线粒体凋亡通路关键因子在大鼠自发性乳腺肿瘤中的表达

发布时间：2017-11-22 21:22

  本文关键词：线粒体凋亡通路关键因子在大鼠自发性乳腺肿瘤中的表达

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【摘要】：目的在SD大鼠自发性乳腺肿瘤模型建立的基础上,探讨线粒体凋亡通路关键因子在SD大鼠自发性乳腺肿瘤中的表达规律及相互作用机制。方法首先为SD大鼠自发性乳腺肿瘤的筛查：将130只(♀：♂=1：1)Sprague Dawley(SD)大鼠,SPF屏障环境中饲养60周后剖杀收集大鼠自发性乳腺肿瘤组织,通过病理学检查对肿瘤进行定性并分类,分为3组：正常乳腺组织(Ⅰ组),良性乳腺肿瘤组织(Ⅱ组)和恶性乳腺肿瘤组织(Ⅲ组)。然后在乳腺肿瘤模型建立的基础之上进行检测线粒体凋亡通路相关因子在SD大鼠自发性乳腺肿瘤中的表达情况：分别采用SABC免疫组化染色和RT-RCR法检测Bcl-2、Bid、P53、AIF、Cyt C、Apaf-1、Caspase-3、 XIAP的蛋白和mRNA水平的表达情况。结果130只大鼠中有14只检出自发性乳腺肿瘤,均为雌性,肿瘤发生率为10.77%,雌性肿瘤发生率为21.54%;其中7只为乳腺纤维腺瘤,良性肿瘤发生率为5.38%,雌性良性肿瘤发生率为10.77%；7只为乳腺癌(其中3例为乳腺腺癌,2例为乳腺乳头状癌,2例为浸润性导管癌),恶性肿瘤发生率为5.38%,雌性恶性肿瘤发生率为10.77%。线粒体凋亡通路上游关键因子表达情况：Bcl-2蛋白免疫组化结果显示其蛋白在三组中表达有显著差异,Ⅱ组中蛋白表达量显著高于Ⅰ组(P0.01),Ⅲ组中表达显著增高(P0.05)。Bid蛋白在Ⅰ组中高表达,极显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P0.01)；同时Bid基因mRNA相对表达量变化趋势与蛋白表达一致,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中表达呈逐步降低的趋势。P53蛋白在Ⅰ组有表达,Ⅱ组中表达显著升高(P0.05),Ⅲ组中表达升高极显著(P0.01),P53基因nRNA目对表达含量变化与蛋白表达变化趋势呈一致性,在正常、良性、恶性组间的表达也是呈逐渐升高的趋势,有统计学意义(P0.01)。中游关键因子表达情况：AIF蛋白在Ⅰ组高表达,其值显著高于Ⅱ组和恶性肿瘤中的表达量,而Ⅱ组的表达量显著高于Ⅲ组(P＜0.01); AIF基因mRNA相对表达含量在三组中的变化趋势与蛋白表达呈一致性,在三组间表达呈逐渐降低的趋势,差异有统计学意义(P＜.01)。 Cyt C蛋白在Ⅱ组中表达极显著高于Ⅰ组和Ⅲ组中的表达量(P0.01),另Ⅰ组中的表达量显著高于Ⅲ组(P0.05)。Cyt C基因mRNA的相对表达量在三组中也是呈现升高后降低的趋势,与蛋白变化一致,差异极显著(P0.01)。Apaf-1蛋白在正Ⅰ组中强阳性表达,Ⅱ组中表达量显著降低；相对Ⅱ组,Ⅲ组中表达显著升高；但Ⅲ组中表达显著低于Ⅰ组中的表达(p0.01)。Apaf-1基因mRNA相对表达量变化在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中呈逐渐降低趋势,与蛋白表达变化趋势有所不同,可能为转录、翻译的不同步有相关性。线粒体凋亡通路下游关键因子表达：Caspase-3蛋白在Ⅰ组中表达量显著高于Ⅱ组和恶性肿瘤中的表达量,而Ⅱ组的表达量极显著高于Ⅲ组(P0.01)；Caspase-3基因mRNA目对表达含量在三组中的变化趋势与蛋白表达呈一致性,在三组间表达呈逐渐降低的趋势,差异有统计学意义(P0.01)。XIAP蛋白在Ⅰ组中有表达,Ⅱ组中表达显著升高(P0.01),Ⅲ组中表达升高极显著(P0.01),XIAP基因：mRNA相对表达含量变化与蛋白表达变化趋势呈一致性,在正常、良性、恶性组间的表达也是呈逐渐升高的趋势,差异极显著(P0.01)。由以上结果可见线粒体凋亡通路上中下游关键因子的蛋白及mRNA在三组中的差异均有显著统计学差异,表明线粒体凋亡通路参与了乳腺肿瘤的发生。结论 本实验确定乳腺肿瘤为SD大鼠高发肿瘤,肿瘤发生与年龄有相关性,且以雌性为主,与人类乳腺肿瘤发病情况类似,适宜于人类乳腺肿瘤的相关研究。Bcl-2、 Bid、P53、AIF、CytC、Apaf-1、Caspase-3、XIAP的蛋白及：mRNA在乳腺正常组织、良性肿瘤、恶性肿瘤中表达均有显著差异,且在这两个水平上表达相对一致,提示这些关键因子和肿瘤发生密切相关。
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

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本文编号：1216114