胃癌中LGR5与Treg细胞的预后意义及其作用机制探索

发布时间：2017-10-15 07:45

  本文关键词：胃癌中LGR5与Treg细胞的预后意义及其作用机制探索

  更多相关文章： 胃癌 LGR5 调节性T细胞 转化生长因子-β 预后

【摘要】：[目的] 多富含亮氨酸重复单位的G蛋白偶联受体5(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor5, LGR5)是近年来肿瘤干细胞标记物研究的热点。调节性T细胞(Treg)可分泌多种可溶性因子来调节免疫微环境,在肿瘤免疫逃避中起重要作用。本实验的目的是研究胃癌组织中LGR5的表达和Treg细胞之间的联系,并研究TGF-β蛋白对胃癌细胞中LGR5表达的调节作用及其潜在机制。 [方法] 本研究采用2009年2月至2010年3月在我院确诊的100例胃癌病人石蜡标本及2013年5月至2014年5月在我院确诊的69例胃癌病人石蜡标本及新鲜组织标本。通过免疫组化观察胃癌组织中LGR5的表达及Treg细胞的数量,并分析与预后的关系。运用流式微珠阵列(cytometric bead array,CBA)检测胃癌组织中Thl/Th2相关细胞因子IL-2, IL-4,IL-6, IL-10, TNF以及IFN-γ的表达；运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胃癌组织中TGF-β的表达。通过在胃癌细胞培养基中加入TGF-β蛋白和TGF-β/ALK5/Smad2信号通路抑制剂SB431542,观察胃癌细胞中LGR5及β-catenin的表达变化。 [结果] 免疫组化结果显示,LGR5高表达组患者生存时间较LGR5低表达组明显缩短(五年总生存率：53%vs.79%；P=0.0057)；同时,高Treg细胞数组患者生存较低Treg细胞数组明显缩短(五年总生存率：54%vs.76%；P=0.0167)。LGR5高表达组胃癌组织中Treg细胞数(X±SD：12.94±0.8673)相比于LGR5低表达组(X±SD：7.051±0.5915)明显增高,两者有统计学差异(P0.0001)。LGR5高低表达两组间Thl/Th2相关细胞因子IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF以及IFN-Y表达并无明显差异,而TGF-β1在LGR5高表达组胃癌组织中的表达量明显高于LGR5低表达组(P0.0001)。在胃癌细胞培养过程中,加入外源性TGF-β1蛋白后,LGR5的表达上调,同时,β-catenin的表达也随之上调,而加入TGF-β/ALK5/Smad2信号通路的特异性拮抗剂SB431542之后,这种上调效应减弱。 [结论] 胃癌组织中表达的LGR5强度可视为一个潜在的预后指标,并有望成为下一个胃癌治疗的生物靶点,且与Treg细胞呈一定相关性,后者可能通过分泌TGF-β蛋白上调胃癌细胞中TGF-β/ALK5/Smad2信号通路,进而上调WNT信号通路,促进其下游LGR5蛋白的表达。
【关键词】：胃癌 LGR5 调节性T细胞 转化生长因子-β 预后
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 中英文缩略词9-11
• 目次11-12
• 1 引言12-14
• 2 材料与方法14-24
• 2.1 标本来源14-15
• 2.2 主要实验仪器15-16
• 2.3 主要实验材料与试刻16-17
• 2.4 实验方法17-22
• 2.5 统计方法22-24
• 3 结果24-34
• 3.1 病人临床特征24
• 3.2 胃癌组织中LGR5表达情况以及Treg细胞数与胃癌病人预后分析24-29
• 3.3 LGR5高表达组胃癌组织间Treg细胞数量高于LGR5低表达组29-31
• 3.4 LGR5高表达组胃癌组织中TGF-β表达量高于LGR5低表达组31-32
• 3.5 TGF-β1通过TGF-β/ALK5/Smad2信号通路与WNT信号通路的相互作用促进LGR5的表达32-34
• 4 讨论34-37
• 5 结论37-38
• 参考文献38-43
• 综述43-57
• 参考文献50-57
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 林月媛;郑波;老猫;;峰会俱乐部 邂逅皇室礼遇[J];商务奖励旅行;2007年10期

，

本文编号：1035937