茶冬青(I.kuudingcha C.J.Tseng)和大叶冬青(I.latifolia Thunb)制得,是我国重要别样茶饮料,具有悠久的饮用历史和多种生物活性。苦丁茶含有三萜皂苷、多糖和多酚等多种活性成分,其中苦丁茶多酚主要是咖啡酰奎尼酸(Caffeoylquinicacids,CQAs)类化合物。苦丁茶CQAs包括单咖啡酰奎尼酸(mono-CQAs)和二咖啡酰奎尼酸(diCQAs)等。由于苦丁茶中diCQAs含量很高,并且相比mono-CQAs,关于diCQAs的研究比较少,因此,本文选择苦丁茶diCQAs作为研究对象。膳食多酚具有抗氧化、抗炎症、降脂减肥等多种活性,引起研究者的广泛关注。但是由于其分子量大和多羟基等化学结构特性,多酚的生物利用率很低。膳食多酚在上消化道中变化很少,大部分以固有形式进入结肠,与栖息其中的大量的肠道微生物发生相互作用。肠道微生物具有巨大的代谢潜力,也与宿主健康密切相关。膳食多酚和肠道菌群能够发生双向的作用,多酚能够影响肠道微生物菌群结构和代谢通路,微生物能够代谢多酚转化为代谢产...

【文章页数】：152 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语说明
第一章 绪论
    1.1 膳食多酚概述
        1.1.1 多酚的结构与分类
        1.1.2 多酚的活性与机制
        1.1.3 膳食多酚的消化、吸收和代谢过程
    1.2 膳食多酚与肠道微生物的相互作用关系
        1.2.1 肠道微生物对多酚的代谢转化
        1.2.2 多酚对肠道微生物的影响
    1.3 苦丁茶概述及苦丁茶多酚
        1.3.1 苦丁茶分类
        1.3.2 冬青苦丁茶活性及其活性成分
        1.3.3 苦丁茶咖啡酰奎尼酸
    1.4 立论依据及主要研究内容
    参考文献
第二章 苦丁茶二咖啡酰奎尼酸的分离和纯化
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料与试剂
        2.1.2 仪器与设备
        2.1.3 DiCQAs组分制备
        2.1.4 Folin-Ciocalteu法测定多酚含量
        2.1.5 DiCQAs的高效液相色谱分析
        2.1.6 分配系数的测定和计算
        2.1.7 高速逆流色谱分离diCQAs单体化合物
        2.1.8 凝胶层析分离3,5-diCQA和4,5-diCQA
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 大孔树脂HP-20制备苦丁茶diCQAs混合组分
        2.2.2 高速逆流色谱分离3,4-diCQA
        2.2.3 Toyopearl HW-40S凝胶色谱分离3,5-diCQA和4,5-diCQA
    2.3 本章小结
    参考文献
第三章 苦丁茶二咖啡酰奎尼酸的体外模拟消化以及消化产物的抗炎活性
    3.1 试验材料与方法
        3.1.1 材料与试剂
        3.1.2 仪器和设备
        3.1.3 DiCQAs组分制备和含量测定
        3.1.4 模拟唾液消化
        3.1.5 模拟胃液消化
        3.1.6 模拟胰液消化
        3.1.7 模拟肠壁细胞消化
        3.1.8 模拟肠道微生物消化
        3.1.9 DiCQAs及其代谢产物的高效液相色谱分析(HPLC)
        3.1.10 DiCQAs及其代谢产物的抗炎症活性
        3.1.11 数据处理
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 DiCQAs在模拟唾液、胃液和胰液消化中的稳定性
        3.2.2 Caco-2细胞对diCQAs的代谢
        3.2.3 肠道微生物对diCQAs的水解和代谢作用
        3.2.4 DiCQAs及其代谢产物的抗炎症活性
    3.3 本章小结
    参考文献
第四章 苦丁茶二咖啡酰奎尼酸在体外厌氧发酵中对肠道菌群的影响
    4.1 试验材料与方法
        4.1.1 材料与试剂
        4.1.2 仪器和设备
        4.1.3 DiCQAs组分制备
        4.1.4 体外厌氧发酵培养
        4.1.5 pH测量
        4.1.6 短链脂肪酸测定
        4.1.7 体外厌氧发酵体系中微生物群落结构分析
        4.1.8 统计分析
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 DiCQAs对肠道微生物菌群丰富度和α多样性的影响
        4.2.2 体外发酵微生物菌群的组间总体差异
        4.2.3 DiCQAs对肠道微生物菌群的组成的影响
        4.2.4 DiCQAs对体外厌氧发酵体系pH的影响
        4.2.5 DiCQAs对肠道微生物短链脂肪酸产量的影响
    4.3 本章小结
    参考文献
第五章 肠道来源的苦丁茶二咖啡酰奎尼酸水解菌株和酶的初步研究
    5.1 试验材料与方法
        5.1.1 材料与试剂
        5.1.2 仪器与设备
        5.1.3 高效液相色谱法分析diCQAs及其代谢产物
        5.1.4 DiCQAs降解菌株的筛选
        5.1.5 DiCQAs水解酶的分布
        5.1.6 不同碳源对菌株降解diCQAs的影响
        5.1.7 DiCQAs水解酶的分离纯化
        5.1.8 DiCQAs水解酶的酶学性质
        5.1.9 数据统计
    5.2 结果与讨论
        5.2.1 DiCQAs降解菌株的筛选与鉴定
        5.2.2 不同碳源对Lactobacillus sp. M-B水解diCQAs的影响
        5.2.3 Lactobacillus sp. M-B表达的diCQAs水解酶的分离纯化
        5.2.4 Lactobacillus sp. M-B表达的diCQAs水解酶的酶学性质
    5.3 本章小结
    参考文献
第六章 苦丁茶二咖啡酰奎尼酸对小鼠肠道菌群、脂代谢和炎症水平的影响
    6.1 材料与方法
        6.1.1 材料与试剂
        6.1.2 仪器与设备
        6.1.3 小鼠动物实验过程
        6.1.4 血清中生化指标测定
        6.1.5 小鼠粪便中肠道微生物菌群结构的高通量测序
        6.1.6 肝脏中脂代谢和炎症相关基因转录水平表达的测定
        6.1.7 数据处理、分析与统计
    6.2 结果与讨论
        6.2.1 小鼠体重、肝脏和脂肪组织的重量
        6.2.2 血清中生理和生化指标
        6.2.3 小鼠肝脏中脂代谢和炎症相关基因在mRNA水平的表达
        6.2.4 小鼠肠道菌群丰富度和多样性的变化
        6.2.5 苦丁茶diCQAs对小鼠肠道菌群结构的整体影响
        6.2.6 苦丁茶diCQAs对小鼠肠道微生物群落组成的影响
        6.2.7 苦丁茶diCQAs造成的小鼠肠道菌群的差异
        6.2.8 肠道微生物与宿主代谢的联系
    6.3 本章小结
    参考文献
全文小结
    1 全文小结
    2 展望
论文创新点
致谢
攻读学位期间发表的论文和申请的专利



本文编号：3991028