无血清培养富集恶性黑色素瘤干细胞的初步研究

发布时间：2017-10-19 18:00

  本文关键词：无血清培养富集恶性黑色素瘤干细胞的初步研究

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【摘要】：目的:探讨利用无血清培养基从恶性黑色素瘤细胞中分离出恶性黑色素瘤干细胞的可行性,然后再研究恶性黑色素瘤干细胞的生物学特性。方法:将恶性黑色素瘤细胞系A375细胞接种于含b FGF、B27、EGF的无血清培养基中,观察其生长增殖过程,利用无血清培养基获得球体细胞,将其与普通黑色素瘤细胞分别注射入BALB/c小鼠体内比较它们的致瘤性,将获得的瘤体行免疫组化,检测肿瘤干细胞表面标记物CD20、CD133的表达情况,将获得的球体细胞和普通肿瘤细胞分别加入Transwell小室内比较它们的迁移能力,通过免疫荧光检测其肿瘤干细胞表面标记物CD20、CD133的表达情况。结果:采用无血清培养基可以获得球体细胞,球体细胞致瘤性、迁移能力强于普通贴壁细胞,肿瘤组织可检测到CD20、CD133的表达,球体细胞中CD20、CD133的表达明显高于普通贴壁细胞。结论:恶性黑色素瘤存在肿瘤干细胞,无血清培养的球体细胞可以富集肿瘤干细胞,肿瘤干细胞具有很强的致瘤性、转移能力,球体细胞表达肿瘤干细胞标记物。
【关键词】：恶性黑色素瘤 球体 致瘤性 CD20 CD133
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.5
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 缩略词表6-7
• 第1章 引言7-9
• 第2章 材料和方法9-14
• 2.1 材料9-10
• 2.1.1 研究对象9
• 2.1.2 主要仪器设备9
• 2.1.3 主要试剂9-10
• 2.1.4 主要试剂配制10
• 2.2 方法10-14
• 2.2.1 恶性黑色素瘤A375细胞的培养10-11
• 2.2.2 无血清培养恶性黑色素瘤肿瘤干细胞11-13
• 2.2.3 统计分析13-14
• 第3章 结果14-21
• 3.1 恶性黑色素瘤A375细胞系球体细胞形成情况14
• 3.2 动物致瘤能力14-16
• 3.3 免疫组化16-17
• 3.4 免疫荧光17-19
• 3.5 细胞迁移实验19-21
• 第4章 讨论21-25
• 第5章 结论25-26
• 致谢26-27
• 参考文献27-30
• 攻读学位期间的研究成果30-31
• 综述 恶性黑色素瘤干细胞的研究进展31-38
• 参考文献36-38

【参考文献】

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本文编号：1062511