TIPE2通过负性调控β-catenin信号抑制胃癌细胞迁移、侵袭的作用

发布时间：2018-01-13 00:08

  本文关键词：TIPE2通过负性调控β-catenin信号抑制胃癌细胞迁移、侵袭的作用　出处：《苏州大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:研究肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TNFAIP8L2)(TIPE2)是否可以通过下调β-catenin信号抑制胃癌细胞的迁移、侵袭。方法:将本室构建的GFP标记的Ad VTIPE2及其空对照Ad V腺病毒在293人胚肾细胞中扩增后,用氯化铯(Cs Cl)密度梯度超速离心纯化,并用有限稀释法根据293细胞GFP的表达进行腺病毒滴度测定。然后将Ad VTIPE2、对照空病毒Ad V用筛选的腺病毒最佳感染剂量10MOI分别感染AGS(野生型p53)、HGC-27(突变型p53)两种人胃癌细胞株,获得AGS-Ad VTIPE2(简写为AGS-TIPE2)vs AGS-Ad V(简写为AGS-Mock);HGC-27-Ad VTIPE2(简写为HGC-27-TIPE2)vs HGC-27-Ad V(简写为HGC-27-Mock)。运用RT-PCR、Western blot方法检测腺病毒介导的TIPE2基因在AGS、HGC-27胃癌细胞中的表达。采用划痕实验、Transwell侵袭实验检测腺病毒介导的TIPE2过表达对AGS、HGC-27胃癌细胞体外迁移、侵袭的作用,并利用Western blot方法检测TIPE2对胃癌细胞AKT-GSK3β-β-catenin轴相关蛋白包括p-AKT、AKT、p-GSK3β、GSK3β、β-catenin表达的影响,及进一步用免疫荧光激光共聚焦手段分析TIPE2对胃癌细胞β-catenin的影响。结果:1)获得了高滴度的Ad VTIPE2及其对照空病毒Ad V,其效价分别可达6.3X1010、1.2X1011 Tu/ml;2)腺病毒介导的TIPE2过表达能明显抑制AGS、HGC-27人胃癌细胞的迁移(AGS-TIPE2较AGS-Mock的相对迁移能力为64.8%;HGC-27-TIPE2较HGC-27-Mock的相对迁移能力为78.6%)、侵袭能力(AGS-TIPE2较AGS-Mock的相对侵袭能力为52.7%;HGC-27-TIPE2较HGC-27-Mock的相对侵袭能力为69.0%);3)TIPE2能够下调胃癌细胞p-AKT、p-GSK3β、β-catenin的水平及抑制β-catenin从胞浆进入细胞核、下调β-catenin的细胞核水平。结论:TIPE2能够通过调控AKT-GSK3β-β-catenin轴下调β-catenin信号抑制胃癌转移。
[Abstract]:AIM : To study whether the tumor necrosis factor - induced protein 8 - like protein 2 ( TNFAIP8L2 ) ( TI2 ) can inhibit the migration and invasion of gastric cancer cells by downregulating the 尾 - catenin signal . Conclusion : TI2 can regulate the 尾 - catenin signal to inhibit the metastasis of gastric cancer by regulating the 尾 - catenin axis of T - GSK3 尾 - catenin .

【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2

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