VentX促进造血干细胞向红系分化及对肿瘤干细胞分化的初探

发布时间：2017-11-28 13:29

  本文关键词：VentX促进造血干细胞向红系分化及对肿瘤干细胞分化的初探

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【摘要】：非洲爪蟾蜍xvent基因同源哺乳动物基因VentX,作为一个新发现的造血发育调节基因,对调控造血干细胞的增殖与分化起着重要作用,此外它还参与中胚层的分化定型、细胞衰老、细胞增殖与分化及炎症反应等的调节。GATA家族成员GATA-2,通过与靶基因的GATA结合位点结合,在造血系统发育中起关键性的调节作用。实验室前期实验已证实GATA-2可以结合到VentX启动子区两个GATA结合位点来顺式调控VentX,本文利用VentX和GATA-2的过表达载体和基因沉默的慢病毒,在从人骨髓中分离出的CD34+细胞中进行了VentX和GATA-2 二者的过表达或沉默,通过Western bloting检测了VentX和GATA-2的表达水平,通过细胞增殖实验和联苯胺染色检测等实验考察VentX和GATA-2对CD34+细胞增殖以及向红系分化的影响,结果发现在CD34+细胞中过表达GATA-2或VentX均可抑制细胞增殖,提高红系分化特异因子α-,β-珠蛋白的表达,促进CD34+细胞向红系分化。肿瘤干细胞(tumor stem cells, TSCs)理论认为TSCs是肿瘤组织内一小部分能够自我更新并有能力再生肿瘤的细胞,与肿瘤的形成和生长密切相关,其理论从一个全新的角度诠释了肿瘤的发生、发展本质,给肿瘤的靶向性、根治性治疗带来了希望。但目前对TSCs的研究还处于初级阶段,TSCs维持自我更新及无限增殖潜能的分子机制尚不清楚,影响TSCs多向分化潜能的相关因素也未得到完全阐明。鉴于TSCs与正常干细胞有诸多相似特征和VentX基因对造血干细胞的分化调节,本文进行了VentX对肿瘤干细胞分化的初步探索。利用无血清悬浮培养富集肿瘤干细胞及在乳腺癌BT549细胞中过表达VentX,考察了VentX过表达与肿瘤干细胞比例的关系以及对干细胞标志物ALDH1和干细胞分化重要因子Nanog、Oct4、TGF-β表达的影响,结果发现在BT549细胞中,VentX的表达随肿瘤干细胞的比例升高而增加。过表达VentX与无血清悬浮培养富集对ALDH1、 Nanog、Oct4、TGF-β的表达有相似的影响效果,特别是对于干细胞标志物ALDH1,对BT549细胞的这两种处理都可以提高ALDH1的表达。
【学位授予单位】：湖南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R73-3
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本文编号：1234149