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上调microRNA-214表达对肺癌细胞凋亡及耐药性的影响

发布时间:2018-03-02 03:23

  本文关键词: 小分子核糖核酸- 肺癌 凋亡 多药耐药性 出处:《东南大学学报(医学版)》2017年05期  论文类型:期刊论文


【摘要】:目的:探究microRNA-214过表达是否可以通过调节凋亡过程影响肺癌细胞的多药耐药性。方法:选择2种不同的人小细胞肺癌细胞株和人非小细胞肺癌细胞株作为实验组,分别是H69细胞实验组和H446细胞实验组;A549细胞实验组和H1299细胞组;选择正常人肺上皮细胞(BEAs-2B)作为对照组。Real-time PCR法进行检测肺癌细胞株内miR-214的表达量。上调miR-214表达后给予不同的抗肿瘤药物刺激,并MTT比色法检测肺癌细胞株对药物的敏感性;CCK-8法检测细胞存活率和TUNEL法流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测肺癌细胞株中Bcl-2和p53的蛋白表达水平。结果:Real-time PCR法检测结果发现,实验组细胞中miR-214表达量明显低于对照组BEAs-2B,差异有统计学意义(P0.05);CCK-8结果显示,上调miR-214表达后肺癌细胞的存活率显著降低,差异有统计学意义(P0.05);MTT法结果显示,上调miR-214表达后肺癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性显著降低(P0.05);Western blot结果表明,上调miR-214基因表达后肺癌细胞Bcl-2和p53蛋白的异常表达,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);结论:上调miR-214表达能够显著降低肺癌细胞的存活率并加速凋亡的发生;同时miR-214过表达可以调控凋亡蛋白并降低肺癌细胞对药物的敏感性。
[Abstract]:Objective: To explore whether overexpression of microRNA-214 can be regulated by multidrug resistance lung cancer cell apoptosis. Methods: 2 kinds of human small cell lung cancer cell lines and human non-small cell lung cancer cell line as the experimental group, the experimental group and the cells are H69 H446 cells in the experimental group; the experimental group of A549 cells and H1299 cells group; normal human lung epithelial cells (BEAs-2B) as the control group.Real-time PCR method was used to detect the expression of miR-214 in lung cancer cell lines. The upregulation of the expression of miR-214 after treated with different antitumor drug stimulation, and MTT assay detected the drug sensitivity of lung cancer cell lines; cell viability was examined by CCK-8 assay and TUNEL method cell apoptosis was detected by flow cytometry; the expression level of Bcl-2 and p53 in the detection of lung cancer cell line Western by blot protein. Results: the testing results of Real-time PCR showed that the miR-214 cells in the experimental group. The expression of BEAs-2B was significantly lower than the control group, the difference was statistically significant (P0.05); CCK-8 results showed that the upregulation of the expression of miR-214 after lung cancer cell survival rate decreased significantly, the difference was statistically significant (P0.05); MTT assay showed that the upregulation of the expression of miR-214 after the sensitivity of lung cancer cells to antitumor drugs decreased significantly (P0.05); Western the results of blot showed that the up regulation of miR-214 gene expression of Bcl-2 and p53 protein in lung cancer cells, compared with the control group the difference was statistically significant (P0.05); conclusion: overexpression of miR-214 can significantly reduce the survival rate of lung cancer cells and accelerate apoptosis; while overexpression of miR-214 can regulate apoptosis protein and reduce the sensitivity of lung cancer cells for the drugs.

【作者单位】: 武汉市普仁医院呼吸内科;
【分类号】:R734.2

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