电针干预对帕金森病模型大鼠黑质caspase-3和caspase-8表达的影响

发布时间：2017-03-17 18:03

  本文关键词：电针干预对帕金森病模型大鼠黑质caspase-3和caspase-8表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的通过纹状体内注射6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)建立帕金森病动物模型,通过电针刺激“百会、风府”穴,观察电针对其行为学、黑质多巴胺能神经元细胞凋亡数目及以黑质中caspase(cysteinyl aspartate specific proteinase)-3和caspase-8表达的情况。在本实验中我们从抑制细胞凋亡发生的角度出发,重点探讨帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元细胞凋亡过程中caspase-3和caspase-8的作用以及电针对其的影响,从而进一步探讨针灸治疗帕金森病的机理,为临床应用针灸治疗帕金森病提供实验依据。 方法选用健康的雄性Sprague Dawley大鼠85只,体重180-220g,将大鼠随机分为电针治疗组、模型组和假手术组,各组再按治疗时间分为2周组、3周组和4周组三个亚组。采用纹状体内多位点注射6-OHDA建立帕金森病大鼠模型,假手术组注射等量含抗坏血酸的生理盐水。术后7天,颈部皮下注射阿普吗啡(Apomorphine, APO)诱导旋转,记录大鼠向损伤对侧恒定方向的旋转次数,连续记录4周,以平均每分钟不低于7次者为合格的PD大鼠模型。电针治疗组取“风府、百会”穴进行治疗,两穴接韩氏电针仪,采用连续波,频率100HZ,电流强度1mA,时间30分钟,每日1次,每周治疗6次。分别于治疗2周、3周和4周后通过颈部皮下注射APO (0.5mg/kg)诱导旋转,在注射5分钟后开始记录大鼠向健侧恒定方向的旋转次数,共记录30分钟以检测电针对PD大鼠行为学的影响。通过尼氏染色法和原位末端标记(terminal-deoxynucleotidy transferase mediated nick end labeling, TUNEL)法分别观察各组大鼠黑质多巴胺(dopamine, DA)能神经元形态学变化和神经元凋亡的数目,并用免疫组织化学的方法检测各大鼠黑质caspase-3和caspase-8的表达情况。 结果①电针对帕金森病模型大鼠行为学的影响： 电针治疗3、4周组与其同期模型组相比旋转圈数均有显著减少(P0.05,P0.01),电针治疗2周组与其同期模型组比较有减少,但无统计学意义(P0.05)。 电针治疗3、4周组与电针治疗2周组的旋转圈数相比均有减少,有显著差异(P0.05,P0.01)；电针治疗4周组与电针治疗3周组比较有减少,但无统计学意义(P0.05)。 ②电针对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元的影响： 电针治疗3、4周组黑质神经元细胞凋亡数与其同期模型组比较均明显减少,有极显著性差异(P0.01),电针治疗2周组黑质神经元细胞凋亡数较其同期模型组有减少,但无统计学意义(P0.05)。 ③电针对帕金森病模型大鼠黑质caspase-3和caspase-8表达的影响： 电针治疗4周组caspase-3和caspase-8蛋白较其同期模型组均极显著减少(P0.01)；电针治疗3周组caspase-8蛋白较其同期模型组极显著减少(P0.01),caspase-3蛋白与其同期模型组相比无差异显著(P0.05)；电针治疗2周组caspase-3和caspase-8蛋白较其同期模型组均有减少,但无统计意义(P0.05)。 结论①电针干预能减少帕金森病模型大鼠的旋转圈数。 ②电针能抑制帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元细胞凋亡。 ③帕金森病模型大鼠黑质中caspase-3和caspase-8蛋白表达增高,电针能抑制帕金森病模型大鼠黑质中caspase-3和caspase-8蛋白的表达受到抑制。
【关键词】：帕金森病 电针 细胞凋亡 caspase-3 caspase-8
【学位授予单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R245;R277.7
【目录】：

• 目录3-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用英文缩略词表9-10
• 前言10-12
• 一、材料与方法12-20
• (一) 实验材料12-15
• 1. 实验动物12
• 2. 实验器材12
• 3. 实验试剂12-13
• 4. 主要实验试剂配制13-15
• (二) 实验方法15-19
• 1. 建立动物模型15-16
• 2. 动物分组16
• 3. 动物治疗16
• 4. 行为学检测16
• 5. 指标检测16-19
• (三) 统计学方法19-20
• 二、结果20-26
• (一) 一般观察20
• (二) 阿普吗啡诱导旋转行为观察20-21
• (三) 纹状体进针点处形态学观察21-22
• (四) 尼氏染色形态学观察22
• (五) 多巴胺能神经元细胞凋亡数目的变化22-23
• (六) caspase-8蛋白表达的变化23-24
• (七) caspase-3蛋白表达的变化24-26
• 三、讨论与分析26-39
• (一) 关于PD动物模型的选择26-27
• (二) 中医学与帕令森病27-29
• 1. 中医学对帕金森病的认识27-28
• 2. 中医学对帕金森病病因病机的认识28
• 3. 中医学对帕金森病病位及治疗方面的认识28-29
• (三) 现代医学与帕金森病29-35
• 1. 现代医学对帕金森病的认识29-30
• 2. 现代医学对帕金森病病因及发病机制的认识30-35
• (四) 电针治疗帕金森病的取穴依据35-36
• (五) 电针治疗帕金森病的机理探讨36-39
• 1. 电针对帕金森病模型大鼠行为学的影响36-37
• 2. 电针对黑质多巴胺能神经元凋亡的影响37
• 3. 电针对黑质caspase-3、caspase-8的影响37-39
• 四、结论39-40
• 参考文献40-45
• 附图45-48
• 致谢48-49
• 文献综述49-56
• 参考文献54-56

【参考文献】

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本文编号：253238