旋毛虫ES抗原诱导DC对肝细胞癌预防性作用的实验研究

发布时间：2017-11-27 10:18

  本文关键词：旋毛虫ES抗原诱导DC对肝细胞癌预防性作用的实验研究

  更多相关文章： 旋毛虫 排泄/分泌抗原 树突状细胞 肝细胞癌

【摘要】：旋毛虫是一种人兽共患的寄生性线虫,能够导致人类以及许多哺乳动物发生严重的疾病,即旋毛虫病,该病分布广泛,几乎遍及全世界。尽管旋毛虫感染给公共卫生和养殖业带来种种负面影响,但是旋毛虫对宿主的免疫调控作用,以及提升宿主对其他疾病的抵抗能力,尤其是对人类自身免疫病和肿瘤的抵抗能力越来越受到广泛地关注。最近的研究表明,旋毛虫的排泄/分泌物对多种肿瘤具有一定的抑制作用,这为旋毛虫应用于抗肿瘤制剂提供了强有力的支持。近年来,癌症已成为威胁人类生命健康的主要杀手。据统计,在我国,肝癌已成为第二大癌症,仅次于肺癌。而且,肝癌的预后不良,给临床治疗带来了巨大的挑战。因此,寻找高效的抗肿瘤制剂,并配合手术、放疗化疗方法是目前国内外研究的热点。本研究从C57BL/6小鼠后肢的股骨和胫骨中分离出了树突状细胞的前体细胞,在体外加入一系列的细胞因子对其进行诱导、分化、成熟。并通过普通显微镜、扫描电镜、HE染色以及流式细胞术等方法对其鉴定,证明了所分离提取、诱导培养的细胞为C57BL/6小鼠髓源性DC。将不同发育时期的旋毛虫ESP诱导的C57BL/6小鼠髓源性DC腹腔注射到小鼠H22肝细胞癌模型中,每隔2天,尾静脉采血,收集血清,检测血清中IL-4、IL-6、IL-10以及IFN-r的表达情况。待最后一次免疫2周后处死小鼠,取瘤,计算抑瘤率。结果表明,旋毛虫ESP诱导的C57BL/6小鼠髓源性DC对小鼠H22肝细胞癌具有一定的预防性作用效果。实验组中抑瘤率达到了46.91%,具有临床治疗意义。并且,实验组小鼠的体重增加低于对照组,剖检发现,实验组小鼠的平均瘤重为1.8234g,而对照组为3.4348g;实验组小鼠血清IL-4和IL-10的表达量均值比对照组高,而IL-6以及IFN-r的表达量比对照组均值偏低,以上结果均表明旋毛虫ESP诱导的C57BL/6小鼠髓源性DC对小鼠H22肝细胞癌具有一定的预防性作用。基于以上的研究,我们接下来分离健康成年人外周静脉血中的单核细胞(PBMC),在体外加入一系列的细胞因子对其进行诱导分化为成熟的DC。采用普通显微镜、扫描电镜、HE染色以及流式细胞术等方法对其进行分析鉴定,均符合人外周静脉血DC的特征。进而将旋毛虫ESP诱导的健康成年人外周静脉血DC腹腔注射到人H7402肝细胞癌裸鼠肿瘤模型中,每3天称量各组小鼠的体重,待最后一次注射2周后,处死裸鼠,取瘤,计算抑瘤率。结果表明,实验组小鼠体重增长低于空白对照组;实验组小鼠的平均瘤重为0.9089,也低于空白对照组的1.4437;实时荧光定量PCR检测小鼠脾脏中细胞因子的变化,实验组小鼠血清IL-4和IL-10的表达量均值比空白对照组高,而IL-6以及IFN-r的表达量比空白对照组均值偏低,结果均与小鼠H22肝细胞癌的结果相一致。从而一致的表明了旋毛虫ESP诱导的DC对肝细胞癌具有一定的预防性作用效果。本研究成功分离诱导了C57BL/6小鼠髓源性DC以及健康成年人外周静脉血DC,通过不同的方式鉴定均符合所提取DC的特征。旋毛虫ESP诱导的DC对小鼠H22及人H7402肝细胞癌均表现出了良好的预防性效果。本研究为旋毛虫虫体及其ESP作为一种外来性抗原,诱导机体DC,发挥了良好的免疫作用,为其进一步应用于抗肿瘤制剂,提供了一定的研究思路与理论参考,并使其作为一种生物制剂应用于临床成为了可能。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R73-36

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 张媛媛;宫鹏涛;张西臣;李建华;杨举;张国才;;旋毛虫抗C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞作用的研究[J];中国病原生物学杂志;2009年01期

2 刘军;孙家行;刘丽丹;张西臣;杜志军;刘占川;王晓科;王海亮;李爽;;旋毛虫对BALB/c小鼠体内C6胶质瘤细胞的干扰作用[J];中风与神经疾病杂志;2008年06期

3 李霞;张国才;张西臣;李建华;杨举;宫鹏涛;徐鹏;;旋毛虫对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞的作用[J];中国生物制品学杂志;2008年04期

4 宫鹏涛;张西臣;李建华;张国才;杨举;曹利利;张景芝;;旋毛虫抗小鼠体内A549肺癌细胞作用的研究[J];中国病原生物学杂志;2008年03期

5 吴涛;张西臣;李建华;张国才;杨举;宫鹏涛;;不同旋毛虫粗抗原对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤抑制作用观察[J];中国病原生物学杂志;2007年04期

6 吴涛;张西臣;李建华;刘全;尹继刚;杨举;;旋毛虫抗小鼠体内SP2/0肿瘤作用的研究[J];中国寄生虫病防治杂志;2005年06期

7 李继红,崔茜,李小丹,伍杨,林平,刘锦红,熊茂来;旋毛虫培养液对人白血病细胞K562凋亡和坏死的影响[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2005年03期

8 谢春玲，龚金瑞，汤英龙，瞿逢伊;旋毛虫幼虫分泌物抗原在小鼠体内诱生肿瘤细胞毒因子的研究[J];中国人兽共患病杂志;1994年06期

9 谢春玲,瞿逢伊,汤英龙,龚金瑞;旋毛虫感染小鼠血清对L929细胞的毒性作用[J];中国人兽共患病杂志;1993年03期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 张树春;BALB/c裸鼠人结肠癌动物模型的建立及模型肿瘤Ki67蛋白的表达[D];昆明医学院;2010年

，

本文编号：1231512