顺铂联合环靶明对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-11-24 08:35

  本文关键词：顺铂联合环靶明对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响

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【摘要】：目的:研究顺铂(cisplatin)联合Hedgehog通路特异性阻断药物环靶明(cyclopamine)对人骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响。方法:骨肉瘤MG-63细胞株在超净工作台中进行细胞传代,细胞培养箱中常规培养。实验分组:空白组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液),对照组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,等体积的无水乙醇),环靶明组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,2.5/5/10/20μmol/L环靶明),顺铂联合环靶明组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,10μmol/L环靶明,2/4/8μmol/L顺铂)。MTT法检测药物对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡,q RT-PCR检测环靶明处理前后骨肉瘤MG-63细胞中Gli1、PTCH1 m RNA的表达量的变化。结果:(1)MTT法检测不同浓度环靶明对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响,实验结果显示:环靶明对骨肉瘤MG-63细胞有明显的抑制增殖的作用(p0.01),并有一定的浓度依赖性,其中在5~20μmol/l处抑制明显。10μmol/l环靶明作用MG-63细胞观察细胞生长,结果表明,随着环靶明作用时间的延长,MG-63细胞的增殖能力明显下降(p0.01),呈时间依赖性。顺铂联合环靶明组,随着顺铂浓度的增加,骨肉瘤细胞增殖抑制率升高(p0.05)。(2)流式细胞术检测细胞凋亡实验结果显示:经5、10、20μmol/l的环靶明处理48h后,骨肉瘤MG-63细胞的凋亡率逐渐增高,明显高于对照组(p0.01),顺铂联合环靶明组骨肉瘤MG-63细胞凋亡率高于对照组及单纯环靶明组(p0.05)。(3)q RT-PCR结果显示:骨肉瘤MG-63细胞中Gli1、PTCH1均有表达,并且在环靶明浓度5μmol/l和10μmol/l组中Gli1和PTCH1的m RNA表达均有下调。结论:Hedgehog通路特异性阻断药物环靶明能够抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,顺铂联合环靶明能够更加有效的抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R738.1

【参考文献】

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本文编号：1221671