miR-363-3p对人胃癌细胞生物学行为影响的研究

发布时间：2017-11-22 22:21

  本文关键词：miR-363-3p对人胃癌细胞生物学行为影响的研究

  更多相关文章： miR-363-3p 胃癌 侵袭 迁移

【摘要】：目的研究miR-363-3p对人胃癌细胞SGC-7901,MKN-45,MGC-803细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的调控作用。方法通过慢病毒载体将带有荧光标记物的化学合成的miR-363-3p序列和其反义序列转染入人胃癌细胞SGC-7901,MKN-45,MGC-803,使用荧光倒置镜观察细胞内荧光的数量,同时应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测上调或下调组与相应阴性对照中miR-363-3p的表达水平。使用CCK-8实验检测miR-363-3p对3株胃癌细胞增殖的影响,用细胞流式技术实验检测miR-363-3p对3株胃癌细胞凋亡和周期的影响,用划痕实验、transwell实验检测miR-363-3p对3株胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响。结果①慢病毒稳定干扰SGC-7901、MGC-803和MKN-45细胞后miR-363-3p表达量相对于阴性对照组分别下调了0.62,0.68,0.63倍(p值均0.05),而过表达SGC-7901、MGC-803和MKN-45细胞后miR-363-3p表达量相对于阴性对照组分别上调了58.2,78.6,84.2倍(p值均0.05)。②CCK-8实验和细胞流式实验结果显示转染后miR-363-3p上调转染组各株胃癌细胞增殖活性、凋亡率以及细胞周期与相应阴性对照组相比并无明显差异(p0.05);转染后miR-363-3p下调转染组各株胃癌细胞增殖活性、凋亡率以及细胞周期与相应阴性对照组相比并无明显差异(p0.05)③划痕实验结果显示划痕后miR-363-3p下调组在同一时间愈合程度与其阴性对照组有明显的差异(p0.05),mi R-363-3p下调组愈合程度强于其阴性对照组,尤其在48h时两组愈合程度差异最明显;同时发现miR-363-3p上调组在同一时间愈合程度与其阴性对照组也有明显的差异(p0.05),miR-363-3p上调组愈合程度低于其阴性对照组,尤其在48h时两组愈合程度差异最明显。④transwell迁移和侵袭实验结果显示miR-363-3p下调组在48h时穿过小室的细胞数目与其阴性对照组穿过小室的细胞数目有明显的差异(p0.05),miR-363-3p下调组穿过小室的细胞数目明显多于其阴性对照组;同时发现miR-363-3p上调组在48h时穿过小室的细胞数目与其阴性对照组穿过小室的细胞数目有明显的差异(p0.05),mi R-363-3p上调组穿过小室的细胞数目少于其阴性对照组穿过小室的细胞数目。结论miR-363-3p可能作为癌基因参与了胃癌的侵袭和迁移过程。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2

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