TRPV5、TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

发布时间：2017-10-25 03:13

  本文关键词：TRPV5、TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

  更多相关文章： 钙离子通道 TRPV5 TRPV6 细胞内钙 结肠癌SW480细胞

【摘要】：目的:在TRP超家族中,TRPV5和TRPV6是唯一已知的钙离子高选择性通道,因此,本实验通过观察结肠癌SW480细胞TRPV5和TRPV6通道蛋白的表达,并改变TRPV5和TRPV6通道的功能状态,以观察对结肠癌SW480细胞内Ca2+浓度及SW480细胞生长、凋亡的调节作用。旨在研究TRPV5、TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响,为进一步研究TRPV5、TRPV6在结肠癌的诊断和治疗提供理论依据和实验基础。方法:(1)采用实时荧光定量PCR技术、Western-Bolt技术及细胞免疫组化技术,检测TRPV5/TRPV6激动剂1,25(OH)2D3(10-8mol/l)和Ca Cl2(10mmol/l)以及其抑制剂Cu Cl2(100μmol/l)对结肠癌SW480细胞中TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量表达的比较。(2)通过激动剂及抑制剂改变TRPV5和TRPV6通道的功能状态后,用高速离子成像系统观察TRPV5/TRPV6对结肠癌SW480细胞内Ca2+的浓度变化;(3)对结肠癌SW480细胞进行同步化处理后,采用细胞增殖实验(MTT比色法)、细胞迁移实验(划痕修复法)及细胞凋亡实验(生化检测Tunel法),观察激动剂1,25(OH)2D3和Ca Cl2以及抑制剂Cu Cl2对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、凋亡的影响。结果:(1)TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量在激动剂1,25(OH)2D3组及Ca Cl2组较对照组表达明显增高(P0.05);抑制剂Cu Cl2组较对照组表达明显降低(P0.05);激动剂1,25(OH)2D3组与Ca Cl2组比较无明显差异(P0.05);激动剂1,25(OH)2D3组和Ca Cl2组TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量明显增高,与抑制剂Cu Cl2组比较差异有显著性(P0.01);(2)在激动剂1,25(OH)2D3作用下,结肠癌SW480细胞内Ca2+的浓度较对照组增加(P0.05);在抑制剂Cu Cl2作用下,结肠癌SW480细胞内Ca2+的浓度较对照组降低(P0.05);(3)激动剂1,25(OH)2D3和Ca Cl2对结肠癌SW480细胞有促增殖、迁移及抑制凋亡作用(P0.05),并呈浓度时间依赖性;抑制剂Cu Cl2对结肠癌SW480细胞有抑制增殖、迁移及诱导凋亡作用(P0.05),并呈浓度时间依赖性。结论:(1)激动剂1,25(OH)2D3和Ca Cl2能使结肠癌SW480细胞中TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白的表达上调;使结肠癌SW480细胞内Ca2+浓度增加,促进结肠癌SW480细胞增殖、迁移及抑制其凋亡。(2)抑制剂Cu Cl2能使结肠癌SW480细胞中TRPV5 m RNA、TRPV6m RNA及蛋白的表达下调;使结肠癌SW480细胞内Ca2+浓度降低;抑制结肠癌SW480细胞增殖、迁移及诱导其凋亡。(3)TRPV5、TRPV6在结肠癌SW480细胞中均有表达,但以TRPV6较明显。TRPV5、TRPV6通道蛋白表达的变化,可能通过增加或降低细胞内Ca2+含量,进一步调节结肠癌SW480细胞生物学行为。
【关键词】：钙离子通道 TRPV5 TRPV6 细胞内钙 结肠癌SW480细胞
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 中英缩略词对照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-26
• 实验结果26-41
• 讨论41-45
• 结论45-46
• 参考文献46-50
• 综述50-60
• 参考文献56-60
• 致谢60-61
• 作者简介61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 贾勇圣;魏晓莉;赵杰;郑建全;;离子通道与肿瘤[J];生理科学进展;2007年03期

2 林丽琼;黄维甄;陈健鹏;;TRPV6对人卵巢癌细胞株HO-8910PM迁移的影响[J];山东医药;2012年01期

，

本文编号：1091800