HOTAIR在CD133阳性胃癌细胞中的表达及其作用的研究

发布时间：2017-11-04 13:21

  本文关键词：HOTAIR在CD133阳性胃癌细胞中的表达及其作用的研究

  更多相关文章： HOTAIR CD133 SiRNA 胃癌 细胞迁移 细胞侵袭

【摘要】：目的研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA, LncRNA)HOTAIR在胃癌CD133 P日性细胞中的表达及其作用。方法免疫磁珠分选(Magnetic cell sorting,MACS)分选胃癌KATO-Ⅲ细胞中CDl33阳性和CD133阴性细胞,逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerize chain reaction,RT-PCR)检测其中HOTAIR和CD 133 mRNA的表达差异；小干扰RNA技术(Small interfering RNA, siRNA)干扰CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR的表达,RT-PCR检测RNA干扰效率及干扰HOTAIR对CD133及EMT(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关因子mRNA表达的影响,Transwell检测干扰HOTAIR对细胞的迁移及侵袭能力的影响。结果免疫磁珠分选(MACS)分选后,CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中CD 133 mRNA的表达(0.6056±0.0163)明显高于CD133阴性组CD133 mRNA的表达(0.4337±0.0115,p=0.000)及未分选组C D133 mRNA的表达(0.4451±0.0175,p=0.000)。CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR mRNA的表达(0.7143±0.0480)明显高于CD133阴性组HOTAIR mRNA的表达(0.4978±0.0133,p=0.000)及未分选组HOTAIR mRNA的表达(0.6169±0.0084,p=0.006)。RNA干扰技术(siRNA)干扰CDl33阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR基因表达后,干扰组(siH)HOTAIR ml RNA的表达(0.3555+0.0110)明显低于阴性干扰组(NC)HOTAIR mRNA的表达(0.6326±0.0212,p=0.000)及未干扰组(Ctrl)HOTAIR mRNA的表达(0.6620±0.0162, p=0.000)。RNA干扰技术(siRNA)干扰CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR基因表达后,干扰组(siH)CD133 mRNA的表达(0.4396±0.0181)明显低于阴性干扰组(NC)CD133 mRNA的表达(0.6221±0.0145,p=0.000)及未干扰组(Ctrl)CD133 mRNA的表达(0.6342±0.0089,p=0.000)。RNA干扰技术(siRNA)干扰CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR基因表达后,干扰组(siH)E-cadherin mRNA的表达(0.8262±0.0044)明显高于阴性干扰组(NC)E-cadherin mRNA的表达(0.6377±0.0160,p=0.000)及未干扰组(Ctrl)E-cadherin mRNA的表达(0.6281±0.0076,p=0.000),干扰组(siH)N-cadherinmRNA的表达(0.3426±0.0181),明显低于阴性干扰组(NC)N-cadherin mRNA的表达(0.6394±0.0070,p=0.000)及未干扰组(Ctrl)N-cadherin mRNA的表达(0.6287±0.0167,p=0,000)。Transwell迁移实验发现,RNA干扰CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR的表达后,干扰组(siH)穿膜细胞数(26.6667±2.5167),显著低于阴性干扰组(NC)穿膜细胞数(68±15.6204,p=0.003)及未干扰组(Ctrl)穿膜细胞数(69±10.1489,p=0.003)。Transwell侵袭实验发现,RNA干扰CD133阳性KATO-Ⅲ细胞中HOTAIR的表达后,干扰组(siH)穿膜细胞数(16.666±3.2146),显著低于阴性干扰组(NC)穿膜细胞数(36.6667±1.5275,p=0.002)及未干扰组(Ctrl)穿膜细胞数(37.0000±7.0000,p=0.002).结论HOTAIR在CD133阳性KATO-Ⅲ胃癌细胞中的表达高于CD133阴性细胞,干扰HOTAIR表达可降低CD133阳性KATO-Ⅲ胃癌细胞中CD133mRNA的表达,抑制胃癌细胞发生上皮间质转化(EMT),抑制胃癌细胞的迁移及侵袭。
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2

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