沉默ARTN基因对胃癌细胞生物学特性的影响及ARTN与胃癌临床病理特征之间的关系

发布时间：2017-11-23 11:24

  本文关键词：沉默ARTN基因对胃癌细胞生物学特性的影响及ARTN与胃癌临床病理特征之间的关系

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【摘要】：目的研究沉默ARTN基因对胃癌细胞增殖、侵袭、转移等生物学特性的作用,并探索其具体的机制,以及检测胃癌组织中ARTN基因的表达,结合患者的临床病理特征,确定ARTN基因与胃癌发生、发展的关系。方法使用Western Blot方法检测胃癌细胞株SGC7901、MGC803、BGC823中ARTN基因的表达量,筛选出ARTN基因表达量最高的一株细胞,合成ARTN基因的干扰RNA(1808,1383,1604三组),并利用基因转染技术将三组干扰RNA分别转染进该胃癌细胞株,并用流式细胞仪观察转染效率,分别用实时荧光定量PCR和Western Blot方法检测基因干扰后的ARTN mRNA和蛋白的表达,选出沉默效率最高的那一组干扰RNA序列。沉默ARTN基因后,使用CCK-8的方法检测细胞增殖活性,采用Transwell小室方法分别检测细胞迁移能力及侵袭能力,分别用实时荧光定量PCR和Western Blot方法检测细胞ARTN基因转染前后胃癌相关基因(P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2)在RNA水平和蛋白水平上的表达变化。另外用免疫组化和Western Blot分别检测胃癌组织和正常胃粘膜的ARTN表达。结果MGC803中ARTN基因的表达量最高,干扰RNA序列1383组的沉默效率最高,转染干扰序列后,ARTN基因在RNA水平和蛋白水平的表达明显下降,胃癌细胞MGC803在干扰ARTN基因后,细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显下降,胃癌细胞中P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2在RNA水平和蛋白水平表达均下调。胃癌组织中的ARTN表达明显高于正常胃粘膜。结论ARTN基因可以增强胃癌细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力,沉默ARTN基因可以下调胃癌增殖、转移和侵袭相关基因的表达。ARTN与胃癌的分化程度、浸润深度、转移及TNM分期有关,检测ARTN的表达可以用来评估胃癌的临床分期和指导其治疗,对胃癌的发生发展起到了重要作用。
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2

【参考文献】

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1 张训;杨宏;谢清;陈盛强;;EphA2和MMP2在胶质瘤组织表达及其相关性[J];肿瘤学杂志;2011年02期

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本文编号：1218300