RACK1对肺腺癌细胞株A549生物学行为及VEGF，Bcl-2，CyclinD1表达的影响

发布时间：2017-12-15 01:18

  本文关键词：RACK1对肺腺癌细胞株A549生物学行为及VEGF，Bcl-2，CyclinD1表达的影响

  更多相关文章： 肺腺癌 活化的蛋白激酶C受体1 shRNA干扰 流式细胞术

【摘要】：目的:研究RACK1基因沉默对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响,探究其对VEGF,Bcl-2,CyclinD1表达的影响。方法:采用脂质体转染法将针对RACK1基因的RACK1 shRNA及空载质粒分别转染至A549细胞中,分别设稳定转染的实验组、阴性对照组和空白对照组,并进行以下实验:(1)Western Blot法检测转染前后的A549细胞中RACK1蛋白表达的变化;(2)CCK-8法、平板克隆形成实验以及软琼脂集落形成实验检测shRNA干扰后细胞的生长增殖状况;(3)划痕愈合实验观察体外A549细胞运动迁移的改变;(4)流式细胞术检测A549细胞周期和细胞凋亡率的变化;(5)Western Blot法检测转染前后的A549细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、抗细胞凋亡基因(Bcl-2)、细胞周期蛋白Dl(CyclinD1)表达的变化。结果:(1)Western blot检测显示,在shRNA干扰48 h后,转染了特异性针对RACK1的shRNA的4组细胞RACK1蛋白的表达水平均明显下调(P0.05),其中转染了shRNA1的A549细胞组的RACK1蛋白表达水平较另外三组的表达水平显著降低(P0.05),而空载质粒干扰A549细胞后,RACK1的表达无明显变化(P0.05);(2)CCK-8法、平板克隆形成实验显示实验组细胞生长明显受到抑制(P0.05);(3)划痕愈合实验表明实验组细胞的迁移能力显著减弱(P0.05);(4)流式细胞术检测发现实验组细胞G0/G1期比例增加、凋亡率增高(P0.05);(5)Western blot结果显示,实验组A549细胞内VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表达明显下调(P0.05)。结论:RACK1基因沉默能抑制肺腺癌A549细胞增殖和迁移,诱导其凋亡,下调VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表达。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杨晋平,王泽,张苏;肺腺癌5-羟色胺受体的免疫组织化学定位[J];四川解剖学杂志;2003年02期

2 吴一龙,林嘉颖,杨学宁,乔贵宾,王坤,陈刚;肺腺癌患者酪氨酸激酶信号传导通路的异常与临床预后[J];中华医学杂志;2004年12期

3 张利群,陈杭薇,王四海,辛庆红,杜玉国,尤兰华;人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染肺腺癌细胞系的研究[J];山东医药;2005年12期

4 黎联;梅同华;周向东;张新高;车德亚;;细胞外信号调节激酶信号通路与基质金属蛋白酶-26在肺腺癌表达中的关系[J];第三军医大学学报;2009年02期

5 王亚南;顾国浩;;生物芯片在肺腺癌研究和诊疗中的应用进展[J];国际检验医学杂志;2011年02期

6 ;我国人体肺腺癌细胞系建立[J];肿瘤;1981年06期

7 季晨阳,张义R，

本文编号：1290091