水通道蛋白9表达水平对三氧化二砷抗肝癌效果的影响

发布时间：2017-11-24 00:14

  本文关键词：水通道蛋白9表达水平对三氧化二砷抗肝癌效果的影响

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【摘要】：目的：通过将重组质粒转染HepG2肝癌细胞,改变水甘油通道蛋白9 (aquaglyceroporin 9,AQP9)在细胞中的表达,研究其表达水平的改变对三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其生物学行为的影响。方法： (1)采用四甲基偶氮唑盐法(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)筛选As203对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用的IC50值；(2)将重组质粒pEGFP-N1-AQP9和pshRNA-AQP9a转染肝癌细胞,通过荧光显微镜,RT-PCR和Western blot法检测其表达：(3)将As203加入转染后及未处理的HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率；流式细胞仪分析周期和凋亡情况；Franswell实验验证迁移侵袭能力的改变；酶标仪检测Caspase-3活性。结果：(1)在荧光显微镜下可观察到绿色荧光的表达,重组质粒对AQP9有明显的过表达及抑制表达作用； (2)转染pEGFP-N1-AQP9组肝癌细胞的增殖抑制作用明显大于单纯As203处理组,侵袭及迁移能力显著减弱,细胞周期停滞在Go/G1期,凋亡明显多于单纯As203处理组,Caspase-3活性最高。(3)转染pshRNA-AQP9a组细胞的增殖抑制作用及Caspase-3活性小于单纯As203处理组,侵袭迁移能力强于单纯As203处理组,细胞周期停滞在Go/G1期的数量及凋亡率较少。结论：重组质粒pEGFP-N1-AQP9转染HepG2肝癌细胞后,比单纯使用As203抗肝癌抑制细胞增殖能力强,凋亡率增高,使肝癌细胞HepG2对As203化疗的敏感性增强,从而影响As203对肝癌的治疗效果。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

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本文编号：1220341