蒲公英对人胃癌BGC823细胞及小鼠肝癌H22细胞的影响

发布时间：2017-10-25 18:02

  本文关键词：蒲公英对人胃癌BGC823细胞及小鼠肝癌H22细胞的影响

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【摘要】：目的：通过不同浓度蒲公英对荷瘤小鼠肝癌H22细胞和体外培养人胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭作用及相关蛋白表达的影响,探讨蒲公英的抗肿瘤作用及其分子机制。方法：免疫组化法检测不同浓度蒲公英对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中TGF-β1、 mTOR、MMP-2和MMP-9等蛋白因子表达的影响。克隆形成、MTS法检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞存活率及增殖变化；通过Transwell小室检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞迁移和侵袭作用的影响；实时定量PCR检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞MMP-2mRNA表达水平的影响。结果：1、在体实验结果显示,不同浓度蒲公英均可抑制H22荷瘤小鼠瘤组织的增殖,与对照组相比,有显著性差异(P0.05)。免疫组化结果表明,蒲公英可下调瘤组织中TGF-β1、mTOR、MMP-2和MMP-9的表达。2、三个浓度蒲公英都可抑制胃癌BGC823细胞的增殖,并且随着浓度的增加,细胞克隆数呈显著下降趋势(t=2.011、1.812、1.214,P0.05)；2.5mg/ml蒲公英可抑制BGC823细胞增殖能力,随着用药后培养时间延长细胞增长水平逐渐下降；4.0 mg/ml蒲公英抑制BGC823细胞增殖的作用最强(P0.05)。3、Transwell小室检测结果显示,三个浓度蒲公英都可使BGC823细胞迁移数减少,且随着浓度的增加这种作用逐渐增强,2.5 mg/ml和4.0mg/ml组与对照组相比,有显著性差异(t=0.359、0.297,P0.05),这两组之间没有显著差异(P0.05),表明在一定浓度范围内,蒲公英浓度的变化对癌细胞的迁移变化影响不大。蒲公英对BGC823细胞侵袭作用的影响与迁移基本一致。4、RT-PCR结果显示,不同浓度蒲公英均可下调BGC823细胞MMP2mRNA表达,随蒲公英浓度的增加下调作用逐渐增强；在2.5 mg/ml和4.0mg/ml浓度时,MMP-2表达的下调作用有显著差异(P0.05)。结论：1、蒲公英对H22荷瘤小鼠肝癌细胞生长具有抑制作用,中剂量组(0.25g/m1)药物浓度对荷瘤小鼠癌组织生长有明显的抑制作用。2、蒲公英下调TGF-β1和mTOR因子的表达,从而抑制信号传导通路中下游相关因子的表达调控,抑制癌细胞的增殖。对于调控细胞转移的主要分子MMP-2和MMP-9也有一定的下调作用,说明蒲公英通过抑制相关因子的表达变化来抑制肿瘤细胞的增殖和转移。3、蒲公英对体外培养的BGC823细胞也有较明显的抑制作用。这种作用可能通过下调BGC823细胞MMP-2的表达,发挥抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的作用。
【关键词】：蒲公英 BGC823细胞 H22细胞 增殖 迁移 侵袭
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R73-3
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一章 前言10-17
• 1.1 研究背景10-11
• 1.1.1 癌症现状10
• 1.1.2 胃癌的临床治疗10-11
• 1.2 蒲公英简介11-14
• 1.2.1 蒲公英的主要成分11-12
• 1.2.2 蒲公英的药理作用12-14
• 1.3 蒲公英对胃癌及肝癌的作用效果研究14-15
• 1.3.1 抑制胃癌及肝癌的增殖14
• 1.3.2 抑制胃癌及肝癌细胞的转移14-15
• 1.4 本论文研究内容15-17
• 第二章 材料17-19
• 2.1 小鼠和细胞株来源17
• 2.2 主要实验设备及仪器17-18
• 2.3 实验试剂18
• 2.4 实验所用药剂18-19
• 第三章 实验方法19-24
• 3.1 蒲公英对H22肝癌荷瘤小鼠的影响19-20
• 3.1.1 H22细胞的培养19
• 3.1.2 H22细胞的接种及给药19
• 3.1.3 取材19
• 3.1.4 免疫组化法检测各组织TGF-β1、mTOR、MMP-2和MMP-9的变化19-20
• 3.2 蒲公英对BGC823细胞的影响20-24
• 3.2.1 蒲公英对BGC823细胞克隆的影响20-21
• 3.2.2 蒲公英对BGC823细胞增殖的影响21
• 3.2.3 蒲公英对BGC823细胞迁移的影响21-22
• 3.2.4 蒲公英对BGC823细胞侵袭的影响22
• 3.2.5 实时定量PCR检测MMP-2基因表达22-23
• 3.2.6 统计学方法23-24
• 第四章 实验结果24-35
• 4.1 蒲公英对H22荷瘤小鼠体重、瘤体及相关蛋白表达的影响24-29
• 4.1.1 不同药物浓度在不同时间对小鼠体重和瘤体积大小的影响24-26
• 4.1.2 不同药物浓度对小鼠H22瘤组织TGF-β1和mTOR的表达影响26-28
• 4.1.3 不同药物浓度对小鼠H22瘤组织MMP-2和MMP-9表达的影响28-29
• 4.2 蒲公英对胃癌BGC823细胞克隆、增殖、迁移及侵袭作用的影响29-35
• 4.2.1 蒲公英对胃癌B6C823细胞克隆形成的影响29-30
• 4.2.2 蒲公英对胃癌BGC823细胞增殖的影响30-31
• 4.2.3 蒲公英对BGC823细胞迁移的影响31-32
• 4.2.4 蒲公英对胃癌BGC823细胞侵袭力的影响32-33
• 4.2.5 实时定量PCR检测蒲公英对BGC823细胞MMP-2表达的影响33-35
• 第五章 讨论35-40
• 5.1 蒲公英对肝癌H22荷瘤小鼠的影响35-36
• 5.2 蒲公英对胃癌BGC823细胞克隆形成和增殖的影响36-38
• 5.3 蒲公英对胃癌BGC823细胞迁移和侵袭的影响38
• 5.4 实时定量PCR检测MMP-2基因表达38-40
• 第六章 结论40-41
• 6.1 结论40
• 6.2 展望40-41
• 参考文献41-46
• 附图46-53
• 在学期间的研究成果53-54
• 致谢54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 谷肄静;王立娟;;蒲公英总黄酮的提取及其抑菌性能[J];东北林业大学学报;2007年08期

2 于新慧;石学魁;张晓莉;刘亚成;王志龙;李福娟;;蒲公英对小鼠免疫功能的调节作用[J];中国医药导刊;2008年06期

3 饶澄;黄显;;黄酮类化合物抗炎和抗肿瘤共同作用机制的研究进展[J];海峡药学;2010年06期

4 于新慧;石学魁;张晓莉;刘亚威;;蒲公英对小鼠免疫功能的调节研究[J];牡丹江医学院学报;2008年04期

5 沈敬华,杨丽敏,张林娜,宝音开博尔,郭明飞;五种中药提取物抗肿瘤作用的研究[J];内蒙古医学院学报;2005年04期

6 郁皓;许泓瑜;华东;;硫酸酯化灰树花多糖体外诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究[J];山东医药;2006年21期

7 党双锁;张正国;袁利超;王宝峰;张欣;宋平;程延安;;大黄素和黄芪多糖对大鼠实验性肝癌的抑制作用[J];西安交通大学学报(医学版);2006年03期

8 权伍荣;;蒲公英提取物对小鼠胃粘膜损伤的恢复作用[J];延边大学农学学报;2008年04期

9 李东明;;奥美拉唑联合蒲公英治疗幽门螺杆菌阳性的慢性浅表性胃炎58例临床疗效观察[J];中国医疗前沿;2009年12期

10 宋振民;常文华;任泽旺;;蒲公英提取物对凝固酶阴性葡萄球菌的体外抗菌活性研究[J];中成药;2007年04期

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本文编号：1094848