Robo4及CXCR4基因在成人初发急性髓系白血病中的表达及临床意义分析

发布时间：2018-05-16 08:07

本文选题：白血病 + 髓样　；参考：《山西医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:本研究拟检测成人初发急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者Robo4及CXCR4基因的表达量,并探讨其与AML患者临床实验室特点、疗效及预后的相关性,进而对AML患者的预后评估和治疗提供新思路。方法:1、收集初发成人AML患者骨髓标本及正常对照骨髓标本。2、从Gene Bank检索Robo4及CXCR4基因RNA序列,应用primer5.0软件设计引物,经BLAST进行同源检索后,引物由上海生工生物公司合成,并对引物进行验证,以β-actin做为内参基因,运用SYBR Green荧光染料法对Robo4及CXCR4基因进行实时定量PCR分析,使用2-△△CT法计算Robo4及CXCR4基因的相对表达量。3、收集AML患者的性别、年龄、髓外浸润情况、疗效、无复发生存(Relapse free survival,RFS)时间等临床资料,初诊时外周血细胞计数、乳酸脱氢酶计数、骨髓原始细胞比例、WT1基因表达水平、细胞遗传学、分子学突变及融合基因等实验室结果,并对其进行分析,做预后随访。4、根据Robo4及CXCR4基因的中位表达水平进行分组,采用SPSS-21统计软件对各组患者之间的临床实验室特征、疗效及RFS进行统计分析。结果:1、本研究共纳入75例成人初发AML患者,其中男性51例,女性24例,中位年龄为43(15-72)岁,其中69例接受了诱导化疗,6例患者放弃治疗,接受治疗的69例患者中40例达完全缓解(Complete remission,CR),8例达部分缓解(Partial remission,PR),21例未达缓解。对达到缓解的48例患者进行随访,其中1例失访,中位随访时间为8.3(0.5-11.5)个月,至随访截止日期,有19例患者疾病复发,中位RFS为6.2个月。2、Robo4基因中位表达水平在AML患者为37.66(0.005-74502.44),正常对照者为0.774(0.135-25.36),AML患者Robo4基因表达水平明显增高,差异有统计学意义(P=0.006);CXCR4基因中位表达水平在AML患者中为3.40(0.002-37.40),正常对照者为0.935(0.241-6.463),AML患者CXCR4基因表达水平明显增高,差异有统计学意义(P=0.003)。3、以Robo4基因的中位表达量37.66为界限,将AML患者分为高表达组(38例)和低表达组(37例),Robo4基因的表达水平男性明显高于女性(中位数分别为135.67和15.73,P=0.004);Robo4基因高表达组血红蛋白浓度明显高于低表达组(均数分别为83.60g/L和72.78g/L,P=0.032);高表达组的低危患者比例明显低于低表达组(分别为13.16%和32.43%,P=0.046)。4、以CXCR4基因的中位表达量3.40为界限,将AML患者分为高表达组(38例)和低表达组(37例),以CXCR4基因作为分类变量进行分析,高表达组中具有不良的染色体核型患者比例为23.68%,明显高于低表达组0.0%,P=0.04%;高表达组的高危患者比例为36.84%,明显高于低表达组的13.51%,P=0.043;高表达组WT1基因中位表达水平为760.0(7.4-301001.0),明显低于低表达组2596.0(0.0-20812.0),P=0.042;高表达组AML1-ETO融合基因阳性患者的比例为7.89%,明显低于低表达组27.02%,P=0.029。当CXCR4基因表达水平作为连续变量分析时,髓外浸润患者的CXCR4基因中位表达量明显高于无浸润组(中位数分别为10.52和3.54,P=0.021);染色体核型不良组的CXCR4基因中位表达量明显高于预后中等组和良好组(中位数分别为7.81、3.54和0.92,P=0.003);AML1-ETO融合基因阳性组的CXCR4基因表达水平明显低于阴性组(中位数分别为0.92和4.06,P=0.010)。5、Robo4基因中位表达水平在CR组为34.78(0.001-5431.0),明显低于NR组的290.17(3.48-74502.0),P=0.028;CXCR4基因中位表达水平在CR组为3.06(0.001-37.40),明显低于NR组的6.94(1.72-24.17),P=0.039。此外,将Robo4和CXCR4基因表达水平联合分析时发现两者均高表达组的NR率明显高于两者均低表达组(分别为44.0%和15.0%,P=0.037)。6、对47例获得缓解的患者进行了RFS分析,将Robo4和CXCR4基因表达水平进行单独分析时,低表达组与高表达组在RFS上并没有统计学差异(P0.05);将Robo4和CXCR4基因表达水平联合分析时发现两者均高表达组的RFS(预计中位RFS为6.0个月,95%CI 4.65-7.34),明显短于两者均低表达组,P=0.030。(由于本研究随访时间较短,至随访截至时间,低表达组累计复发率未达到50%,故未得出预计中位RFS时间)。结论:1、初发成人AML患者中Robo4及CXCR4基因表达水平明显高于正常人。2、Robo4基因表达水平与危险度分层低危及CR率呈负相关,提示Robo4基因高表达可能是AML患者预后不良的指标之一。3、CXCR4表达水平与WT1基因表达水平、CR率呈负相关,与髓外浸润、不良染色体核型异常及危险度分层高危呈正相关,提示CXCR4基因高表达可能是AML患者预后不良的指标之一。4、将Robo4和CXCR4基因表达水平联合分析时发现两者均高表达组的NR率明显高于两者均低表达组,两者均高表达组的RFS明显短于两者均低表达组,提示Robo4及CXCR4基因联合检测对于预后判断更有意义。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of Robo4 and CXCR4 genes in patients with acute myeloid leukemia ( AML ) and to explore the correlation between the clinical laboratory characteristics , efficacy and prognosis of AML patients . The expression level of Robo4 gene was 3.40 ( 0.005 - 74502.44 ) . The level of expression of Robo4 gene was significantly higher than that in low expression group ( P = 0.006 ) . The level of expression of Robo4 gene was 3.40 ( 0.245 - 25.36 ) , the level of Robo4 gene was 36.84 % , P = 0.043 , and the level of expression of WT1 gene in high expression group was 760 . 0 ( 7.4 -301001 ) . The level of CXCR4 gene expression was significantly higher than that in the non - invasive group ( P = 0.021 ) . The level of CXCR4 gene expression was significantly lower in the patients with AML than in the non - invasive group ( P = 0.021 ) . Conclusion : 1 . The expression level of Robo4 and CXCR4 in patients with primary AML was significantly higher than that of normal controls . The level of expression of Robo4 was negatively correlated with the low risk stratification , suggesting that high expression level of Robo4 might be one of the indicators of poor prognosis in AML patients .

【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R733.71

【参考文献】