针刺对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体表达的影响研究
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【摘要】:目的: 通过观察针刺对SAMP8小鼠海马神经元突触可塑性及NR2A、NR2B表达的影响,,研究针刺对NMDA受体的影响,从NMDA受体角度探讨针刺促突触可塑性发挥、改善学习记忆、治疗AD的调控机制,为针灸促神经康复的可塑性机制提供新的实验依据。 方法: 以雄性9月龄快速老化模型小鼠(SAMP8)作为AD动物模型,利用Morris水迷宫实验筛选出学习记忆能力下降的SAMP8小鼠,并将其随机分为P8针刺组和P8对照组;抗快速老化模型小鼠(SAMR1)作为R1对照组。其中P8针刺组被予以针刺“百会”、“涌泉”,每日一次,7日一疗程,疗程间隔2天,共4疗程。相应方法取材后,用透射电镜结合体视学测量方法观测小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率、突触间隙宽度、突触后致密物(PSD)厚度等突触界面超徽结构参数。用Western Blot蛋白质免疫印迹法结合图像分析方法检测小鼠海马神经元NR2A、NR2B的蛋白表达及NR2A/NR2B比值变化。 结果: 1.学习记忆能力基线分析结果:P8针刺组和P8对照组小鼠定位航行实验平均逃避潜伏期较R1对照组延长(P0.05)、游泳总路程较R1对照组增加(P0.05);空间探索实验目标象限游泳时间百分比较R1对照组减低(P0.05)、穿越平台次数较R1对照组减少(P0.05)。P8针刺组与P8对照组之间各参数未见差异(P0.05)。 2.透射电镜检测结果:针剌治疗结束后,P8对照组小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率较R1对照组下降(P0.05)、突触间隙较R1对照组增宽(P0.05)、PSD厚度较R1对照组变薄(P0.05)。P8针刺组小鼠CA1区海马神经元突触界面曲率较P8对照组增大(P0.05)、突触间隙较P8对照组变窄(P0.05)、PSD厚度较P8对照组增厚(P0.05)。 3. Western Blot检测结果:针刺治疗结束后,与R1对照组比较,P8对照组小鼠海马神经元NR2A相对表达含量呈增高趋势(P0.05), NR2B相对表达含量呈降低趋势(P0.05), NR2A/NR2B比值呈增高趋势(P0.05);与P8对照组比较,P8针刺组小鼠海马神经元NR2A相对表达含量呈下降趋势(P0.05),NR2B相对表达含量呈上升趋势(P0.05),NR2A/NR2B比值呈下降趋势(P0.05)。 结论: 针刺促进突触可塑性的发挥可能与海马神经元NMDA受体的表达有关,有待进一步研究。
【关键词】:针刺 AD SAMP8小鼠 Morris水迷宫 突触可塑性 NMDA受体 NR2A NR2B
【学位授予单位】:成都中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R245
【目录】:
- 中文摘要2-4
- ABSTRACT4-8
- 中英文缩略词对照表8-11
- 引言11-13
- 第一部分 针刺对SAMP8小鼠海马神经元突触可塑性的影响研究13-23
- 1. 实验材料13-14
- 1.1 实验动物13
- 1.2 实验试剂13
- 1.3 主要仪器13-14
- 2. 实验方法14-17
- 2.1 Morris水迷宫实验14-15
- 2.2 动物筛选、分组及干预处理15-16
- 2.3 透射电镜检测16-17
- 2.4 数据分析17
- 3. 结果与分析17-23
- 3.1 学习记忆能力基线分析17-20
- 3.2 针刺对SAMP8小鼠海马神经元突触结构可塑性的影响20-23
- 第二部分 针刺对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体表达的影响研究23-30
- 1. 实验材料23-25
- 1.1 实验动物23
- 1.2 实验试剂23-24
- 1.3 主要仪器24-25
- 2. 实验方法25-27
- 2.1 动物处理25
- 2.2 动物取材25
- 2.3 Western Blot检测25-26
- 2.4 数据分析26-27
- 3. 结果与分析27-30
- 3.1 针刺对SAMP8小鼠海马神经元NR2A、NR2B表达的影响27-28
- 3.2 针刺对SAMP8小鼠海马神经元NR2A/NR2B比值的影响28-30
- 讨论30-52
- 1. 中医对阿尔茨海默病的认识30-32
- 2. 穴位选择依据32-35
- 3. 模型选择依据35-37
- 4. Morris水迷宫实验评价SAMP8小鼠学习记忆能力基线37-41
- 5. 针刺对SAMP8小鼠CA1区海马神经元突触可塑性的影响41-43
- 6. 针刺对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体的影响43-52
- 结论52-53
- 问题与展望53-54
- 致谢54-55
- 参考文献55-69
- 附件一:综述69-81
- 参考文献74-81
- 附件二:在读期间公开发表的学术论文81-82
【参考文献】
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本文编号:358654
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