胡椒碱联合顺铂对肺腺癌A549细胞生长及MMP-2、VEGF表达的研究

发布时间：2017-10-09 12:19

  本文关键词：胡椒碱联合顺铂对肺腺癌A549细胞生长及MMP-2、VEGF表达的研究

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【摘要】：目的:观察不同浓度胡椒碱、顺铂单独或者两药联用对肺腺癌A549细胞生长和凋亡的效应及MMP-2和VEGF表达状况的变化,并探讨可能的协同效应和作用机制,从而为胡椒碱与顺铂的联合方案在肺癌治疗方面的应用提供一种新的线索和策略。方法:1.MTT法检测不同浓度的胡椒碱(12.5、25、50、100ug/ml)、顺铂(0.5、1、2、4ug/ml)及联合用药(50ug/ml胡椒碱和2ug/ml顺铂)对A549细胞24h、48h、72h的生长抑制的效应。2.流式细胞术分析胡椒碱(50ug/ml)、顺铂(2ug/ml)及二者联用(50ug/ml胡椒碱和2ug/ml顺铂)对A549细胞48h的凋亡率的影响。3.RT-PCR测定A549细胞经胡椒碱(50ug/ml)、顺铂(2ug/ml)、两药联用(50ug/ml胡椒碱和2ug/ml顺铂)分别处理48h的MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表达状况的变化。结果:1.胡椒碱(12.5、25、50、100ug/ml)、顺铂(0.5、1、2、4ug/ml)都具有抑制A549细胞生长的效应,并且随处理时间的延长和药物浓度的增大,其抑制效应呈增强趋势,与对照组的差异显著(P0.05);联合组(50ug/ml胡椒碱和2ug/ml顺铂)的抑制效应较为明显,比单用胡椒碱(50ug/ml)、顺铂(2ug/ml)的效应显著,表现协同的抑瘤作用(P0.05),其中联合组处理72h呈现极其显著的抑制效应。2.胡椒碱(50ug/ml)、顺铂(2ug/ml)和二者联合作用A549细胞48h,凋亡率分别是(10.67±0.97)%、(16.56±0.56)%、(55.52±1.33)%,均显著高于对照组的(0.33±0.55)%(P0.05);联合组较单用胡椒碱、顺铂的凋亡率均表现较为明显的提高(P0.05)。3.胡椒碱(50ug/ml)与顺铂(2ug/ml)分别处理A549细胞48h,MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表达量都较对照组减少(P0.05);而联合用药比单药组的MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表达下调更加明显(P0.05)。结论:1.胡椒碱、顺铂都具有抑制A549细胞生长的效应,与时间和浓度均存在一定地依赖关系,而且两药的联合效应比单用效应显著。2.胡椒碱、顺铂都具有诱发A549细胞凋亡的效应,并且两药联用的凋亡率显著较单药提高。3.胡椒碱、顺铂都具有控制A549细胞MMP-2 m RNA和VEGF m RNA表达降低的效应,而且两药联用的水平下调最为明显,进而可能阻止肺癌转移和血管发生。
【关键词】：胡椒碱 顺铂 A549细胞 MMP-2 VEGF
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 中英文缩写表7-11
• 第一章 前言11-15
• 1.1 研究背景11-14
• 1.2 研究目的及意义14-15
• 第二章 实验材料15-17
• 2.1 细胞株15
• 2.2 药物15
• 2.3 试剂15
• 2.4 仪器15-17
• 第三章 实验方法17-21
• 3.1 试剂配制17
• 3.2 实验分组17
• 3.3 细胞培养17
• 3.4 MTT法测定细胞活力17-18
• 3.5 流式细胞术测定细胞凋亡18-19
• 3.6 RT-PCR测定MMP-2 mRNA和VEGF mRNA的表达19-20
• 3.7 数据分析20-21
• 第四章 结果21-25
• 4.1 胡椒碱对A549细胞生长的影响21
• 4.2 顺铂对A549细胞生长的影响21-22
• 4.3 胡椒碱联合顺铂对A549细胞生长的影响22
• 4.4 胡椒碱联合顺铂对A549细胞凋亡的影响22-23
• 4.5 胡椒碱联合顺铂对A549细胞MMP-2 mRNA和VEGF mRNA表达的影响23-25
• 第五章 讨论25-32
• 5.1 胡椒碱、顺铂及两药联合抑制A549细胞的生长效应25-27
• 5.2 胡椒碱联合顺铂诱导A549细胞的凋亡效应27-28
• 5.3 胡椒碱联合顺铂下调A549细胞的MMP-2 mRNA和VEGF mRNA的表达效应28-32
• 第六章 结论32-33
• 第七章 研究的局限性及展望33-35
• 7.1 局限性33
• 7.2 展望33-35
• 参考文献35-39
• 综述39-46
• 参考文献44-46
• 在学期间的研究成果46-47
• 致谢47

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本文编号：1000177