SIRT1对肝癌细胞耐药敏感性的影响

发布时间：2018-05-08 17:19

  本文选题：沉默信息调节因子样蛋白 + RNA干扰　； 参考：《军事医学》2017年02期

【摘要】：目的构建沉默信息调节因子(silent information regulaor,Sir)样蛋白1(Sirtuin 1,SIRT1)的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,获得敲低SIRT1的肝癌细胞系,以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用。方法设计针对SIRT1靶点特异性的干涉序列,连接到经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切的pSicoR-GFP载体,慢病毒包装293T产生病毒,感染肝癌细胞,建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株。利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果;通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞增殖能力的影响;通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达,考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响。结果实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达,SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力,下调耐药基因的表达,增强肝癌细胞的药物敏感性。结论 SIRT1抑制肝癌细胞耐药性。
[Abstract]:Objective to construct the lentivirus vector of silent information regulatory sir-1 (1(Sirtuin 1)-like protein of silencing information regulator, and obtain the cell line of hepatocellular carcinoma with low SIRT1 knockout, in order to investigate its effect on the proliferation and drug resistance of hepatoma cells. Methods the interference sequence specific to SIRT1 target was designed and ligated to pSicoR-GFP vector digested by Hpa 鈪，

本文编号：1862304