RegⅣ基因对胰腺癌增殖和侵袭影响的作用机制研究

发布时间：2018-02-06 00:31

  本文关键词： RegⅣ基因 胰腺癌 增殖 侵袭　出处：《安徽医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的 研究RegⅣ基因对胰腺癌细胞生物学行为的影响,探讨RegⅣ对胰腺癌细胞增殖、侵袭作用机制。方法(1)利用shRNA慢病毒转染胰腺癌PANC-1细胞得到低表达RegⅣ基因的PANC-1细胞,以及利用过表达质粒转染胰腺癌细胞BxPC-3获得高表达RegⅣ基因的BxPC-3细胞；(2)实时荧光定量PCR(Real Time PCR)及蛋白免疫印迹分析(Western Blot)检测shRNA慢病毒及过表达质粒转染效率；(3)CCK-8法检测转染shRNA慢病毒及过表达质粒后各组细胞的增殖能力的改变；(4)利用划痕实验检测转染shRNA慢病毒及过表达质粒后各组细胞的迁移能力的变化；(5)利用Transwell侵袭实验检测转染shRNA慢病毒及过表达质粒后各组细胞侵袭能力的变化；(6)Western Blot法检测上调RegⅣ基因后的胰腺癌细胞BxPC-3中蛋白表达水平的变化情况；(7)裸鼠皮下成瘤实验观察下调RegⅣ基因后的胰腺癌细胞PANC-1在裸鼠体内的生长情况。结果(1)转染shRNA慢病毒后胰腺癌细胞PANC-1中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表达均明显下降,转染过表达质粒后胰腺癌细胞BxPC-3中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表达均明显上升；(2)CCK-8检测细胞增殖能力发现,下调RegⅣ后PANC-1细胞较对照组PACN-1细胞增殖能力明显下降,上调RegⅣ后BxPC-3细胞较对照组BxPC-3细胞增殖能力明显提升；(3)划痕实验显示,下调RegⅣ后的胰腺癌细胞PANC-1迁移能力较对照组PACN-1细胞显著下降,上调RegⅣ后的胰腺癌细胞BxPC-3迁移能力较对照组BxPC-3细胞显著增加；(4)Transwell侵袭实验结果提示:下调RegⅣ后的胰腺癌细胞PANC-1侵袭能力较对照组PANC-1细胞显著下降,上调RegⅣ后的胰腺癌细胞BxPC-3侵袭能力较对照组BxPC-3细胞显著增加；(5)Western Blot结果显示:在胰腺癌细胞BxPC-3中,上调RegⅣ基因的表达水平后,E-cadherin的表达水平显著下降,促进胰腺癌细胞上皮细胞间皮化转化(EMT)；(6)裸鼠皮下成瘤实验显示,下调RegⅣ基因后的胰腺癌细胞株PANC-1所形成的肿瘤在裸鼠体内生长速度较对照组细胞所形成的肿瘤生长速度显著减缓。结论 在胰腺癌细胞BxPC-3中上调RegⅣ基因的表达可增加胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,并可下调胰腺癌细胞BxPC-3内E-cadherin蛋白的表达水平,促进上皮细胞间皮化；在胰腺癌细胞PANC-1中下调RegⅣ基因的表达可降低胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,并可减慢肿瘤在裸鼠体内的生长速度。因此,RegⅣ基因在胰腺癌中具有促进增殖、迁移和侵袭的作用,并有促进EMT的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of Reg 鈪，

本文编号：1493147