白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究

发布时间：2016-10-27 20:28

  本文关键词：白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究，由笔耕文化传播整理发布。

《湖北中医药大学》 2013年

白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究

杭佳  

【摘要】：恶性肿瘤是目前危害人类健康和生命的最严重疾病之一。目前临床用于治疗肿瘤的药物多为化学合成药，其毒副作用强和产生耐药性等问题严重影响临床疗效。因此，从中药、天然药物中发掘高效、低毒的新抗肿瘤药物，成为药物研究工作者关注的热点。 中药白蔹为葡萄科蛇葡萄属植物白蔹（Ampelopsis japonic（Thumb.）Makino）的干燥块根，其味苦、辛，微寒，具有清热解毒、消痈散结、敛疮生肌等功效，用于疔疮，痈疽发背，瘰疬，烧烫伤等疾病的治疗。现代药理研究表明该药具有抗菌、免疫调节及抗肿瘤等作用，本实验室前期研究已经证实白蔹有较好的抗肿瘤作用。历代本草记载白蔹无毒，本实验室对白蔹不同组分的小鼠急性毒性实验结果亦显示其安全性高。因此，白蔹是一种值得关注的潜在低毒抗肿瘤中药。本研究采用生物活性指导下的有效成分分离方法，研究了白蔹抗肿瘤活性部位的化学成分，并对药材进行了质量标准提高研究，为抗肿瘤中药新药开发及完善白蔹药材质量标准提供了科学依据。本文主要完成了以下工作： 1、采用MTT法，选择前期研究筛选出的敏感细胞株人肝癌细胞株HepG2细胞，对白蔹醇提物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶液部位进行体外抗肿瘤活性筛选。实验结果表明，白蔹乙醇提取物萃取部位中抑制肿瘤活性最强的为乙酸乙酯部位，石油醚及正丁醇部位也同样具有一定的抗肿瘤作用。 2、采用硅胶柱层析，依次用四种不同极性的溶剂（石油醚、乙醚、乙酸乙酯、甲醇）作为洗脱剂对抗肿瘤活性部位进行粗分离，得到四个极性不同组分。活性筛选结果显示，乙醚和乙酸乙酯部分的抗肿瘤活性较其它两个部分更好，其中，乙醚部分抗肿瘤活性最佳。 3、利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶（LH-20型）柱色谱、制备型HPLC等色谱分离技术，以抗肿瘤活性筛选试验结果为依据，从乙醚和乙酸乙酯洗脱组分物质中共分离出9种单体成分（化合物1-9）。通过1H-NMR、13C-NMR、H-HCOSY、C-H HMBC、MS等现代波谱方法分析其结构，鉴定了其中的6个化合物，，分别为：β-谷甾醇（化合物1，β-sitosterol）、齐墩果酸（化合物2，oleanolic acid）、没食子酸（化合物3，gallic acid）、白藜芦醇（化合物4，resveratrol)、儿茶素(化合物5，Cianidanol)、表儿茶素（化合物6，epicatechin）。 4、采用MTT法，对分离得到的儿茶素（化合物5）、表儿茶素（化合物6）、化合物7进行抗肿瘤活性筛选。结果显示化合物7具有较好的抗肿瘤活性，在24、48、72h小时的IC50分别为46.98mg·L~(-1)、57.79mg·L~(-1)、24.87mg·L~(-1)。结合前期的研究结果，白蔹抗肿瘤的活性成分主要有没食子酸、白藜芦醇、齐墩果酸及化合物7。 5、建立了高效液相色谱波长切换法同时测定白蔹中没食子酸、原儿茶醛、儿茶素、白藜芦醇4种成分含量的方法。方法简便快速、灵敏度高、重现性好，可用于白蔹的质量控制，为完善其质量标准提供了科学依据。

【关键词】：
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R284.2
【目录】：

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【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郭丽冰,卢雁,陈水平;白蔹化学成分的研究[J];广东药学院学报;1996年03期

2 俞琦,蔡琨,田维毅;白蔹醇提物免疫活性的初步研究[J];贵阳中医学院学报;2005年02期

3 郑国灿,李智英;丹参酮Ⅰ对HepG2细胞抑制作用的体外实验研究[J];现代医学;2004年05期

4 汪红,王强,余国奠;近十年抗肿瘤中药的研究进展[J];中国野生植物资源;2000年03期

5 俞文胜,陈新民,杨磊;白蔹多酚类化学成分的研究(Ⅱ)[J];中药材;1995年06期

6 曾艳兵,张妮娜,卜平;中药对恶性肿瘤细胞信号转导通路的影响及其作用机理研究的进展[J];中国中西医结合杂志;2004年07期

7 丰俊东,徐晓玉;肿瘤细胞多药耐药性与中药的逆转作用[J];中国中药杂志;2004年09期

8 陈业高,张燕;以DNA为作用靶追踪分离天然植物药活性成分[J];中国现代应用药学;2002年01期

9 胡志全,郭辉,谌科,王志华,余建华,叶章群;姜黄素诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞周期阻滞和凋亡研究[J];中华实验外科杂志;2005年10期

10 齐春会,付艳荣,张永祥,聂伟,赖春宁,徐海,乔善义,沈倍奋;六味地黄多糖CA4-3对小鼠B细胞功能的作用[J];中国药理学通报;2001年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈衍智;李萍萍;;中医药在癌性疼痛治疗中的作用及应用[J];中医药临床杂志;2005年06期

2 何朝勇,王立为;多糖的免疫调节作用综述[J];安徽中医学院学报;2002年04期

3 叶菁;陈培丰;;中药及其提取物抑制肿瘤血管生成的研究进展[J];浙江中医药大学学报;2007年04期

4 李晓东;陆松敏;史成和;徐华彪;刘建仓;龙在云;李萍;;Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞保护作用的实验研究[J];创伤外科杂志;2006年02期

5 付玉荣;邱宗荫;颜玉蓉;;羟基喜树碱通过线粒体途径诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的观察[J];第四军医大学学报;2006年15期

6 张慧芳;张煦;范临兰;;鬼臼毒衍生物诱导人肺腺癌A549细胞凋亡[J];第四军医大学学报;2006年16期

7 李斌;体外三维抗血管生成药物筛选模型的建立[J];第一军医大学学报;2004年10期

8 郑剑霄;周同冲;徐凯;李柳宁;;石上柏联合放疗治疗鼻咽癌临床观察[J];南方医科大学学报;2006年02期

9 张芷旋;周清华;;中药抗肺癌血管生成药物的研究进展[J];中国肺癌杂志;2006年01期

10 王阳,王伯初,周菁,彭亮;多糖的免疫调节功能研究进展[J];重庆大学学报(自然科学版);2004年03期

中国重要会议论文全文数据库 前9条

1 刘颖;金宏;程义勇;;多糖生物活性及其作用机制研究进展[A];食物功效成分与健康——达能营养中心第九次学术年会会议论文集[C];2006年

2 宋圃菊;;营养与免疫[A];儿童营养与健康学术研讨会论文汇编[C];2005年

3 张勇;周阿高;孔德云;张惠珍;王树军;李伟毅;葛海良;蒉纲;任秋华;毛旭明;;中药攻毒方对H22肝癌小鼠抑瘤及免疫调节的机理研究[A];第三届全国中医药免疫学术研讨会论文汇编[C];2006年

4 王瑞平;薛维伟;;中药抗肿瘤血管生成研究近况[A];肿瘤药物及肿瘤传统医学治疗研究[C];2005年

5 郑昱;孙婧;禹立霞;刘宝瑞;;两种提取方法对14种中药体外抗胃癌效果的比较[A];江苏省抗癌协会化疗专业委员会第六届年会、中日肿瘤治疗研讨会暨第二届全国肿瘤化疗进展学习班论文汇编[C];2006年

6 张国红;游冰;曹雨辰;胡礼贵;华旭;王燕;许雁峰;;复方中药制剂蒲黄注射液及其对奶牛隐性乳房炎的治疗研究[A];中国奶牛协会2007年会论文集（上册）[C];2007年

7 董立;战光绪;黄波;吴大正;;金复康对DMH(二甲肼)诱导的大鼠结肠腺癌癌前病变的抑制作用[A];山东省药学会第一届学术年会论文集（上）[C];2005年

8 班立丽;黄健;张慧;罗敏;杨兵兵;韩宏升;李玛琳;;毛萼乙素抑制人正常及肝癌血管生成作用的实验研究[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年

9 丁钢强;;中药和植物提取物抗肿瘤作用的研究进展[A];浙江省“营养、食品与健康”研讨会资料汇编[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 阚建全;甘薯糖蛋白的糖链结构与保健功能研究[D];西南农业大学;2003年

2 尹英杰;六味地黄丸（汤）异病同治规律的理论与临床研究[D];北京中医药大学;2003年

3 张文丽;大肠癌线粒体氧化损伤及mtDNA突变的研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年

4 于静;类风湿关节炎"证"的演变规律及养血活血方部分作用机理的实验研究[D];北京中医药大学;2003年

5 李思成;“墓头回”活性成份抑制肿瘤血管生成的实验研究[D];成都中医药大学;2003年

6 李俊莲;大黄（庶虫）虫丸对小鼠免疫调节作用及其机理的实验研究[D];湖北中医学院;2004年

7 孙英;北京地区地表水环境激素污染现状与环境风险性评价[D];中国农业大学;2004年

8 杨志宏;超声波对人卵巢癌细胞COC1抑制作用及机制研究[D];重庆医科大学;2004年

9 林成招;大豆异黄酮植物雌激素对大鼠乳腺癌细胞和小肠上皮细胞生长的影响及其机理研究[D];南京农业大学;2004年

10 何桂霞;藤茶活性成分的分离鉴定及药理作用研究[D];湖南农业大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 林曦;玫瑰茄皂甙的分离纯化与结构表征研究[D];福建师范大学;2003年

2 彭艳芳;枣果营养成分分析与冬枣货架期保鲜研究[D];河北农业大学;2003年

3 张琼光;异叶蛇葡萄的化学成分研究[D];湖北中医学院;2003年

4 杜永红;健脾除湿法（治带方）治疗细菌性阴道病临床研究[D];天津中医学院;2003年

5 司红丽;狗舌草总黄酮的提取及抗肿瘤作用研究[D];西北农林科技大学;2003年

6 谢慧;五龙颗粒对脾气虚型变应性鼻炎大鼠的作用[D];成都中医药大学;2003年

7 韩晓伟;定喘汤雾化吸入对哮喘豚鼠呼吸道微生态影响的实验研究[D];辽宁中医学院;2003年

8 孙成法;雷公藤红素抑制血管内皮细胞体外增殖与血管生成机理的实验研究[D];苏州大学;2003年

9 樊讯;麝黄消瘤方抑制H22小鼠肝癌血管生成和抗转移作用的实验研究[D];湖北中医学院;2004年

10 徐淑永;逍遥散方剂中水溶性多糖研究[D];华南师范大学;2004年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈功,万德森,潘志忠,周志伟,陈映波,丁惠芳,王玲燕,刘奕龙,邓芳;广州市结肠癌危险因素的病例对照研究[J];癌症;2001年10期

2 杨晓葵,郑芳,陈建华,高庆蕾,卢运萍,王世宣,王常玉,马丁;凋亡相关蛋白的表达及Caspase-3活性改变与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系[J];癌症;2002年12期

3 高勇,王杰军,许青,叶琴琴,郭静,耿怀成;人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究[J];第二军医大学学报;2001年01期

4 史曦凯,张翼军,赵春景;人参皂甙单体Rb1对多药耐药细胞系K562/HHT的耐药逆转作用[J];第三军医大学学报;1999年11期

5 王思功,李予蓉,王瑞宁,冯莉;仙鹤草对人癌细胞裸鼠移植瘤的影响[J];第四军医大学学报;1998年06期

6 黄添友，佟丽，吴波，梁谋，梁念慈，李吉来;四种植物多糖对S_（180）细胞膜磷脂酰肌醇转换的影响[J];第一军医大学学报;1995年03期

7 季宇彬,高世勇,孔琪,张秀娟,杨宝峰;海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca~(2+)]_i的影响[J];哈尔滨工业大学学报;2001年03期

8 蔡访勤,荆宇红,罗予,李金陵;枯否细胞及其抗肿瘤功能[J];河南医学研究;1999年04期

9 周俊,谭宁华;中国植物化学的回顾与展望[J];化学通报;1999年12期

10 李兴春;马经野;聂俊秀;;吉林省中草药对变形链球菌抑菌的研究[J];口腔医学研究;1987年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵翠兰，郭桂森，李开源，肖庆慈，毛小平;白蔹部分药理作用实验研究[J];云南中医中药杂志;1996年03期

2 闵凡印，周一鸿，宋学立，杨维高;白蔹炒制前后的体外抗菌作用[J];中国中药杂志;1995年12期

3 俞琦,蔡琨,田维毅;白蔹醇提物免疫活性的初步研究[J];贵阳中医学院学报;2005年02期

4 李洪娟;张蕾;王术光;;白蔹的药理作用及临床应用[J];食品与药品;2007年10期

5 汤军;徐志瑛;;徐志瑛运用白蔹经验[J];陕西中医;2006年01期

6 卞益民;;田青属植物Sesbania drummondii的抗肿瘤活性研究[J];国外医药.植物药分册;1982年02期

7 马维勇;李勇;王志光;尹述凡;张椿年;陈秀华;李炳生;;4-脱氧-4-磺酰胺基-4′-去甲表鬼臼毒素衍生物的合成和抗肿瘤活性研究[J];中国医药工业杂志;1993年05期

8 尹述凡;王志光;马维勇;陈秀华;王天都;张椿年;;4,4’-O-双(2-羟基-3-取代氨基)丙基-4-去甲表鬼臼毒素的合成及抗肿瘤活性[J];中国医药工业杂志;1993年11期

9 郭青龙;丁启龙;朱家璧;郑稳生;;阿霉素前体脂质体对实验性肿瘤的治疗效果[J];中国药科大学学报;1996年10期

10 秦爽;;蛇根木根对免疫细胞抗肿瘤活性的增强作用[J];国外医药.植物药分册;2003年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张梦美;叶晓川;黄必胜;刘焱文;;白蔹抗肿瘤活性部位的筛选研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

2 卢汝梅;李兵;苏醒;钟振国;张雯艳;;紫玉盘提取物体外抗肿瘤活性的实验研究[A];第二届临床中药学学术研讨会论文集[C];2009年

3 覃姣兰;陈振锋;袁涛;刘丽敏;刘延成;;新橙皮苷金属配合物的合成及其抗肿瘤活性研究[A];中国化学会第26届学术年会无机与配位化学分会场论文集[C];2008年

4 张洋;杨奕;林文翰;;角果木二萜及其抗肿瘤活性研究[A];中国化学会第28届学术年会第6分会场摘要集[C];2012年

5 李莉媛;朱天骄;李德海;顾谦群;;一株南极来源真菌抗肿瘤活性次级代谢产物的研究[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年

6 王朋;毕秀丽;郭玉梅;朴虎日;赵余庆;;25-OH-PPD脂肪酸酯类衍生物的合成和抗肿瘤活性评价[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

7 徐文清;李美佳;;植物药抗肿瘤活性成分的生物测定法[A];全国中药研究与开发学术研讨会论文摘要集[C];2001年

8 朱楠;于康;王慧;薛登启;张秋荣;刘宏民;;苯胺酞嗪类化合物的合成及抗肿瘤活性研究[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年

9 冯雪娇;任虹;曹学丽;;鸡血藤抗肿瘤活性成分的分离纯化研究[A];全国生物医药色谱学术交流会（2010景德镇）论文集[C];2010年

10 苏秀榕;蒋双;杨文新;杨春;;海蜇毒素抗肿瘤活性的初步研究[A];第八届全国中药和天然药物学术研讨会与第五届全国药用植物和植物药学学术研讨会论文集[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 河南 王松岳;[N];中国花卉报;2005年

2 俞琦；蔡琨；田维毅;[N];中国医药报;2005年

3 白毅;[N];中国医药报;2002年

4 ;[N];中国中医药报;2005年

5 张明德　郭旭光　刘志恒;[N];家庭医生报;2005年

6 记者　白毅;[N];中国医药报;2006年

7 仲海亮;[N];中国医药报;2006年

8 车文军 李志裕 尤启冬;[N];中国医药报;2007年

9 都红刚;[N];经济参考报;2007年

10 刘亦飞;[N];中国医药报;2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 周林;裂褶多糖的制备与理化特性及化学改性研究[D];华南理工大学;2006年

2 亓立峰;多聚糖纳米微粒吸附、杀菌和抗肿瘤活性及其机理研究[D];浙江大学;2005年

3 陈立;石蝉草化学成分及抗肿瘤活性的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

4 郑艳波;基于靶向肽的强化融合蛋白和化学偶联物的制备与抗肿瘤作用研究[D];中国协和医科大学;2007年

5 谭明雄;中药白花丹活性成分白花丹素金属配合物的合成、抗肿瘤活性及与DNA作用研究[D];中南大学;2008年

6 林爱群;三株海洋真菌次级代谢产物活性成分的研究[D];中国海洋大学;2008年

7 张霞;希夫碱配合物的合成、表征及抗肿瘤活性研究[D];中国海洋大学;2009年

8 王慧芳;吨酮衍生物金属配合物的合成、表征以及与DNA相互作用的研究[D];兰州大学;2009年

9 刘红椿;桔霉素三聚体Tricitrinol B的抗肿瘤活性及机制研究[D];中国海洋大学;2009年

10 崔岩;Edenia gomezpompae的抗肿瘤活性及其生物学特性研究[D];吉林大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杭佳;白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究[D];湖北中医药大学;2013年

2 张梦美;白蔹体外抗肿瘤活性成分筛选及作用机制研究[D];湖北中医药大学;2012年

3 于志斌;利用核糖体工程技术开拓海洋微生物药用新资源的研究[D];中国海洋大学;2005年

4 徐仲淼;含氮类黄酮衍生物的设计、合成和抗肿瘤活性研究[D];浙江大学;2006年

5 赵荔华;1，3-二氢-1，3-二氧-2H-异吲哚-N-取代衍生物的设计合成及其抗肿瘤活性研究[D];第二军医大学;2007年

6 罗海英;纳米硒溶胶的抗氧化和抗肿瘤活性的研究[D];暨南大学;2011年

7 闫莉萍;抗肿瘤活性海洋放线菌的分离筛选及其16S rDNA多样性分析[D];华南热带农业大学;2003年

8 孙晶波;多皱软海绵抗肿瘤活性成分研究[D];延边大学;2005年

9 高林;MCP多糖的制备、分析鉴定及其抗肿瘤作用的研究[D];天津大学;2005年

10 刘接卿;商陆有效成分的提取分离及其体外抗肿瘤活性的研究[D];吉林大学;2006年

  本文关键词：白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究，由笔耕文化传播整理发布。

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