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食管鳞癌中RKIP和MMP-10的表达及其预后分析

发布时间:2018-05-05 23:51

  本文选题:食管鳞癌 + RKIP ; 参考:《广西医科大学》2017年硕士论文


【摘要】:目的分析Raf激酶抑制蛋白(phosphatidylethanolamine-binding proteins,RKIP)和基质金属蛋白酶-10(Matrix metalloproteinase-10,MMP-10)mRNA和蛋白质在食管鳞癌组织中的表达情况以及两者之间的相互关系,并分析其表达的高低与临床病理和预后之间的关系。方法收取42例食管鳞癌患者的手术标本(2015年2月-2016年2月),提取癌和癌旁组织中的RNA,逆转录成cDNA后使用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RKIP和MMP-10在RNA水平的表达情况,探索二者表达与临床病理的关系以及二者相关性,并使用免疫组织化学SP法检测部分标本的癌与癌旁组织的蛋白表达,探究其表达差异。同时取2011-07—2014-11广西医科大学胸外科手术切除的食管鳞癌组织、癌旁组织的病理蜡块,采用免疫组织化学SP法检测检其中RKIP和MMP-10蛋白的表达,同样分析其表达与临床病理的关系和二者相关性,并作出预后分析;结果在新鲜组织标本中RKIP和MMP-10表达的研究中发现,癌旁正常组织中RKIP mRNA的表达量为鳞癌中的2.01倍,差异有统计学意义(t=5.126,P=0.000);食管鳞癌组织中的MMP-10 mRNA的表达水平高于癌旁正常组织,为癌旁组织的2.08倍,差异有统计学意义(t=5.983,P=0.000);RKIP和MMP-10的mRNA的表达量与患者的性别、年龄、分化程度均无关(P0.05),与淋巴结转移和TNM分期有关;RKIP mRNA的低表达和MMP-10 mRNA的高表达往往导致更晚的分期和淋巴结转移的倾向;RKIP mRNA和MMP-10 mRNA在RNA水平的表达同样呈现负相关(r=-0.527,P=0.000)。为了研究同一组织中RNA和蛋白表达的关系,同时对同批样本中的35例组织进行免疫组织化学SP法进行两指标蛋白水平的检测,发现RKIP蛋白在癌组织中的表达明显低于癌旁组织(x2=11.209,P=0.001),MMP-10蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织(x2=23.333,P=0.000),RKIP和MMP-10的转录水平与翻译水平的表达趋势一致。而在生存分析资料的免疫组织化学的研究中发现RKIP在食管鳞癌组织、癌旁组织的阳性表达率分别为28.26%、67.39%,食管鳞癌组织中的RKIP阳性表达率明显低于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(x2=28.227,P=0.001);MMP-10在食管鳞癌组织、癌旁组织的阳性表达率分别为71.74%、9.78%,食管鳞癌中MMP-10的阳性表达率明显高于癌旁组织,且差异有统计学意义(x2=73.127,P=0.000);RKIP和MMP-10的表达呈负相关(r=-0.372,P=0.000);在与临床病理学关系的研究中发现RKIP的表达仅与淋巴结转移有关(P0.05);而MMP-10的表达与淋巴结转移与否以及TNM分期密切相关(P0.05),Kaplan-Meier生存分析得出RKIP阴性的生存率低于阳性组(P0.01);MMP-10阳性组的生存率低于阴性组(P0.01),Cox回归分析得出淋巴结转移、RKIP阴性表达以及MMP-10阳性表达均可作为食管鳞癌患者的独立预后因子。结论RKIP和MMP-10在RNA和蛋白质水平表达趋势一致,且RKIP的低表达和MMP-10的高表达可能与食管鳞癌的发生、发展、侵袭以及转移密切相关,在食管鳞癌的诊断和评估有着很大的价值,并有可能作为食管鳞癌患者诊疗过程中的一个潜在的生物靶点。同时两指标的表达有很强的预后相关性,并且通过研究发现可视为独立的预后因子。二者在食管鳞癌组织中的表达呈负相关,RKIP可能通下调MMP-10的途径参与到食管鳞癌的侵袭、转移等过程。
[Abstract]:Objective to analyze the expression of Raf kinase inhibitor (phosphatidylethanolamine-binding proteins, RKIP) and matrix metalloproteinase -10 (Matrix metalloproteinase-10, MMP-10) mRNA and protein in esophageal squamous cell carcinoma and the relationship between them, and analyze the relationship between the expression level and the clinicopathology and prognosis. Methods 42 cases of esophageal squamous cell carcinoma (February 2015 -2016 February) were collected to extract RNA from cancer and paracancerous tissues. After reverse transcription to cDNA, the expression of RKIP and MMP-10 at RNA level was detected by fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR), and the relationship between the expression and the clinicopathology was explored and the correlation between the two groups was explored and the immunohistochemical S was used. P method was used to detect the protein expression of cancer and paracancerous tissue in some specimens, and to explore the difference in expression. At the same time, the expression of RKIP and MMP-10 protein in the tissue of the esophageal squamous cell resection in the Department of thoracic surgery of the Department of thoracic surgery of Guangxi Medical University was detected by the immunohistochemical SP method, and the expression and clinical analysis were also analyzed. The correlation of pathology and the correlation between the two and the prognosis analysis were made. Results in the study of the expression of RKIP and MMP-10 in fresh tissue specimens, the expression of RKIP mRNA in the normal tissue adjacent to the carcinoma was 2.01 times that of the squamous cell carcinoma (t=5.126, P=0.000), and the expression level of MMP-10 mRNA in the tissue of the esophageal squamous cell carcinoma was higher than that of the normal side of the carcinoma. The tissue, 2.08 times the para cancerous tissue, was statistically significant (t=5.983, P=0.000); the expression of mRNA in RKIP and MMP-10 was not related to the sex, age, and degree of differentiation of the patients (P0.05), related to lymph node metastasis and TNM staging; the low expression of RKIP mRNA and the high expression of MMP-10 mRNA tended to lead to a later stage and lymph node metastasis. The expression of RKIP mRNA and MMP-10 mRNA at RNA level was also negatively correlated (r=-0.527, P=0.000). In order to study the relationship between RNA and protein expression in the same tissue, the expression of two index proteins in 35 tissues in the same sample was detected by immunohistochemical SP method, and the expression of RKIP protein in cancer tissues was significantly lower than that in the same group. The expression of MMP-10 protein in the cancerous tissue (x2=11.209, P=0.001) was significantly higher than that of the para cancerous tissue (x2=23.333, P=0.000). The transcriptional level of RKIP and MMP-10 was consistent with the translation level. In the immunohistochemical study of survival analysis, RKIP was found in the squamous cell carcinoma of the esophagus, and the positive expression rate of the para cancer tissues was found. The positive expression rate of RKIP in the tissues of esophageal squamous cell carcinoma was significantly lower than that of normal tissues adjacent to the carcinoma (x2=28.227, P=0.001), and the positive expression rate of MMP-10 in the tissues of esophageal squamous cell carcinoma was 71.74% and 9.78% respectively, and the positive rate of MMP-10 in esophageal squamous cell carcinoma was significantly higher than that in the para cancerous tissue, and the difference was found. Statistical significance (x2=73.127, P=0.000); the expression of RKIP and MMP-10 was negatively correlated (r=-0.372, P=0.000). In the study of the relationship with clinicopathology, the expression of RKIP was only associated with lymph node metastasis (P0.05), and the expression of MMP-10 was closely related to lymph node metastasis and TNM stage (P0.05), and Kaplan-Meier survival analysis showed negative negative. The survival rate of the group was lower than that of the positive group (P0.01), the survival rate of the MMP-10 positive group was lower than the negative group (P0.01), the Cox regression analysis showed that the lymph node metastasis, the negative expression of RKIP and the positive expression of MMP-10 could be the independent prognostic factors of the patients with esophageal squamous cell carcinoma. Conclusion RKIP and MMP-10 are consistent with the expression trend of RNA and protein levels, and the low expression and M of RKIP. The high expression of MP-10 may be closely related to the occurrence, development, invasion and metastasis of esophageal squamous cell carcinoma. It is of great value in the diagnosis and evaluation of squamous carcinoma of the esophagus, and may be a potential biological target in the diagnosis and treatment of esophageal squamous cell carcinoma. At the same time, the expression of the two indicators has a strong prognostic correlation and is found through research. It can be seen as an independent prognostic factor. The expression of two in the squamous cell carcinoma of the esophagus is negatively correlated, and RKIP may be involved in the invasion and metastasis of esophageal squamous cell carcinoma through the way of reducing the MMP-10.

【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R735.1

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本文编号:1849806

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