茉莉酸甲酯通过ROS诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡及自噬的机制研究

发布时间：2017-10-15 20:10

  本文关键词：茉莉酸甲酯通过ROS诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡及自噬的机制研究

  更多相关文章： 茉莉酸甲酯 非小细胞肺癌 TNFRSF10B 凋亡 自噬 活性氧

【摘要】：茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MJ)是一种广泛存在的植物激素,在植物的信号转导、应激状况下的防御过程起效。近来研究表明,MJ对肿瘤细胞具有特异性的毒害作用。MJ对肿瘤细胞有多种影响,包括阻滞细胞周期、抑制瓦博格效应、诱导凋亡和非凋亡性细胞死亡。然而,MJ诱导肿瘤细胞凋亡的机制仍缺乏必要的研究。在本研究中,我们发现MJ通过DDIT3-TNFRSF10B-CASP通路诱导人非小细胞肺癌(non-small cell lung caner, NSCLC)细胞凋亡。此外,我们发现MJ还能通过降低CASP8的抑制蛋白CFLAR促进凋亡,而CFLAR过表达的细胞会一定程度上免于MJ诱导的凋亡。除凋亡的相关机制外,我们还首次发现MJ能诱导NSCLC细胞自噬,且该自噬对MJ诱导的凋亡起协同作用。最后,我们还发现抑制ROS路径后,MJ诱导的自噬和凋亡同时降低。综上所述,本研究对MJ诱导人NSCLC细胞死亡的机制进行了研究,发现MJ能通过ROS路径-自噬-凋亡的途径抑制NSCLC细胞的生存。这些研究揭示了MJ作为治疗肿瘤的小分子药物的前景以及MJ和其他药物协同作用治疗癌症的巨大潜力。
【关键词】：茉莉酸甲酯 非小细胞肺癌 TNFRSF10B 凋亡 自噬 活性氧
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要10-11
• ABSTRACT11-12
• 1 前言12-20
• 1.1 肺癌已成为当今人类生命健康的重大威胁12
• 1.2 茉莉酸甲酯概述12-14
• 1.2.1 茉莉酸甲酯12-13
• 1.2.2 茉莉酸甲酯与瓦博格效应13-14
• 1.2.3 茉莉酸甲酯抑制肿瘤的其他途径14
• 1.3 细胞凋亡概述14-17
• 1.3.1 细胞凋亡的定义14-15
• 1.3.2 细胞凋亡通路15-17
• 1.3.2.1 外源性细胞凋亡通路15
• 1.3.2.2 内源性细胞凋亡通路15-16
• 1.3.2.3 内质网应激通路16-17
• 1.4 细胞自噬概述17-18
• 1.4.1 自噬的定义17
• 1.4.2 自噬的类别及发生机制17-18
• 1.4.3 自噬在肿瘤中的作用18
• 1.5 ROS通路概述18-20
• 2 实验材料和试剂20-28
• 2.1 肿瘤细胞及培养所需试剂和材料20
• 2.2 实验试剂20-22
• 2.2.1 常见试剂20-21
• 2.2.2 主要抗体21-22
• 2.2.3 质粒22
• 2.2.4 siRNA22
• 2.3 实验仪器22-23
• 2.4 主要溶液及试剂配方23-28
• 2.4.1 细胞培养相关的试剂23-24
• 2.4.2 蛋白裂解相关试剂和配方24-25
• 2.4.3 蛋白免疫印迹所用试剂和配方25-28
• 3. 实验方法28-34
• 3.1 细胞培养28-29
• 3.1.1 肿瘤细胞的复苏28
• 3.1.2 肿瘤细胞的传代28
• 3.1.3 肿瘤细胞的冻存28-29
• 3.2 siRNA转染29
• 3.3 蛋白免疫印迹实验(Western blot)29-31
• 3.3.1 蛋白样品制备29-31
• 3.3.1.1 收集细胞29-30
• 3.3.1.2 裂解蛋白30
• 3.3.1.3 考马斯亮蓝法测定蛋白含量30
• 3.3.1.4 制备蛋白样品30-31
• 3.3.2 跑胶与显影31
• 3.4 SRB检测细胞存活率31-32
• 3.5 流式细胞术检测细胞凋亡32
• 3.6 统计学分析32-34
• 4 结果34-48
• 4.1 MJ通过诱导凋亡抑制NSCLC细胞增殖34-35
• 4.2 MJ通过上调死亡受体TNFRSF10B在NSCLC细胞中诱导凋亡35-37
• 4.3 MJ通过上调转录因子DDIT3以促进TNFRSF10B的表达37-40
• 4.4 在MJ诱导的凋亡过程中,CFLAR被下调40-41
• 4.5 MJ诱导NSCLC细胞自噬,且该自噬能促进MJ诱导的凋亡41-44
• 4.6 ROS物质的累积同时促进MJ诱导的凋亡和自噬44-48
• 5 讨论48-54
• 5.1 总览48
• 5.2 MJ诱导NSCLC细胞凋亡的机制讨论48-50
• 5.3 MJ诱导NSCLC细胞自噬,以及自噬和凋亡的关系讨论50-52
• 5.4 MJ诱导ROS增加,且影响自噬和凋亡的讨论52
• 5.5 总结52-53
• 5.6 未来的研究方向及研究的价值53-54
• 6 参考文献54-60
• 7 附录 缩略词表60-62
• 8 致谢62-64
• 9 论文发表情况64-65
• 学位论文评阅及答辩情况表65

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 许运龙,郭昭扬,张云兴,许贤荣;血管内皮生长因子在人非小细胞肺癌中表达的临床研究[J];中华肿瘤杂志;2000年05期

2 王继营,高珊,崔黎,黄丽春,宋立友;“双异”联合治疗晚期非小细胞肺癌37例[J];中国肺癌杂志;2000年02期

3 田静,李蓓兰;老年晚期非小细胞肺癌的化疗:一种新趋势[J];中国肺癌杂志;2000年05期

4 张世雯,周清华;不同的分割方案与化疗联合治疗非小细胞肺癌[J];中国肺癌杂志;2000年05期

5 胡发明,华波;血清白介素-10水平是晚期非小细胞肺癌病人的一项预后因素[J];国外医学(内科学分册);2000年11期

6 于亮,王梅,张灿灼;微血管在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J];泰山医学院学报;2000年04期

7 朱建英;预计2009年非小细胞肺癌药物市场将达20亿美元[J];国外医药(合成药 生化药 制剂分册);2001年02期

8 张利伟,刘树秋,陈海英,万锦华;立体定向适形放疗配合常规放疗治疗非小细胞肺癌近期疗效分析[J];黑龙江医药科学;2001年05期

9 王肇炎;晚期非小细胞肺癌的解救化疗[J];肿瘤研究与临床;2001年01期

10 朱尧武,杨宇飞;非小细胞肺癌的术后辅助治疗[J];中国临床医生;2001年12期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张新民;唐蜜;李代强;;磷酸化酪氨酸蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

2 胡旭东;杨国仁;霍宗伟;方永存;陈鸣陆;;~(99m)Tc-MIBI SPECT显像观察非小细胞肺癌多药耐药的研究[A];首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集[C];2007年

3 秦庆亮;熊海健;王爱;边海蓉;卢振国;杨培英;朱斌耀;王芸;;立体定向放射治疗放疗后复发非小细胞肺癌[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年

4 冯耘;万欢英;高蓓莉;项轶;刘嘉琳;;血管紧张素转换酶二在非小细胞肺癌肿瘤生长和血管生成中的作用[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年

5 ;非小细胞肺癌术后辅助治疗及一线治疗[A];天津市抗癌协会肺癌专业委员会2011年学术年会论文集[C];2011年

6 蒋峰;许林;史美祺;;1560例非小细胞肺癌患者多因素预后分析[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

7 张华;;术前中性粒细胞和淋巴细胞比值对非小细胞肺癌患者预后的影响[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

8 王子平;;老年晚期非小细胞肺癌治疗思考[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年

9 张沂平;;非小细胞肺癌个体化化疗[A];2009年浙江省肿瘤学术年会暨肿瘤诊治新进展学习班论文汇编[C];2009年

10 刘嘉湘;施志明;李和根;徐振晔;朱晏伟;赵丽红;高虹;刘苓霜;朱惠蓉;张晖;;益肺抗瘤饮治疗271例非小细胞肺癌临床观察[A];中医药优秀论文选（下）[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者 李颖;特罗凯对中国非小细胞肺癌患者效果佳[N];科技日报;2007年

2 晓白;非小细胞肺癌研究获重大进展[N];人民日报;2008年

3 记者 张文天;非小细胞肺癌中医药综合医疗方案研究进展顺利[N];科技日报;2009年

4 辛勇　张先稳;早期非小细胞肺癌的治疗进展[N];中国中医药报;2004年

5 记者高新军;专家提出 建非小细胞肺癌中医临床指南[N];中国中医药报;2009年

6 上海长海医院呼吸科 夏阳 整理 邱志涛;非小细胞肺癌放虎归山还是乘胜追击[N];健康报;2013年

7 记者 王丹;新研究揭示炎症促非小细胞肺癌发生机制[N];健康报;2014年

8 记者 李颖;凯美纳成晚期非小细胞肺癌治疗优选方案[N];科技日报;2014年

9 白京丽;非小细胞肺癌最佳治疗方案[N];中国医药报;2000年

10 ;表皮生长因子受体抑制剂在治疗非小细胞肺癌中的作用[N];医药经济报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 白艳（Bai Sally）;整合素αvβ5合并EGFR检测用于非小细胞肺癌转移及预后评估的研究[D];复旦大学;2013年

2 王筱恬;PLZF和DACH1的异常表达影响非小细胞肺癌发生与发展的分子机制[D];复旦大学;2012年

3 洪专;木犀草素治疗EGF受体继发性突变的非小细胞肺癌的实验研究[D];南京大学;2014年

4 张沛;ILT4在非小细胞肺癌中的作用及分子机制研究[D];山东大学;2015年

5 王世坤;RBP2诱导非小细胞肺癌和食管鳞癌表皮间质化[D];山东大学;2015年

6 赵世俊;~(18)F-FDG PET/CT在非小细胞肺癌预后评估中的应用研究[D];北京协和医学院;2013年

7 邱晨;影响非小细胞肺癌手术后远期生存的相关因素分析[D];山东大学;2015年

8 姜远瞩;术前血液学指标与淋巴结转移阴性非小细胞肺癌患者预后关系的研究[D];山东大学;2015年

9 朱良明;STAT3及其靶基因对非小细胞肺癌生物学行为调控机制的初步实验研究[D];山东大学;2015年

10 周菊;HPV-16感染对非小细胞肺癌和A549细胞的影响及miRNAs表达改变的研究[D];昆明医科大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王勇;诱导型一氧化氮合酶在非小细胞肺癌中表达的临床意义[D];中国医科大学;2006年

2 王静;Eg5、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[D];河北医科大学;2015年

3 覃建颖;IL-21和Tc1细胞在非小细胞肺癌患者外周血及癌灶中的变化及相互作用[D];广西医科大学;2015年

4 张瑞;ⅢA-N2期非小细胞肺癌手术治疗和放射治疗的疗效对比及相关预后因素的分析[D];河北医科大学;2015年

5 石姣姣;基于多肽构建抗肿瘤靶向药物的应用研究[D];北京协和医学院;2015年

6 胡世霖;非小细胞肺癌中医辨证分型与Napsin A、TTF-1在肺癌组织中表达的相关性研究[D];福建中医药大学;2015年

7 王婷婷;细胞因子活化杀伤细胞治疗非小细胞肺癌临床研究[D];河北医科大学;2015年

8 李晓霞;非小细胞肺癌ERCC1、RRM1和TUBB3表达及临床意义[D];河北医科大学;2015年

9 史晓熠;PTP4A1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[D];河北医科大学;2015年

10 张旭;LncRNA h19在非小细胞肺癌中的表达及对细胞的生物学行为的影响[D];河北医科大学;2015年

，

本文编号：1038456