阿帕替尼抑制白血病细胞株Nalm6增殖及诱导凋亡的实验研究

发布时间：2018-03-01 20:24

  本文关键词： Apatinib Nalm细胞 细胞凋亡 Bcl-、Bcl-xl、PARP蛋白　出处：《中华肿瘤防治杂志》2017年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的阿帕替尼(Apatinib)为新一代小分子血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)酪氨酸激酶抑制剂,对多种实体肿瘤细胞有杀伤作用。本研究探讨Apatinib对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞株Nalm6增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法 CCK8法检测不同浓度Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制作用,Annexin V/PI法检测不同浓度Apatinib诱导Nalm6细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法法检测Apatinib处理后Bcl-2、Bcl-xL和PARP蛋白的表达变化。结果 CCK-8细胞毒性实验结果显示,Apatinib对Nalm6细胞具有明显的增殖抑制作用,呈剂量及时间依赖性,作用48h后,2.5、5、10、20和40μmol/L的Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制率分别为(3.78±1.01)%、(13.36±1.42)%、(25.80±2.83)%、(44.40±7.74)%和(64.07±6.66)%,经多个独立样本非参数检验Kruskal-Wallis H分析,各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组(3.61±0.91)%比较差异有统计学意义,χ~2=13.500,P=0.009;作用72h后,2.5、5、10、20和40μmol/L的Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制率分别为(4.57+2.38)%、(20.26+4.06)%、(39.27±1.57)%、(65.19±4.45)%和(85.54±3.37)%,经检验各浓度的Apatinib均能抑制Nalm6细胞增殖,与对照组比较差异有统计学意义,χ~2=13.500,P=0.009。48和72h的IC50分别为(24.39±0.05)和(13.18±0.08)μmol/L。凋亡实验显示,Apatinib能增加Nalm6细胞凋亡率,并呈剂量依赖性,作用48h后,对照组和10、20、30、40μmol/L Apatinib组对Nalm6细胞的凋亡率分别为(3.61±0.91)%、(5.28±1.29)%、(5.9±0.85)%、(10.18±1.48)%和(15.23±3.69)%,经检验各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义,χ~2=12.433,P=0.014;作用72h后,对照组和10、20、30、40μmol/L Apatinib组对Nalm6细胞的凋亡率分别为(3.8±1.10)%、(5.33±2.08)%、(10.10±2.86)%、(12.15±1.43)%和(25.61±3.63)%,经检验各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义,χ~2=12.233,P=0.016。蛋白质印迹法结果显示,Apatinib作用Nalm6细胞24、48h后均能下调Bcl-2和Bcl-xl的表达,切割PARP蛋白。结论 Apatinib能抑制Nalm6细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和Bcl-xl有关。
[Abstract]:Objective Apatinib is a new type of small molecule vascular endothelial growth factor receptor-2 endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2) tyrosine kinase inhibitor. The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of Apatinib on the proliferation and apoptosis of acute lymphoblastic leukemia (ALL) cell line Nalm6. Methods CCK8 assay was used to detect the proliferation of Nalm6 cells with different concentrations of Apatinib. The apoptosis of Nalm6 cells induced by different concentrations of Apatinib was detected by Annexin V / Pi assay. Results the results of CCK-8 cytotoxicity test showed that Apatinib could inhibit the proliferation of Nalm6 cells in a dose-and time-dependent manner. After 48 hours of treatment, the inhibitory rates of Apatinib of 2.5 渭 mol/L and 40 渭 mol/L on the proliferation of Nalm6 cells were 3.78 卤1.01g / L and 13.36 卤1.42%, respectively, and 44.40 卤7.74% and 64.07 卤6.66%, respectively. Apatinib of different concentrations could induce the apoptosis of Nalm6 cells. There was a significant difference between the control group and the control group (3.61 卤0.91%), 蠂 ~ (2 +) ~ (13. 500) (P ~ (0.009)); after 72 hours of treatment, the inhibitory rates of Apatinib of 2.5U ~ (5) and 40 渭 mol/L on the proliferation of Nalm6 cells were 4.57 2.38 ~ (20.26) 4.06 ~ (-1) and (39.27 卤1.57) 卤4.45% and (85.54 卤3.37)%, respectively. The proliferation of Nalm6 cells was inhibited by Apatinib at all concentrations. Compared with the control group, there was a significant difference in IC50 between the two groups. The IC50 at 0.009.48 and 72 h were 24.39 卤0.05 渭 mol / L and 13.18 卤0.08 渭 mol / L, respectively. Apoptosis assay showed that Apatinib could increase the apoptosis rate of Nalm6 cells in a dose-dependent manner. The apoptotic rates of Nalm6 cells in the control group and 1020m 3040 渭 mol/L Apatinib group were 3.61 卤0.91 and 5.28 卤1.29, respectively. The apoptotic rates of Nalm6 cells in the control group and the Apatinib group were 10.18 卤1.48% and 15.23 卤3.69%, respectively. After 72 hours, the apoptosis of Nalm6 cells was significantly different from that of the control group. The apoptotic rates of Nalm6 cells in the control group and the 1020 + 3040 渭 mol/L Apatinib group were 3.8 卤1.10 and 5.33 卤2.08, respectively, and 10.10 卤2.86% and 25.61 卤3.63%, respectively, in the control group and 30 渭 mol/L Apatinib group. The apoptosis of Nalm6 cells was induced by different concentrations of Apatinib. The results of Western blotting showed that Apatinib could down-regulate the expression of Bcl-2 and Bcl-xl and cut PARP protein in Nalm6 cells after 24 h. Conclusion Apatinib can inhibit the proliferation of Nalm6 cells and induce their apoptosis. The mechanism may be related to down-regulation of Bcl-2 and Bcl-xl.
【作者单位】： 南方医科大学南方医院血液科;厦门大学附属第一医院血液科;
【基金】：国家自然科学基金(81570156) 广东省重大研究专项(2015B020227003)
【分类号】：R733.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 欧阳高亮,李祺福,洪水根;细胞凋亡与肿瘤的发生发展和治疗[J];国外医学(肿瘤学分册);2000年05期

2 方成,陈钧辉;细胞凋亡与癌症治疗[J];中国生化药物杂志;2000年06期

3 任泽舫,庄志雄;聚腺苷二磷酸核糖聚合酶、细胞凋亡与肿瘤[J];肿瘤防治研究;2000年03期

4 王枫,李泊,杨宝平,于芳;预热诱导K_(562)细胞热应激蛋白70高表达对高温引起细胞凋亡的影响[J];卫生研究;2001年02期

5 迟万好,曹明富,朱睦元;茶多酚诱导肿瘤细胞凋亡的作用[J];杭州师范学院学报(自然科学版);2001年04期

6 许川山,余茜,吴士明,唐建民;高温治癌与细胞凋亡[J];中华理疗杂志;2001年03期

7 张星海,郭碧花,杨贤强;茶多酚诱导肿瘤细胞凋亡及机理探讨[J];福建茶叶;2003年01期

8 党琦;细胞凋亡与恶性肿瘤[J];实用医药杂志;2004年03期

9 柯为;利用细胞凋亡原理治疗癌症[J];生物工程学报;2004年04期

10 邓良超;细胞凋亡与恶性肿瘤[J];世界最新医学信息文摘;2004年02期

相关会议论文 前10条

1 季宇彬;尹立;汲晨锋;;调控细胞凋亡的线粒体因素[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

2 姚根宏;侯亚义;姜波;孙凌云;;重组人肿瘤坏死因子相关凋亡受体诱导Jurkat细胞凋亡的研究[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年

3 宋小莲;白冲;彭瑞云;王水明;高亚兵;;微波辐射对肺癌A549细胞凋亡的影响[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年

4 刘萍;陈英;张鹏;;细胞凋亡和肿瘤与疾病的关系[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 韦红梅;朱俊东;;过氧化物酶体增殖物激活受体γ与肿瘤细胞凋亡的研究进展[A];重庆市营养学会学术会议论文汇编[C];2010年

6 孙国平;;抗癌中药诱导细胞凋亡的研究进展[A];“安徽公共卫生体系建设”——首届安徽博士科技论坛论文集[C];2003年

7 马秋玲;沈佳坤;杨敏;王蕾;金洁;;4-氯苯甲酰小檗胺诱导急性淋巴细胞白血病细胞凋亡及其作用机制的研究[A];2011年浙江省血液病学术年会暨浙江省医学会血液病学分会成立50周年庆典论文汇编[C];2011年

8 季宇彬;刘洪娟;汲晨锋;;死亡受体介导细胞凋亡的研究进展[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

9 马秋玲;沈佳坤;杨敏;王蕾;金洁;;4-氯苯甲酰小檗胺诱导急性淋巴细胞白血病细胞凋亡及其作用机制的研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年

10 曹明富;;表没食子儿茶素没食子酸酯诱导肿瘤细胞凋亡效应[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（下）[C];2003年

相关重要报纸文章 前8条

1 本报实习记者 梁媛媛;薛定：发现癌症“开关”[N];北京科技报;2010年

2 高书明;诱导癌细胞凋亡[N];中国医药报;2004年

3 勇汇;中药诱导癌细胞凋亡研究进展[N];中国医药报;2002年

4 陶春祥；陶钧;中药诱导肿瘤细胞凋亡机理[N];中国医药报;2004年

5 董欢霁;抑癌基因p53：助长癌魔气焰？[N];医药经济报;2007年

6 冯卫东;一种蛋白质能够控制细胞自杀[N];科技日报;2009年

7 陶春祥；何占德;中药抗肿瘤侵袭转移的研究[N];中国医药报;2004年

8 冯立中 陶文娟;维生素D3能诱导肿瘤细胞凋亡[N];健康报;2005年

相关博士学位论文 前10条

1 孙健玮;PTEN基因负调控Raf1磷酸化的作用及其对PC3细胞凋亡的影响[D];昆明医科大学;2014年

2 徐林艳;肿瘤细胞凋亡过程中TNFRSF10B和CFLAR调控机制研究[D];山东大学;2015年

3 洪鸣;TIGAR基因在急性毮细胞白血病中的作用机制研究[D];南京医科大学;2013年

4 刘小红;姜黄素通过ATP敏感性钾通道抑制胃癌细胞增殖的机制研究[D];兰州大学;2016年

5 林长明;TRPM7对前列腺癌PC-3细胞凋亡的调控及其作用机制研究[D];安徽医科大学;2015年

6 陈恋;抑制谷氨酰胺代谢对顺铂或依托泊苷诱导肿瘤细胞凋亡的影响及其机理[D];四川农业大学;2016年

7 顾莲芝;肌球蛋白轻链激酶抑制剂在体内及体外诱导细胞凋亡的研究[D];吉林大学;2004年

8 陈芳芳;白血病细胞凋亡相关基因的鉴定及其作用研究[D];吉林大学;2010年

9 王述民;三氧化二砷诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制的实验研究[D];第四军医大学;2000年

10 冯珊珊;RIP3诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究[D];中国科学技术大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 杨翔;Procaspase-8的异常表达抑制TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡[D];昆明理工大学;2015年

2 张昌明;I3C通过调控p53泛素化对喉癌Hep-2细胞凋亡的影响[D];延边大学;2015年

3 王怡;地西他滨对Jurkat细胞增殖、凋亡及TAL1基因表达的影响[D];郑州大学;2015年

4 范丽丽;外源性一氧化氮诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用[D];宁夏医科大学;2015年

5 位亚静;全反式维甲酸诱导荷瘤裸鼠A549肺腺癌细胞凋亡的机制[D];郑州大学;2015年

6 郭长安;锰超氧化物歧化酶模拟化合物抗急性单核细胞白血病的体内外实验研究[D];宁夏医科大学;2015年

7 江巧玲;高糖经内质网应激诱导肝细胞凋亡及其分子机制[D];安徽医科大学;2015年

8 曲奎尧;用siRNA脂质体行Survivin和VEGF双把点基因下调可增强U251细胞凋亡[D];中国人民解放军医学院;2015年

9 付正卿;石墨烯—二氧化钛复合物生物毒性研究[D];山西医科大学;2015年

10 刘娇;Anti-EGFR耦联中空金纳米球对人宫颈癌细胞放射敏感性影响的研究[D];山东大学;2015年

，

本文编号：1553442