前列腺癌中GATA2调控c-Myc表达机制的初步研究

发布时间：2017-10-09 15:33

  本文关键词：前列腺癌中GATA2调控c-Myc表达机制的初步研究

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【摘要】：目的1.研究转录因子GATA2在良性前列腺增生组织与前列腺癌组织以及前列腺癌细胞系中的表达情况,并进一步分析GATA2在前列腺癌中的表达水平与其临床相关性。2.初步探讨GATA2是否作为雄激素受体AR的辅助因子协同调控c-Myc的表达,促进前列腺癌的发生进展。方法收集天津医科大学第二医院泌尿外科2004年1月至2014年1月的80例良性前列腺组织和120例前列腺癌组织标本,所有标本都经过病理诊断明确,且前列腺癌患者术前未行放化疗及内分泌治疗。应用RT-qPCR技术,初步研究GATA2 mRNA在良性前列腺增生组织和前列腺癌组织中的表达情况,统计并分析GATA2 mRNA表达水平与前列腺癌的临床相关性。培养前列腺癌细胞系PC3、DU145、LNCaP及C4-2和正常前列腺细胞RWPE-1,运用RT-qPCR及Western Blotting技术,检测GATA2 mRNA和蛋白在前列腺癌细胞系及正常前列腺细胞中的表达水平,筛选出高表达GATA2的细胞系。运用免疫共沉淀技术,验证GATA2与AR之间能够相互作用。运用染色质免疫共沉淀技术,验证AR与c-Myc增强子的相互作用;构建GATA2低表达质粒,稳定转染前列腺癌细胞LNCaP细胞,联合染色质免疫共沉淀与qPCR技术,比较GATA2低表达组与对照组中AR在c-Myc增强子区域的结合量的变化,并运用Western blotting技术进一步验证两组中c-Myc下游蛋白HSPC111的表达的变化。结果1.GATA2 mRNA在前列腺癌组织中的表达水平明显高于良性前列腺增生组织,差异具有统计学意义(P0.05),且在前列腺癌患者中,GATA2的高表达与术前血清前列腺特异性抗原(PSA)、Gleason评分及淋巴结侵袭有关(P0.05),与患者年龄、手术切缘及精囊是否侵犯无关(P0.05);2.GATA2在前列腺癌细胞PC3与DU145及正常前列腺细胞RWPE-1中表达较低或几乎不表达,而在LNCaP及C4-2细胞中表达水平较高;3.免疫共沉淀结果进一步验证了GATA2与雄激素受体AR之间具有相互作用;4.与正常对照组比较,GATA2低表达后,AR与c-Myc增强子区域的结合量减少,致使c-Myc的表达水平降低,且c-Myc下游蛋白HSPC111的表达减少。结论1.GATA2在前列腺癌组织中高表达,且与患者的PSA水平、Gleason评分及淋巴结转移相关,表明GATA2的表达增高参与了前列腺癌的发生发展。2.GATA2可能作为AR的辅因子协同转录调控c-Myc的表达,促进前列腺癌的恶性发展。
【关键词】：前列腺癌 GATA2 临床病理特征 AR c-Myc 免疫共沉淀
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.25
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 缩略语/符号说明9-11
• 前言11-16
• 研究现状、成果11-14
• 研究目的、方法14-16
• 对象和方法16-37
• 结果37-47
• 讨论47-52
• 结论52-53
• 参考文献53-59
• 发表论文和参加科研情况说明59-60
• 综述 转录因子GATA2的研究进展60-77
• 综述参考文献69-77
• 致谢77-78
• 个人简历78

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本文编号：1000968