环状非编码RNA与食管鳞状细胞癌发生发展的关联研究

发布时间：2017-10-29 02:22

  本文关键词：环状非编码RNA与食管鳞状细胞癌发生发展的关联研究

  更多相关文章： cir-ITCH 食管鳞状细胞癌 Wnt/β-catenin信号通路

【摘要】：由外显子剪接形成的环状RNA分子是一类特殊的非编码RNA,其最初是通过分析少数的转录基因而被人发现。最近的一些研究表明环状RNA分子在功能上发挥了miRNA“分子海绵”的作用。本研究旨在探索环状RNA的表达在食管鳞状细胞癌的发生发展过程中是否存在异常。为此,我们应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测环状RNA分子——cir-ITCH在食管鳞癌及癌旁组织中的差异表达,我们分别在来自中国东部和南部人群的共684例食管鳞状细胞癌患者中进行双中心的病例研究。结果表明cir-ITCH在食管鳞癌组织中表达水平显著低于食管鳞癌旁组织。我们进一步通过一系列的生物实验来验证cir-ITCH的相关功能。研究发现,cir-ITCH通过发挥miR-7、miR-17、miR-214“分子海绵”的作用增强ITCH的表达,同时ITCH的高表达促进磷酸化形式的DVL2的泛素化降解从而达到抑制Wnt/β-catenin信号通路的作用。根据这些研究结果我们可以认为cir-ITCH可能通过参与调控Wnt信号通路来控制食管鳞癌的发生发展。
【关键词】：cir-ITCH 食管鳞状细胞癌 Wnt/β-catenin信号通路
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-10
• 材料与方法10-21
• 2.1 材料10-13
• 2.1.1 研究对象10-12
• 2.1.2 主要试剂与仪器12-13
• 2.2 方法13-20
• 2.2.1 实时定量PCR检测cir-ITCH表达水平13-16
• 2.2.2 RNase R实验16
• 2.2.3 慢病毒表达载体的构建16-17
• 2.2.4 报告基因的构建、瞬时转染以及荧光素酶活性测定17-18
• 2.2.5 放线菌素D实验18
• 2.2.6 Western blot18-19
• 2.2.7 细胞周期分析19
• 2.2.8 细胞增殖检测19
• 2.2.9 集落形成实验19
• 2.2.10 小鼠成瘤模型的构建19-20
• 2.3 数据分析20-21
• 结果21-33
• 3.1 证明CIR-ITCH的存在21
• 3.2 CIR-ITCH在食管癌旁组织中高表达21-22
• 3.3 CIR-ITCH在食管癌细胞中的特性22-23
• 3.4 CIR-ITCH与MIRNA的相互关系23-27
• 3.5 食管癌组织中CIR-ITCH与ITCH的相关性分析27
• 3.6 CIR-ITCH能够参与调控WNT信号通路27-29
• 3.7 CIR-ITCH能够调节ESCC细胞周期影响细胞增殖29-31
• 3.8 CIR-ITCH能够抑制ESCC肿瘤细胞集落形成能力31-32
• 3.9 CIR-ITCH能够抑制体内食管癌肿瘤细胞的生长32-33
• 讨论33-36
• 参考文献36-41
• 综述41-50
• 参考文献46-50
• 附录50-51
• 攻读学位期间发表的论文51-52
• 致谢52-53

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本文编号：1110998