Med19促进乳腺癌生长增殖的机制研究

发布时间：2017-11-08 10:22

  本文关键词：Med19促进乳腺癌生长增殖的机制研究

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【摘要】：目的探讨Med19通过CBFA2T3-HEB通路促进乳腺癌生长增殖的机制。方法构建si RNA-Med19慢病毒表达载体、Med19过表达慢病毒载体(LVMed19)和CBFA2T3过表达慢病毒载体(LV-CBFA2T3)。应用Med19 RNAi慢病毒(si RNA-Med19)表达载体感染Med19高表达的MDA-MB-231、MCF-7细胞,分别分为感染si RNA-Med19慢病毒表达载体组(KD组)、空载体对照组(NC组)及空白对照组(CON组)三个处理组;应用Med19过表达慢病毒载体和CBFA2T3过表达慢病毒载体感染Med19低表达的BT549、Hs578T细胞,分别分为a:CON-Med19;b:LV-Med19;c:LV-Med19+CON-CBFA2T3;d:LV-Med19+LVCBFA2T3四个不同处理组。MTT实验和克隆形成实验检测细胞的生长增殖能力,RT-PCR和Western blot检测各组细胞Med19、CBFA2T3及HEB的转录及蛋白表达水平。提取25例人乳腺癌组织蛋白,Western blot检测Med19、CBFA2T3蛋白表达水平,SPSS18.0统计两者相关性。结果Med19 RNAi慢病毒感染Med19高表达的人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7(KD组),与NC组、CON组相比,细胞增殖速度和克隆形成能力显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。RT-PCR和Western blot检测结果显示,KD组Med19 m RNA及蛋白表达与NC组、CON组相比显著下降,CBFA2T3 m RNA及蛋白表达显著升高,HEB m RNA及蛋白表达量显著降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。提示下调Med19表达可抑制乳腺癌细胞的生长增殖,其作用可能是通过上调CBFA2T3并抑制HEB表达发挥作用。Med19过表达慢病毒载体感染Med19低表达的BT549、Hs578T细胞(LV-Med19组),与空载体对照组(CON-Med19组)相比,细胞增殖速度和克隆形成能力显著增加(P0.05);LV-Med19组Med19的表达量较CON-Med19组显著升高,CBFA2T3表达量显著下降,HEB表达量显著增高,差异均具有统计学意义(P0.05)。提示上调Med19可促进乳腺癌生长增殖,其机制可能是通过抑制CBFA2T3表达和促进HEB表达发挥的。同时上调Med19和CBFA2T3表达的LV-Med19+LV-CBFA2T3组,与仅上调Med19表达的LV-Med19+CON-Med19组相比,细胞增殖和克隆形成受到显著抑制,其水平趋近空载体对照组(CON-Med19组),表明上调CBFA2T3表达可消除Med19高表达对细胞生长增殖的促进作用。在人乳腺癌组织中,Western blot检测结果显示Med19和CBFA2T3蛋白表达呈负相关(r=-0.553,P0.01),进一步证实CBFA2T3表达受Med19的调控。结论1.Med19基因高表达,促进乳腺癌细胞生长增殖;2.Med19基因通过抑制CBFA2T3基因表达,进而促进HEB的表达而发挥促进乳腺癌细胞生长增殖的作用;3.下调Med19表达或上调CBFA2T3表达可能是Med19阳性乳腺癌靶向治疗的新策略。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

【参考文献】

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1 王晓艳;李莉华;郭子健;饶敏;;Med19过表达慢病毒载体的构建及鉴定[J];实用医学杂志;2011年22期

2 陆付耳,黄光英;Investigation on Therapeutic Mechanisms of Three Principles of Traditional Chinese Medicine for Treating Malignant Tumors[J];Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine;2003年03期

3 戴桂萍;李莉华;郭子健;王晓艳;;Med19在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系[J];江苏医药;2013年01期

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本文编号：1156749