miR-139在结直肠癌组织中的表达及其对癌细胞生长的影响

发布时间：2017-12-09 11:36

  本文关键词：miR-139在结直肠癌组织中的表达及其对癌细胞生长的影响

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【摘要】：背景最近研究发现miRNA是一组碱基数目大约在22左右的单链RNA,通过不同的方式在疾病的病理和生理方面起到调节作用,比如肿瘤就是其中之一。调节基因的表达通过调节靶基因,大多通过减少靶miRNA的蛋白质产量。随着对miR-139的研究深入,发现miR-139在不同肿瘤的起始、进展和转移过程中发挥不同的作用。目的探讨miR-139在结直肠癌组织中的表达,以及上调miR-139表达对结直肠癌细胞生长的影响。方法1. 收集2013年4月-6月安徽医科大学第一附属医院普外科20例新鲜大肠癌组织及癌远端5cm正常大肠黏膜组织。2. 应用实时定量PCR法检测miR-139在20例大肠癌组织及癌旁组织中的表达。3.HT29细胞转染miR-139 mimics后,通过MTT、Softagar方法检测miR-139对大肠癌细胞增殖的影响。4. Transwell实验检测miR-139对大肠癌细胞迁移和侵袭的影响。5. 实验结果均用x±s表示。统计分析运用GraphPad Prism软件。利用t检验分析各组数据的统计学差异。结果1. miR-139在20例大肠癌组织及其癌旁组织中的表达水平分别为6.21019E-05±6.08506E-09和0.000269444±0.000166458,大肠癌组织中miR-139表达水平低于对应的癌旁组织,差异有统计学意义(t=4.41,P0.01)。2. 在HT29结肠癌细胞株中转染miR-139 mimics后的第1天至第5天,通过MTT比色分析法检测OD值发现HT29细胞中miR-139的含量影响细胞的增殖的显著变化,对照组与实验组结果分别为,第一天：(0.0565、0.031)；第二天：(0.218、0.11825)；第三天：(0.46225、0.25975)；第四天：(0.92011、0.45)；第五天：(1.87425、0.97375),并且随着时间的推移,有扩大趋势,表明转染miR-139 mimics的HT29细胞增殖明显受限。3.HT29转染miR-139后在Softagar实验中计数对照组每个视野41.33333±5.338539,miR-139组每个视野72.1111 1±12.03583,差异有统计学意义(t=8.79,P0.01),表明miR-139抑制大肠癌细胞非锚定生长的能力。4. Transwell小室实验显示,与阴性对照相比,转染miR-139 mimics后,在迁移实验和侵袭实验中,实验组穿过半透膜的数量低于对照组,表明HT29细胞转染miR-139后的迁移及侵袭能力明显下降。结论miR-139在结直肠癌组织中低表达,miR-139表达上调可抑制HT29生长、迁移及侵袭能力,miR-139有潜在抑癌作用。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.34

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本文编号：1270271