癌基因RMP在非小细胞肺癌中的表达及其对肿瘤生物学功能的影响

发布时间：2017-11-18 11:27

  本文关键词：癌基因RMP在非小细胞肺癌中的表达及其对肿瘤生物学功能的影响

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【摘要】：目的：通过测定RMP在人非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达水平,来研究RMP与肿瘤病人临床病理特征的联系,同时探索其对NSCLC细胞生物学功能的影响,为NSCLC的基因靶向治疗提供强有力的依据。方法：1.通过qRT-PCR检测RMP在NSCLC细胞系和正常细胞系中的mRNA表达水平,同时用western blot检测RMP相应的蛋白表达水平。2.通过qRT-PCR检测RMP在人非小细胞肺癌组织和相应癌旁组织中的mRNA表达水平,同时用western blot检测RMP相应的蛋白表达水平。3.通过qRT-PCR检测RMP在不同特征NSCLC组织样本中的mRNA表达水平,分析其与肿瘤临床病理特征的联系,同时用表格统计病人的相关临床信息。4.荧光显微镜检测各组RMP质粒在NSCLC细胞A549中的瞬时转染情况,同时用qRT-PCR和western blot检测转染效率。5.通过CCK-8试验检测RMP对A549细胞增殖的影响。6.用不同浓度的吉非替尼处理转染了各组不同RMP质粒的A549细胞,通过CCK-8试验、流式细胞术检测RMP对A549细胞化疗敏感性的影响。7.通过CCK-8试验、流式细胞术检测RMP对A549细胞放疗敏感性的影响,同时用western blot检测细胞凋亡相关基因的蛋白表达水平。8.通过流式细胞术检测RMP对于A549细胞周期的影响,同时用western blot检测周期相关基因的蛋白表达水平。9.通过迁移和侵袭试验检测RMP对A549细胞迁移和侵袭能力的改变。10.通过裸鼠皮下移植瘤实验观察RMP对移植瘤生长情况的影响,同时用免疫组化检测RMP、Bax、Bcl-2和capase-3的蛋白表达情况。结果：1.qRT-PCR和western blot实验结果显示：无论是mRNA和蛋白表达水平,RMP在NSCLC细胞系中均呈相应的高表达状态。2.qRT-PCR和,western blot实验结果表明：与癌旁组织相比,RMP在人非小细胞肺癌组织中的：mRNA和蛋白的表达水平均明显提高。同时发现RMP的表达与肿瘤组织的淋巴结和T-stage状态有关,与病人的年龄、性别和肿瘤类型无关。3.荧光显微镜、qRT-PCR和western blot实验表明：各组RMP质粒在A549细胞中瞬时转染顺利,mRNA和蛋白表达水平呈相应的提高。4.CCK-8试验表明：RMP明显促进A549细胞的增殖。5.CCK-8试验表明：在化疗药物剂量逐渐增加的作用下,RMP仍能够减缓A549细胞的死亡；流式细胞术检测表明：RMP能够减少化疗引起的细胞凋亡6.CCK-8试验表明：在辐射剂量逐渐增加的作用下,RMP仍能够减缓A549细胞的死亡；流式细胞术检测表明：RMP能减少放疗引起的细胞凋亡；western blot实验检测表明：在放疗后,RMP能够抑制A549细胞中凋亡相关基因蛋白的表达,促进抗凋亡相关基因蛋白的表达。7.流式细胞术检测表明：RMP能够减少由放疗引起的A549细胞周期G2期的阻滞,同时western blot实验表明：放疗后,RMP能够调节A549中细胞周期相关基因蛋白的表达。8.迁移和侵袭试验表明：RMP能够促进A549细胞的迁移和侵袭能力。9.裸鼠皮下移植瘤实验表明：RMP能够促进移植瘤的生长,同时免疫组化检测表明：RMP能够抑制凋亡相关基因蛋白的表达,促进抗凋亡相关基因蛋白的表达,从而促进肿瘤的生长。结论：1.RMP在人非小细胞肺癌中呈高表达的状态,结合临床病人信息发现它的表达与非小细胞肺癌病人的淋巴结和T-stage状态有关,说明RMP可能与NSCLC的生长和恶性程度有着密切的联系,是潜在的一种NSCLC相关促癌基因。2.RMP的过表达能够改变A549如细胞增殖、凋亡、周期、迁移和侵袭等各项生物学功能,促进移植瘤的生长,进一步表明RMP在NSCLC中扮演着癌基因的角色,为我们对肺癌的基因靶向治疗又提供一个强有力的目标。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2

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6 于亮,王梅,张灿灼;微血管在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J];泰山医学院学报;2000年04期

7 朱建英;预计2009年非小细胞肺癌药物市场将达20亿美元[J];国外医药(合成药 生化药 制剂分册);2001年02期

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9 王肇炎;晚期非小细胞肺癌的解救化疗[J];肿瘤研究与临床;2001年01期

10 朱尧武,杨宇飞;非小细胞肺癌的术后辅助治疗[J];中国临床医生;2001年12期

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1 张新民;唐蜜;李代强;;磷酸化酪氨酸蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

2 胡旭东;杨国仁;霍宗伟;方永存;陈鸣陆;;~(99m)Tc-MIBI SPECT显像观察非小细胞肺癌多药耐药的研究[A];首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集[C];2007年

3 秦庆亮;熊海健;王爱;边海蓉;卢振国;杨培英;朱斌耀;王芸;;立体定向放射治疗放疗后复发非小细胞肺癌[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年

4 冯耘;万欢英;高蓓莉;项轶;刘嘉琳;;血管紧张素转换酶二在非小细胞肺癌肿瘤生长和血管生成中的作用[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年

5 ;非小细胞肺癌术后辅助治疗及一线治疗[A];天津市抗癌协会肺癌专业委员会2011年学术年会论文集[C];2011年

6 蒋峰;许林;史美祺;;1560例非小细胞肺癌患者多因素预后分析[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

7 张华;;术前中性粒细胞和淋巴细胞比值对非小细胞肺癌患者预后的影响[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

8 王子平;;老年晚期非小细胞肺癌治疗思考[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年

9 张沂平;;非小细胞肺癌个体化化疗[A];2009年浙江省肿瘤学术年会暨肿瘤诊治新进展学习班论文汇编[C];2009年

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1 记者 李颖;特罗凯对中国非小细胞肺癌患者效果佳[N];科技日报;2007年

2 晓白;非小细胞肺癌研究获重大进展[N];人民日报;2008年

3 记者 张文天;非小细胞肺癌中医药综合医疗方案研究进展顺利[N];科技日报;2009年

4 辛勇　张先稳;早期非小细胞肺癌的治疗进展[N];中国中医药报;2004年

5 记者高新军;专家提出 建非小细胞肺癌中医临床指南[N];中国中医药报;2009年

6 上海长海医院呼吸科 夏阳 整理 邱志涛;非小细胞肺癌放虎归山还是乘胜追击[N];健康报;2013年

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8 记者 李颖;凯美纳成晚期非小细胞肺癌治疗优选方案[N];科技日报;2014年

9 白京丽;非小细胞肺癌最佳治疗方案[N];中国医药报;2000年

10 ;表皮生长因子受体抑制剂在治疗非小细胞肺癌中的作用[N];医药经济报;2005年

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7 张瑞;ⅢA-N2期非小细胞肺癌手术治疗和放射治疗的疗效对比及相关预后因素的分析[D];河北医科大学;2015年

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10 王婷婷;细胞因子活化杀伤细胞治疗非小细胞肺癌临床研究[D];河北医科大学;2015年

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本文编号：1199641