初步探讨rhVEGI-192对小鼠肝癌H22移植瘤的放射增敏作用及其机制

发布时间：2017-10-19 03:36

  本文关键词：初步探讨rhVEGI-192对小鼠肝癌H22移植瘤的放射增敏作用及其机制

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【摘要】：目的:通过比较4组不同方法对昆明鼠移植瘤生长的抑制程度,探讨rh VEGI-192对小鼠肝癌H22移植瘤有无放射增敏作用,并对其放射增敏机制进行初步研究。方法:建立肝癌H22昆明鼠移植瘤模型,待移植瘤最大径达到约5mm时,随机分为四组,即:空白对照组,rh VEGI-192组,10Gy组,rh VEGI-192+10Gy组,观察rh VEGI-192有无放射增敏作用。通过培养包含VEGI-192质粒的大肠杆菌,经镍柱过滤、纯化等步骤获得rh VEGI-192,经腹腔注射连续给药14天,空白对照组给予等量的PBS溶液。自给药日起,隔日测量移植瘤体积和小鼠体重,计算增敏系数(SER)。取小鼠脾脏进行HE染色,通过观察生发中心,分析免疫应答情况。取肿瘤组织进行免疫荧光染色分析,分析肿瘤微血管情况。并对移植瘤组织进行Western blot分析,检测HIF-1a、VEGF、VEGI等的表达情况。结果:rh VEGI-192对肝癌H22移植瘤具有放射增敏作用,增敏系数(SER)为1.33。与rh VEGI-192组及10Gy组相比,rh VEGI-192+10Gy组对小鼠移植瘤的生长抑制更明显,其中rh VEGI-192显著抑制血管生成的时间窗为第5-9天(P=0.048,0.0002,0.025)。另外,肿瘤组织免疫荧光染色分析可见,血管内皮细胞CD31表达减少,其中在给药的第5-9天差异有统计学意义(P=0.0129,0.0361,0.0445)。脾脏HE染色显示,rh VEGI-192能明显促进脾脏生发中心的形成,增强免疫应答反应。Western blot结果显示,HIF-1a蛋白表达明显下调,VEGF表达下调,而VEGI表达上调。结论:rh VEGI-192具有放射增敏作用,显著抑制血管生成的时间窗是第5-9天,其通过改善乏氧、抑制VEGF表达增强肝癌H22移植瘤的放射敏感性,同时也能增强免疫应答。
【关键词】：重组人血管内皮细胞生长抑制因子 H22细胞 放射增敏
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第1章 前言9-12
• 第2章 材料与方法12-26
• 2.1 材料12-17
• 2.1.1 主要仪器和设备12
• 2.1.2 主要试剂12-13
• 2.1.3 实验药物13
• 2.1.4 实验动物和细胞系13-14
• 2.1.5 主要溶液的配制14-17
• 2.2 实验方法17-26
• 2.2.1 移植瘤模型的建立及分组17
• 2.2.2 药物及给药方法17-19
• 2.2.3 照射条件及照射方法19-20
• 2.2.4 测量方法及标本处理20
• 2.2.5 评估指标20
• 2.2.6 HE染色20-22
• 2.2.7 免疫荧光染色22-23
• 2.2.8 western blot23-25
• 2.2.9 统计分析25-26
• 第3章 结果与分析26-34
• 3.1 纯化获得rhVEGI-19226
• 3.2 移植瘤生长延迟时间和增敏系数26-27
• 3.3 移植瘤生长曲线27-29
• 3.4 小鼠体重变化曲线29
• 3.5 HE染色结果29-30
• 3.6 免疫荧光结果30-32
• 3.7 western blot检测结果32-34
• 第4章 讨论34-38
• 第5章 结论与展望38-39
• 致谢39-40
• 参考文献40-43
• 攻读学位期间的研究成果43-44
• 综述44-52
• 参考文献50-52

【参考文献】

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1 彭芳;王谨;邹毅;包勇;黄文林;陈光明;罗显荣;陈明;;重组内皮抑素对肿瘤血管结构和乏氧改善作用的实验观察[J];中华放射肿瘤学杂志;2011年01期

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本文编号：1058830