针刺对2型糖尿病大鼠下丘脑GLUT3和GLUT4基因和蛋白的影响

发布时间：2017-12-17 14:30

本文关键词：针刺对2型糖尿病大鼠下丘脑GLUT3和GLUT4基因和蛋白的影响

【摘要】：目的：通过观察针刺对T2DM大鼠下丘脑GLUT3和GLUT4基因表达和蛋白含量的影响，从分子水平进一步探讨GLUTs家族在2型糖尿病大鼠下丘脑胰岛素信号转导中的作用，同时对GLUTs家族在针刺治疗2型糖尿病效应机制中的影响进行初探，探讨针刺治疗T2DM有效的可能机制，为针灸临床治疗T2DM提供理论依据。方法： 1.选择SD雄性大鼠60只，平均体重220g左右。电脑随机数字法产生10只为空白对照组，普通饲料喂养4周；其余50只高脂高糖饲料喂养4周后造模，并筛选合格糖尿病大鼠保留20只，电脑随机数字法分为2组，分别为针灸组和模型组，每组10只。总计30只大鼠，分为针刺组、模型组和空白组，每组10只。针刺组大鼠取穴胰俞、足三里、内庭，针刺治疗时间每次15分钟，每日1次,连续治疗2周。模型组：与针刺组同样固定，但不针刺且不作其他任何治疗。空白组：与针刺组同样固定，但不针刺且不作其他任何治疗，疗程与针刺组平行。在实验干预过程中，针刺组、模型组、空白组各有一只大鼠死亡，取材时每组大鼠各9只。 2.分组干预2周后，空腹过夜，于次日上午8时，各组SD大鼠用10％水合氯醛(0.35mL／100g)腹腔注射麻醉,左心室采血5ml，静置分离血清待测指标。针刺组、模型组、空白对照组实时取材：断头处死，置冰碟上，快速分离下丘脑、股四头肌，0.9％生理盐水冲洗表面血液，纱布吸干，液氮中保存。氧化酶测定血糖、肌糖原含量；放免法测定外周胰岛素；实时荧光PCR和Western blot测定下丘脑GLUT3和GLUT4基因和蛋白的表达情况。实验数据以均数±标准差(X±s)表示，采用SPSS13.0for Windows进行数据处理，，采用方差分析、ｔ检验比较均数间的差异，以P＜0.05为差异有显著性。结果： 1.高脂高糖喂养4周联合低剂量STZ诱导后筛选的T2DM大鼠模型，模型组和针刺组的FPG与空白组相比均显著升高(P0.01)，提示造模成功。经过2周针刺治疗后，针刺组的FPG、FINS与模型组比较显著降低(P0.01，P0.05)。 2.模型组大鼠股四头肌肌糖原较空白组显著降低(P0.01);针刺组大鼠股四头肌较模型组有所升高，但无统计学意义。 3.模型组大鼠下丘脑GLUT3mRNA和GLUT3蛋白表达均较空白组显著降低(P0.01);针刺组大鼠下丘脑GLUT3mRNA和GLUT3蛋白表达均较模型组显著升高(P0.05，P0.01)。模型组大鼠下丘脑GLUT4mRNA和GLUT4蛋白表达均较空白组显著降低(P0.01);针刺组大鼠下丘脑GLUT4mRNA和GLUT4蛋白表达均较模型组显著升高(P0.05，P0.01)。结论： 1.针刺能显著降低T2DM大鼠空腹血糖、空腹胰岛素。针刺能纠正T2DM大鼠内分泌紊乱，改善胰岛素抵抗，是治疗2型糖尿病的有效方法。 2.针刺能有效增加T2DM大鼠下丘脑GLUT3、GLUT4mRNA表达和GLUT3、GLUT4蛋白表达。针刺可改善中枢胰岛素抵抗转导机制的受体后缺陷,增加下丘脑葡萄糖转运蛋白的含量，增强了下丘脑葡萄糖转运能力。 3.针刺治疗T2DM有效机制可能是通过多途径、多层次改善胰岛素抵抗发挥作用的。
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R245

【参考文献】

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