针康法对局灶性脑缺血大鼠胶质细胞环境和细胞凋亡的影响

发布时间：2017-11-11 19:18

  本文关键词：针康法对局灶性脑缺血大鼠胶质细胞环境和细胞凋亡的影响

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【摘要】：目的 观察针康法对局灶性脑缺血大鼠缺血区BDNF、S100β、GFAP蛋白和BDNF、Caspase-3基因的表达,探讨该方法促进脑缺血大鼠神经功能恢复的可能机制。 方法 建立大鼠永久性局灶性脑缺血模型,将240只大鼠按随机数字法分为5组：假手术组、模型组、针刺组、康复组、针康组,每组各48只。每组再按3、7、14、21天分为4亚组,每组12只。假手术组、模型组不进行任何干预,针刺组采用头穴丛刺治疗,康复组采用跑台训练,针康组采用头穴丛刺结合跑台训练治疗。各时间点采用Bederson's神经功能评分观察大鼠神经功能的变化,采用免疫组化检测各组大鼠缺血区BDNF、S100β、 GFAP蛋白的表达变化,采用实时荧光定量PCR检测BDNFmRNA. Caspase-3mRNA的表达。 结果 1神经功能评分：与假手术组比较,各时间点,各组神经功能评分降低,有显著性差异(P0.01)；术后7d,14d与模型组比较,针刺组,康复组,针康组神经功能评分降低,差异有统计学意义(P0.05)；术后7d,14d与针刺组,康复组比较,针康组神经功能评分降低,差异有统计学意义(P0.05)；各时间点,与针刺组比较,康复组神经功能评分趋势一致,差异无统计学意义(P0.05)。 2缺血区皮层BDNF的表达：术后3d,7d,14d,21d与假手术组比较,各组BDNF阳性细胞表达增加(p0.01)；术后7d,14d,与模型组相比,针刺组、康复组、针康组BDNF阳性细胞表达增加(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组、康复组比较,针康组BDNF阳性细胞表达增加(p0.05)。 3缺血区皮层S100β的表达：术后3d,7d,14d,21d与假手术组比较,各组S100β阳性细胞表达增加(p0.01)；术后7d,14d,与模型组相比,针刺组、康复组、针康组S100β阳性细胞表达增加(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组、康复组比较,针康组S100β阳性细胞表达增加(p0.05)。 4缺血区GFAP蛋白的表达：术后3d,7d,14d,21d与假手术组比较,各组GFAP阳性细胞表达增加(p0.01);术后7d,14d,与模型组相比,针刺组、康复组、针康组GFAP阳性细胞表达增加(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组、康复组比较,针康组GFAP阳性细胞表达增加(p0.05)。 5脑缺血大鼠BDNFmRNA的表达：各时间点,与假手术比较,各组BDNFmRNA的表达增加(p0.01)；术后7d,14d,与模型组相比,针刺组、康复组、针康组BDNFmRNA的表达增加(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组、康复组比较,针康组BDNFmRNA的表达增加(p0.05)。 6脑缺血大鼠Caspase-3mRNA表达：各时间点,与假手术比较,模型组Caspase-3mRNA表达增加(p0.01)；术后7d,14d,与模型组相比,针刺组、康复组、针康组Caspase-3mRNA表达减少(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组、康复组比较,针康组Caspase-3mRNA表达减少(p0.05)；术后7d,14d,与针刺组比较,康复组Caspase-3mRNA的表达无明显差异,(P0.05)。 结论 1.针康法能促进局灶性脑缺血后大鼠神经功能康复,且针康法优于单纯针刺和康复。 2.针康法能够促进局灶性脑缺血大鼠皮质缺血区周围GFAP,S100β的表达,促进胶质细胞活化,从而保护神经元,进而起到脑保护作用,且针康法优于单纯针刺和康复。 3.针康法能促进局灶脑缺血后BDNFmRNA的表达增加,保护神经元,与BDNF蛋白表达趋势一致,并且随时间递增其表达增加,且针康法优于单纯针刺和康复。 4.针康法能抑制局灶脑缺血后Caspase-3mRNA的表达,减少细胞凋亡,促进神经恢复,并且随时间递增其表达降低,且针康法优于单纯针刺和康复。 5.针康法能够调控脑缺血后胶质细胞环境,抑制神经细胞凋亡途径,这可能是针康法促进脑缺血神经恢复的机制之一。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R245

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