姜黄素下调Tiam1表达抑制鼻咽癌细胞5-8F增殖与侵袭

发布时间：2017-12-19 11:04

  本文关键词：姜黄素下调Tiam1表达抑制鼻咽癌细胞5-8F增殖与侵袭，出处：《南华大学》论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:观察Tiam1蛋白在鼻咽癌组织中表达情况及临床病理意义,探究姜黄素对鼻咽癌5-8F细胞增殖、侵袭和转移的影响及机制。方法:1.通过免疫组化法检测57例不同病理类型鼻咽癌组织及10例鼻咽黏膜慢性炎症组织中Tiam1表达情况,分析Tiam1表达与鼻咽癌临床病理特征之间相关性;2.利用CCK8法检测鼻咽癌5-8F细胞在不同姜黄素浓度处理后增殖活力变化。本实验设置姜黄素药物处理5个浓度组(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)、空白对照组及DMSO溶剂对照组,分别作用24、48、72h三个时间点后检测5-8F细胞增殖活力变化并绘制姜黄素对细胞增殖活力的浓度-时间关系图表,根据CCK-8实验结果选择0μmol/L、20μmol/L、60μmol/L、100μmol/L药物浓度组进行划痕实验、Transwell、Western blot实验;3.划痕实验观察不同浓度姜黄素处理5-8F细胞24h后迁移能力变化;4.Transwell实验观察各实验组细胞在体外穿膜至小室下层细胞数目,了解姜黄素处理后对细胞体外侵袭能力的影响;5.运用Western blot免疫印迹法检测空白对照组及3个实验组细胞在处理24h后Tiam1蛋白含量。结果:1.免疫组化结果示:不同病理类型的鼻咽癌组织中Tiam1表达(36/57 63.2%)高于鼻咽黏膜慢性炎症组织(1/9 10%)(P0.05);Tiam1阳性表达率与性别、年龄无相关性,所选病例中分期越晚,病理类型分化程度越低,Tiam1蛋白表达率越高,且所有存在远处转移的病例均高表达Tiam1蛋白(P0.05);2.CCK-8实验结果示姜黄素能体外抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,随着姜黄素药物浓度增加,作用时间延长,实验组中5-8F细胞抑制越显著,5-8F细胞增殖与姜黄素作用存在浓度和时间依赖性;3.划痕实验及Transwell实验结果说明,实验组细胞药物处理24h后,迁移距离及穿膜细胞数明显低于空白对照组,姜黄素可体外抑制5-8F细胞的迁移及侵袭能力(P0.05);4.Western blot法检测不同浓度姜黄素处理5-8F细胞24小时后Tiam1蛋白变化,结果示空白组Tiam1蛋白表达含量明显高于实验组,在实验组中,20μmol/L组蛋白表达量最高,100μmol/L组Tiam1蛋白表达量低于60、20μmol/L组(P0.05)。结论:1.Tiam1蛋白在鼻咽癌组织中表达高于鼻咽黏膜慢性炎症组织,Tiam1表达与患者T分期、组织分化程度、淋巴结远处转移存在相关性;2.姜黄素可能通过抑制Tiam1蛋白表达,降低5-8F细胞增殖、侵袭与转移能力。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.63

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本文编号：1307782