GOLPH2的糖基化修饰对于其参与肝癌发生的影响

发布时间：2017-12-25 04:11

  本文关键词：GOLPH2的糖基化修饰对于其参与肝癌发生的影响　出处：《安徽医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:本研究通过转染GOLPH2及其糖基化缺失的重组质粒进入肝癌细胞HepG2,进行体外功能学研究(细胞生长与细胞周期),探索GOLPH2的糖基化修饰对肝癌细胞的炎症通路及胆固醇代谢通路的影响,从而揭示GOLPH2的糖基化修饰对于其功能发挥的影响。方法:构建GOLPH2的109、144位糖基化位点双突变质粒,并命名为pcDNA3-Flag-GOLPH2(DM),用脂质体分别转染GOLPH2 WT(野生型GOLPH2重组质粒)或者DM到肝癌细胞HepG2中,进行细胞生长与细胞周期实验、NF-κB报告基因实验、炎症小体及脂筏的免疫荧光染色实验。结果:细胞生长与细胞周期实验表明,与野生型GOLPH2相比,糖基化位点突变GOLPH2会使细胞生长与细胞周期减慢。双荧光素酶报告基因实验结果表明,野生型GOLPH2能够激活HepG2细胞中NF-κB的转录活性,而双糖基化位点突变会使GOLPH2失去此激活作用。免疫荧光实验检测发现野生型GOLPH2促使肝癌细胞HepG2的炎症小体和脂筏累积,双糖基化位点突变的GOLPH2则丧失此功能。结论:糖基化修饰对GOLPH2促进肝癌细胞HepG2的生长是必须的;糖基化修饰对GOLPH2激活肝癌细胞HepG2的炎症通路是必须的;糖基化修饰对GOLPH2诱导肝癌细胞HepG2内脂筏累积(胆固醇代谢)是必须的;GOLPH2的糖基化修饰对于其功能发挥不可或缺。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

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本文编号：1331284