自噬抑制剂羟氯喹联合顺铂治疗铂耐药卵巢癌的可行性研究

发布时间：2018-06-24 16:18

  本文选题：上皮性卵巢癌 + beclin1　； 参考：《昆明理工大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的：从组织水平上,我们检测自噬基因beclin1、耐药相关基因Survivin以及ERCC1在良性卵巢肿瘤组织、交界性卵巢肿瘤组织以及上皮性卵巢癌组织中的表达,分析beclin1、Survivin、ERCC1在不同肿瘤组织之间,在不同病理特征之间,在对铂药物的敏感与耐药之间以及两两表达的相关性上的表达的差异,探讨beclin1、 Survivin、ERCC1在上皮性卵巢癌的发生发展和耐药中的关系,希望能为改善上皮性卵巢癌的化疗效果,为卵巢癌的预后提供理论依据。从个体水平上,通过建立裸鼠卵巢癌耐药移植瘤模型,从细胞自噬角度探讨自噬抑制剂羟氯喹联合顺铂治疗耐药卵巢癌的可行性,观察羟氯喹对耐药卵巢癌化疗敏感性的影响,探索细胞自噬与卵巢癌、自噬与化疗耐药之间的关系,以期从一个较新的角度为改善卵巢癌治疗现状提供新的思路。方法：1.采用免疫组织化学的方法检测beclin1、Survivin、ERCC1在60例卵巢肿瘤组织(其中包含13例良性卵巢肿瘤组织、8例交界性卵巢肿瘤组织以及39例上皮性卵巢癌组织)中的表达。2.培养人卵巢铂耐药SKOV3/DDP细胞,建立耐药卵巢癌裸鼠移植瘤模型。40只SKOV3/DDP裸鼠皮下移植瘤模型随机分为4组,每组10只,一次注射量为0.2m1,每2d注射1次,干预处理时间共3周。生理盐水组：腹腔内注射生理盐水；HCQ组：腹腔内注射HCQ,剂量为5mg/kg; DDP组：腹腔内注射DDP,剂量为3mg/kg; HCQ+DDP组：腹腔内注射HCQ和DDP, HCQ剂量为5mg/kg, DDP剂量为3mg/kg。观察记录比较生理盐水组、HCQ组、DDP组、HCQ+DDP组治疗前后裸鼠体重和瘤体积的变化情况。3.用SPSS19.0软件对实验数据进行处理分析,采用χ2检验、t检验、Fisher's精确概率法进行评估。p0.05被认为是具有统计学意义的。结果：1.免疫组化中beclinl主要为细胞浆着色,有些许细胞核着色,染色强度较强。2.免疫组化中Survivin在上皮性卵巢癌组织中主要为细胞浆着色,在交界性卵巢肿瘤组织中主要为细胞核着色,染色强度较弱。3.免疫组化中ERCC1为细胞核着色,染色强度较弱。4. beclinl在13例良性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率为15.4%,在8例交界性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率为50.0%,39例上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为表达56.4%。beclinl在良性卵巢肿瘤组织中的阳性表达水平明显高于交界性卵巢肿瘤组织和上皮性卵巢癌组织中的阳性表达水平,χ2=6.635,P=0.0360.05,差异具有显著性,具有统计学意义。5. ERCC1在13例良性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率为7.7%,在8例交界性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率为50.0%,39例上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为表达15.4%。ERCC1在交界性卵巢肿瘤组织中的阳性表达水平明显高于良性卵巢肿瘤组织和上皮性卵巢癌组织中的阳性表达水平,χ2=6.568,P=0.0370.05,差异具有显著性,具有统计学意义。6.在临床分期上,Ⅰ～Ⅱ期上皮性卵巢癌患者的beclinl阳性表达水平低于阴性表达水平,Ⅲ～Ⅳ期上皮性卵巢癌患者beclinl的阳性表达水平高于阴性表达水平,beclinl在Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率为75.0%,高于在Ⅰ～Ⅱ期36.8%的阳性表达率,P=0.0250.05,差异具有显著性,具有统计学意义。7.在临床分期上,Ⅰ～Ⅱ期上皮性卵巢癌患者的Survivin阳性表达水平明显低于阴性表达水平,Ⅲ～Ⅳ期上皮性卵巢癌患者Survivin的阳性表达水平低于阴性表达水平,但Survivin在Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率为35.0%,高于在Ⅰ～Ⅱ期5.3%的阳性表达率,P=0.0440.05,差异具有显著性,具有统计学意义。8.上皮性卵巢癌患者中,beclinl在铂耐药患者中的阳性表达水平低于阴性表达水平,在铂敏感患者中的阳性表达水平高于阴性表达水平,beclinl在铂敏感患者中的阳性表达率为15.4%,低于铂耐药患者53.8%的阳性表达率,并且差异明显,,P=0.0220.05,具有统计学意义。9.人卵巢癌铂耐药细胞株SKOV3/DDP细胞呈现不规则形态,单层贴壁生长,细胞6-7天传代一次。10. BALB/C (nu/nu)裸鼠接种SKOV3/DDP细胞于28天左右全部成瘤。11.各组裸鼠体重在治疗前后都有不同程度的减少,经统计学分析,其中对照组即生理盐水组和实验组中的DDP组的体重治疗前后差异明显,具有统计学意义(p0.05)。12.生理盐水组、HCQ组、DDP组和HCQ+DDP组的末体重与初体重的比值均大于0.8,均可判定为无毒。13.生理盐水组裸鼠的肿瘤体积最大,其次是HCQ组、DDP组,HCQ+DDP组裸鼠肿瘤体积最小。14.生理盐水组肿瘤重量远大于其他三个实验组,瘤重0.78g,实验组中HCQ组和DDP组肿瘤重量相差不大,分别为0.59g和0.55g,HCQ+DDP组肿瘤重量最小,为0.16g。15.实验组HCQ组、DDP组、HCQ+DDP组裸鼠肿瘤的抑瘤率分别为19.5%、27.1%、68.4%。HCQ+DDP组的抑瘤率高于HCQ组和DDP组,HCQ组的抑瘤率最低。结论：1. beclinl在上皮性卵巢癌中高表达,说明beclinl可能在卵巢癌的发生中起作用,抑制beclinl的表达可能控制肿瘤的发生。2. beclinl在Ⅲ～Ⅳ期临床上高表达,说明可能在卵巢癌的发展中起作用,抑制beclinl蛋白的表达可能延缓肿瘤的发展。3. Survivin在Ⅲ～Ⅳ期临床上高表达,说明可能在卵巢癌的发展中起作用,抑制Survivin的表达可能延缓肿瘤的发展。4. ERCC1在交界性卵巢肿瘤组织中高表达,提示ERCC1可能用于早期卵巢癌的检测。5. beclinl在铂耐药患者中高表达,抑制beclinl的表达可能增加卵巢癌的铂敏感性,从而增强铂类药物对卵巢癌的治疗作用。6.体外培养条件下SKOV3/DDP细胞生长速度较慢。7.裸鼠成瘤率100%。8. HCQ+DDP组抑瘤作用最明显。提示HCQ可能增强人卵巢癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,HCQ与DDP可能有抗肿瘤的协同作用。9.在自噬抑制剂HCQ联合DDP的治疗中,降低了DDP的毒副作用,说明临床化疗中可能通过联合用药减低DDP的毒性,提高患者的耐受性。10.自噬在短期内对肿瘤细胞有保护作用,证明肿瘤发展初期过程中利用自噬保护肿瘤细胞。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between the expression of beclin1 , Survivin and ERCC1 in ovarian cancer , and to explore the relationship between the sensitivity and drug resistance of ovarian cancer , and to explore the relationship between cell autophagy , ovarian cancer , self - tophagy and chemotherapy resistance .
The expression of survivin in epithelial ovarian carcinoma was significantly higher than that in the borderline ovarian tumor tissues ( P = 0.0360 . 05 ) , and the positive expression rate of the expression of Survivin in the benign ovarian tumor tissues was significantly higher than that in the borderline ovarian tumor tissues ( P = 0.0360 . 05 ) . The positive rate of expression of survivin in epithelial ovarian carcinoma was significantly lower than that of negative expression level in 8 cases of borderline ovarian cancer . Results : 1 . The tumor volume of nude mice in control group , HCQ group , DDP group and HCQ + DDP group was significantly higher than that in HCQ group and DDP group , and the tumor weight of HCQ + DDP group was higher than that in other three experimental groups . Survivin is highly expressed in stage 鈪，

本文编号：2062129