以埃克替尼为代表的靶向药联合化疗药物对人肺腺癌细胞株的作用研究

发布时间：2017-12-25 22:31

本文关键词：以埃克替尼为代表的靶向药联合化疗药物对人肺腺癌细胞株的作用研究　出处：《中国人民解放军医学院》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：本研究以人肺腺癌EGFR野生型GLC-82细胞和EGFR突变型PC-9细胞为研究对象,选择EGFR-TKI代表药物盐酸埃克替尼与化疗药(多西他赛／培美曲塞)联合,通过体外细胞实验,分别观察埃克替尼与多西他赛、培美曲塞单药及其不同联合方式对细胞增殖的抑制作用,旨在为临床治疗中靶向药物与化疗药物的合理联合提供一定的实验依据。方法：(1)运用RTCA xCELLigence系统分别检测盐酸埃克替尼、多西他赛、培美曲塞单药对GLC-82和PC-9细胞的增值抑制作用,并检测药物在细胞内的作用稳定时间,运用RTCA xCELLigence系统拟合每种药物在细胞内作用稳定时间内的IC50。(2)采用流式细胞术检测埃克替尼与多西他赛／培美曲塞不同方式联合用药后各组细胞周期的分布。(3)运用RTCA xCELLigence系统检测埃克替尼与多西他赛或培美曲塞联合用药时GLC-82细胞的细胞指数CI,并计算其倍增时间。(4)采用流式细胞术检测联合用药对PC-9细胞凋亡率的影响。结果：(1)多西他赛、培美曲塞作用于细胞36h后达到平衡期,而埃克替尼作用于细胞60h后达到平衡期。(2)多西他赛作用于GLC-82细胞系36h的IC50为25mg·mL-1,培美曲塞作用于GLC-82细胞系36h的IC50为560μM,埃克替尼作用于GLC-82细胞系60h的IC50为10μM；多西他赛对PC-9细胞作用36h后的IC50为21.5mg·mL-1,培美曲塞对PC-9细胞作用36h后的IC50为30μM,埃克替尼对PC-9细胞作用60h后的IC50值为5.3μM。 (3)流式细胞仪进行周期检测显示单药埃克替尼作用于细胞后,Go/G1期细胞比例较高,单药多西他赛作用于细胞后,G2/M期细胞比例较高,而单药培美曲塞可将细胞阻滞于S期；埃克替尼先于或同时与化疗药(多西他赛或培美曲塞)联用组Go/G1期细胞较多。(4)先用多西他赛或培美曲塞后用埃克替尼方案与其他用药方案相比,细胞倍增时间显著增加(DTX-ICO组倍增时间为：-829.1±46.9h：PEM-ICO组倍增时间为：-342±3.4h),与其他序贯联合方式相比,细胞增殖抑制效果更好,差异有统计学意义(P0.05)。(5)AnnexinV-FITC凋亡实验观察到先用多西他赛组细胞凋亡率为(23±0.2)%,高于先用埃克替尼组(10.2±0.1)%和两药同时用药组(15.8±0.4)%;先用培美曲塞组细胞凋亡率为(36.3±0.03)%,高于先用埃克替尼组(14.7±0.1)%和两药同时用药组(30.6±0.03)%,差异有统计学意义(P0.05)。化疗药先于埃克替尼应用对细胞的体外杀伤作用均明显高于其他各组。结论：多西他赛／培美曲塞先于埃克替尼用药,并且选择合理的用药时机,对肿瘤细胞杀伤作用较后于埃克替尼应用或者同时应用效果好。
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2

【参考文献】