川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌生长及HIF-1α、b-FGF、VASH-1的影响

发布时间：2017-10-15 03:39

  本文关键词：川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌生长及HIF-1α、b-FGF、VASH-1的影响

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【摘要】：原发性支气管肺癌发病率居所有肿瘤之首,各种手段的综合治疗对肿瘤的防治具有一定的积极作用,但总体有效率并不理想,因此所面临的形势刻不容缓。造成现状的原因包括:肿瘤发病率总体上升、早期发现病例有限、药物的毒副作用显著、肿瘤的耐药性增强,因此早期发现控制病发率、有效治疗降低死亡率一直成为人们研究中追求的目标。肿瘤血管的生成在恶性肿瘤的发生、发展、侵袭、转移及复发中起着重要作用。调节血管生成的过程中最重要的是促血管生成因子与抑制血管生成因子,维持二者的动态平衡至关重要。缺氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factorb,b-FGF)是重要的促血管生成因子。血管生成抑制蛋白(Vasohibin-1,VASH-1)作为目前发现唯一一个具有负反馈调节的抑制血管生成因子。肺癌中三者之间的关系目前尚未见报道。抗血管生成治疗联合细胞毒性药物为肿瘤的治疗提供新的方向。部分中药具有抗血管生成作用,川芎嗪作为其中之一,但机制尚不明确。本研究通过建立Lewis肺腺癌模型观察四个不同处理组(生理盐水组、川芎嗪组、顺铂组、联合组)中肿瘤体积、体重、瘤重、肿瘤细胞及血管结构、血管生成因子HIF-1α、b-FGF、VASH-1的变化,证实川芎嗪联合顺铂能提高治疗效果,并阐述可能的机制,从而为川芎嗪广泛应用于临床提供实验基础。实验过程如下。培养Lewis小鼠肺腺癌细胞,注射于小鼠右腋下,2周左右小鼠肿瘤长径8 mm左右,将荷瘤小鼠随机分成4组:生理盐水组、川芎嗪组、顺铂组、联合组,每组12只,顺铂剂量为2 mg?kg-1,川芎嗪剂量为100 mg?kg-1,联合组(顺铂、川芎嗪,剂量同上),给药2周,处死小鼠,称量瘤重,计算抑瘤率。通过HE、透射电镜观察药物作用后细胞及血管结构变化与免疫组化、Western Blot蛋白印迹方法检测药物作用前后HIF-1α、b-FGF、VASH-1的变化。以生理盐水组一般情况作为标准:川芎嗪组生存状态变化不明显,而顺铂组饮食量、活动量减少,精神状态较差,毛发无光泽,小鼠蜷缩一团;联合组介于二者之间。肿瘤体积依次为:川芎嗪组顺铂组联合组;体重与瘤重改变与肿瘤体积变化趋势一致。抑瘤率结果显示:与对照组相比,实验组的抑瘤率明显提高(P0.05),联合组抑瘤率最高(50.24%),顺铂组优于川芎嗪组(P0.05)。显微镜和透射电镜观察显示:各组细胞大小、细胞器、染色体、血管结构与生理盐水组比较均有改变,川芎嗪使细胞改变程度明显弱于顺铂,联合组对细胞破坏程度最大,出现凋亡小体。生理盐水组可见幼稚血管,其它组血管超微结构相对成熟。免疫组化检测HIF-1α、b-FGF、VASH-1结果显示:对照组高于其他组,联合组最低,各组与对照组相比,3个给药组的HIF-1α、b-FGF、VASH-1表达均明显降低(P0.05)。蛋白印迹结果显示:有相同的变化趋势。相关性分析显示:HIF-1α与b-FGF成正相关(r=0.610,P=0.035),b-FGF与VASH-1成正相关(r=0.591,P=0.043),HIF-1α与VASH-1无意义(r=0.171,P=0.549)。通过实验荷瘤小鼠的一般生存状态、体重、瘤体积、瘤重、血管超微结构、肿瘤细胞、血管生成因子的变化,抑瘤率的比较,证明川芎嗪具有抗肿瘤作用,既体现在对抑制肿瘤血管生成方面,又体现在提高顺铂的治疗效果。川芎嗪联合顺铂的机制可能为:通过川芎嗪抑制HIF-1α的表达,下调b-FGF基因的转录与翻译,导致b-FGF的诱导能力下降,最终降低VASH-1的表达,维持促血管调节因子与抑制血管生成因子之间的动态平衡,保持血管的正常化。使顺铂有效到达肿瘤部位,减轻对正常细胞的损坏,减轻副作用。VASH-1具有抑制血管生成作用,其生物制剂研制成功,可能对肿瘤血管治疗起到积极作用。
【关键词】：肺癌 川芎嗪 缺氧诱导因子1α 碱性成纤维细胞生长因子 血管生成抑制蛋白
【学位授予单位】：河北北方学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 英文缩写10-11
• 前言11-13
• 材料与方法13-18
• 结果18-22
• 附图22-28
• 附表28-29
• 讨论29-33
• 结论33-34
• 参考文献34-39
• 综述Vasohibin家族在血管生成中的作用39-52
• 参考文献46-52
• 致谢52-53
• 个人简历53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 胡家才;李清泉;;川芎嗪对低氧时肺癌A549细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响[J];湖北中医药大学学报;2011年04期

2 王s，

本文编号：1034911