电针联合BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究

发布时间:2017-11-20 12:27

  本文关键词:电针联合BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究


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【摘要】:目的:观察电针(electro-acupuncture,Ea)联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠学习记忆能力,血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量和海马突触素(SYP)、神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触后致密物-95(PSD-95)蛋白表达的影响,探讨干预措施的效果及其可能的机制。方法:(1)将BMSCs复苏、扩增和诱导,收集细胞备用。(2)选用成年SD大鼠进行Morris水迷宫训练4天,每天4次,第5天进行测试,筛选逃避潜伏期少于40秒的大鼠随机分为BMSCs组、Ea组、Ea-BMSCs组、NS组、FO组和Normal组。(3)前4组采用胶原酶及肝素注入尾状核制备大鼠ICH模型,在术后第3天时分别通过移植BMSCs、电针刺激、移植BMSCs联合电针刺激和注射生理盐水进行治疗,每组根据干预措施后喂养天数再分为1d、3d、5d、7d、14d五个亚组;电针刺激选取大椎穴和百会穴,每天一次。假手术组仅进针但不注入胶原酶和肝素,也不治疗;正常组不施加干预措施。(4)在相应时间点对各组实验大鼠进行Morris水迷宫测试,然后取材。(5)检测血清中AchE、SOD和MDA的含量,免疫组织化学检测SYP、GAP-43和PSD-95的表达。结果:(1)对实验大鼠进行造模前水迷宫测试,各组间无显著性差异(P0.05)。在脑出血治疗后水迷宫检测,逃避潜伏期、穿越平台次数、平台象限时间和路程百分比等反映学习记忆能力的指标随时间延长而好转,在1d时Ea组成绩比其他组好(P0.05);在3、5、7、14d时,NS组成绩比其他治疗组差(3d时BMSCs组除外)(P0.05),Ea-BMSCs组成绩比Ea组和BMSCs组好(P0.05)。(2)脑出血各组AchE在1d时开始下降,14d时达最低值。NS组AchE含量在5、7、14d时比其他治疗组高(P0.05);Ea-BMSCs组AchE含量,在5d时比Ea组高(P0.05),在7、14d时比Ea组和BMSCs组低(P0.05)。(3)脑出血各组血清SOD在1d时开始下降,在3d时达最低后快速上升,持续到14d达峰值。在3d时,Ea组SOD含量比其他治疗组高(P0.05)。NS组SOD含量在5、7、14d时比其他治疗组低(P0.05),Ea-BMSCs组SOD含量在7、14d时比Ea组和BMSCs组高(P0.05),BMSCs组SOD含量在5d时比Ea组低(P0.05)。(4)脑出血各组血清MDA含量在1d时开始上升,在3d时达峰值后下降,在14d时达最低值。在3d时,Ea组MDA含量比其他治疗组低(P0.05)。在5、7、14d时,NS组MDA含量比其他治疗组高(P0.05),Ea-BMSCs组MDA含量比Ea组和BMSCs组低(P0.05)。BMSCs组MDA含量在5d时比Ea组高(P0.05)。(5)脑出血各组SYP、PSD-95表达在1d时开始上升,Ea-BMSCs组和BMSCs组持续增高到14d达峰值,Ea组和NS组上升到7d时达峰值,随后下降。脑出血各组GAP-43表达在1d时开始上升,7d时达峰值,随后下降。(6)在5、7、14d时,NS组SYP、GAP-43表达比其他治疗组低(P0.05),Ea-BMSCs组SYP、GAP-43表达比Ea组和BMSCs组高(P0.05)。(7)在3、5d时,Ea组PSD-95表达比其他治疗组高(P0.05)。NS组PSD-95表达在5、7、14d时比其他治疗组低(P0.05)。Ea-BMSCs组PSD-95的表达在7d、14d时比Ea组和BMSCs组高(P0.05)。(8)在脑出血治疗14d时,各治疗组的SOD、SYP、 PSD-95、MDA、AchE、GAP-43、学习记忆能力与FO组和Normal组相比较仍有明显差异(P0.05)。结论:(1)电针和BMSCs移植联合应用治疗ICH大鼠,与单一电针治疗或单一BMSCs移植治疗比较,能显著提高大鼠学习记忆能力,其机制可能与降低血清中AchE含量和上调海马中SYP、PSD-95及GAP-43表达有关。(2)电针和BMSCs移植联合应用治疗ICH大鼠,能显著增加大鼠血清中SOD活力,减少MDA的产生,从而减轻自由基对机体的损伤。
【学位授予单位】:泸州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R245

【参考文献】

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本文编号:1207174

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